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LPS诱导的免疫相关基因在免疫系统中潜在功能的研究

中文摘要第1-10页
Abstract第10-15页
第一章 LPS 诱导的免疫反应研究进展综述第15-30页
   ·引言第15-16页
   ·固有免疫的组成第16-19页
   ·TLRs 参与的免疫反应途径第19-21页
   ·LPS 诱导的免疫相关基因的研究第21-23页
   ·展望第23-24页
 参考文献第24-30页
第二章 Rab10 在免疫系统中的潜在作用第30-76页
   ·前言第30-31页
   ·材料与方法第31-59页
     ·实验材料第31-32页
     ·实验方法第32-59页
       ·LPS 刺激DC、RAW264.7 细胞检测Rab10 基因的变化第32-37页
       ·相关质粒的构建第37-44页
       ·Rab10 RNAi 稳转细胞系的构建第44-46页
       ·Rab10 过表达以及RNA 干扰后细胞增殖检测第46页
       ·Rab10 基因RNA 干扰后细胞周期检测第46-47页
       ·Rab10 基因RNA 干扰后细胞凋亡检测第47页
       ·Rab10 过表达对细胞表面分子,吞噬能力的影响分析第47-48页
       ·Rab10 过表达对抗原递呈能力的检测第48-49页
       ·相关启动子活性NF-κB, IFN-β 的分析第49-50页
       ·相关mRNA 的表达水平分析第50-51页
       ·ELISA 分析相关细胞因子的蛋白表达水平第51-52页
       ·Western Bolt 检测相关信号途径中蛋白的磷酸化水平第52-55页
       ·Rab10 与TLR4 蛋白在细胞内的定位分析第55-56页
       ·流式细胞术分析细胞表面TLR4 的变化第56-57页
       ·小鼠急性肺损伤模型体内研究Rab10 的功能第57-58页
       ·PolyI:C 及CpG 刺激Rab10 RNA 干扰后的细胞,检测相关细胞因子的变化第58-59页
       ·数据处理第59页
   ·实验结果第59-72页
     ·Rab10 在DC 以及RAW264.7 细胞中mRNA 的表达情况第59页
     ·Rab10 基因RNA 干扰后对细胞增殖,周期以及凋亡的影响第59-60页
     ·过表达Rab10 基因后,对细胞表面分子、抗原递呈能力及细胞增殖的影响第60-61页
     ·Rab10 过表达后,相关启动子的活性,细胞因子以及信号通路相关蛋白磷酸化水平的检测结果第61-62页
     ·Rab10 基因沉默之后,相关启动子的活性,细胞因子以及信号通路相关蛋白磷酸化水平的检测结果第62-64页
     ·Rab10 突变体对细胞因子及信号通路相关蛋白磷酸化水平的检测结果第64-65页
     ·不同LPS 刺激时间,Rab10 以及TLR4 在细胞的定位第65-67页
     ·流式细胞术检测不同时间LPS 刺激细胞表面TLR4 的变化情况第67-68页
     ·Rab10 在小鼠急性肺损伤模型的相关结果第68-71页
     ·PolyI:C 以及CpG 刺激Rab10 基因沉默细胞的相关细胞因子变化第71-72页
   ·小结及讨论第72-74页
 参考文献第74-76页
第三章 Sik1 在免疫调节中潜在功能的研究第76-97页
   ·前言第76-77页
   ·材料与方法第77-87页
     ·实验材料第77-78页
     ·实验方法第78-87页
       ·DC、Mφ 及RAW264.7 中Sik1 基因的表达第78-79页
       ·Sik1 过表达病毒载体的构建以及相关病毒的包装纯化第79-84页
       ·流式细胞术检测带有病毒感染细胞的效率第84-85页
       ·定量PCR 检测Sik1 过表达以及RNA 干扰后相关细胞因子 mRNA 水平的变化第85-86页
       ·荧光素酶报告基因分析NF-κB 启动子活性第86页
       ·Western blot 检测相关信号通路蛋白的变化第86-87页
       ·统计学处理第87页
   ·实验结果第87-92页
     ·不同时间LPS 刺激RAW264.7,DC,原代巨噬细胞中Sik1 的mRNA 的表达情况第87-88页
     ·质粒的鉴定结果第88-89页
     ·流式细胞术及半定量PCR 检测病毒感染细胞的效率第89-90页
     ·Sik1 过表达后相关细胞因子的mRNA 水平的检测结果第90-91页
     ·Sik1 RNA 干扰之后,相关细胞因子的mRNA 水平的检测结果第91页
     ·Western blot 及Luciferase assay 检测相关信号通路的变化第91-92页
   ·小结及讨论第92-94页
 参考文献第94-97页
附录第97-98页
致谢第98页

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