中文摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-15页 |
第一章 LPS 诱导的免疫反应研究进展综述 | 第15-30页 |
·引言 | 第15-16页 |
·固有免疫的组成 | 第16-19页 |
·TLRs 参与的免疫反应途径 | 第19-21页 |
·LPS 诱导的免疫相关基因的研究 | 第21-23页 |
·展望 | 第23-24页 |
参考文献 | 第24-30页 |
第二章 Rab10 在免疫系统中的潜在作用 | 第30-76页 |
·前言 | 第30-31页 |
·材料与方法 | 第31-59页 |
·实验材料 | 第31-32页 |
·实验方法 | 第32-59页 |
·LPS 刺激DC、RAW264.7 细胞检测Rab10 基因的变化 | 第32-37页 |
·相关质粒的构建 | 第37-44页 |
·Rab10 RNAi 稳转细胞系的构建 | 第44-46页 |
·Rab10 过表达以及RNA 干扰后细胞增殖检测 | 第46页 |
·Rab10 基因RNA 干扰后细胞周期检测 | 第46-47页 |
·Rab10 基因RNA 干扰后细胞凋亡检测 | 第47页 |
·Rab10 过表达对细胞表面分子,吞噬能力的影响分析 | 第47-48页 |
·Rab10 过表达对抗原递呈能力的检测 | 第48-49页 |
·相关启动子活性NF-κB, IFN-β 的分析 | 第49-50页 |
·相关mRNA 的表达水平分析 | 第50-51页 |
·ELISA 分析相关细胞因子的蛋白表达水平 | 第51-52页 |
·Western Bolt 检测相关信号途径中蛋白的磷酸化水平 | 第52-55页 |
·Rab10 与TLR4 蛋白在细胞内的定位分析 | 第55-56页 |
·流式细胞术分析细胞表面TLR4 的变化 | 第56-57页 |
·小鼠急性肺损伤模型体内研究Rab10 的功能 | 第57-58页 |
·PolyI:C 及CpG 刺激Rab10 RNA 干扰后的细胞,检测相关细胞因子的变化 | 第58-59页 |
·数据处理 | 第59页 |
·实验结果 | 第59-72页 |
·Rab10 在DC 以及RAW264.7 细胞中mRNA 的表达情况 | 第59页 |
·Rab10 基因RNA 干扰后对细胞增殖,周期以及凋亡的影响 | 第59-60页 |
·过表达Rab10 基因后,对细胞表面分子、抗原递呈能力及细胞增殖的影响 | 第60-61页 |
·Rab10 过表达后,相关启动子的活性,细胞因子以及信号通路相关蛋白磷酸化水平的检测结果 | 第61-62页 |
·Rab10 基因沉默之后,相关启动子的活性,细胞因子以及信号通路相关蛋白磷酸化水平的检测结果 | 第62-64页 |
·Rab10 突变体对细胞因子及信号通路相关蛋白磷酸化水平的检测结果 | 第64-65页 |
·不同LPS 刺激时间,Rab10 以及TLR4 在细胞的定位 | 第65-67页 |
·流式细胞术检测不同时间LPS 刺激细胞表面TLR4 的变化情况 | 第67-68页 |
·Rab10 在小鼠急性肺损伤模型的相关结果 | 第68-71页 |
·PolyI:C 以及CpG 刺激Rab10 基因沉默细胞的相关细胞因子变化 | 第71-72页 |
·小结及讨论 | 第72-74页 |
参考文献 | 第74-76页 |
第三章 Sik1 在免疫调节中潜在功能的研究 | 第76-97页 |
·前言 | 第76-77页 |
·材料与方法 | 第77-87页 |
·实验材料 | 第77-78页 |
·实验方法 | 第78-87页 |
·DC、Mφ 及RAW264.7 中Sik1 基因的表达 | 第78-79页 |
·Sik1 过表达病毒载体的构建以及相关病毒的包装纯化 | 第79-84页 |
·流式细胞术检测带有病毒感染细胞的效率 | 第84-85页 |
·定量PCR 检测Sik1 过表达以及RNA 干扰后相关细胞因子 mRNA 水平的变化 | 第85-86页 |
·荧光素酶报告基因分析NF-κB 启动子活性 | 第86页 |
·Western blot 检测相关信号通路蛋白的变化 | 第86-87页 |
·统计学处理 | 第87页 |
·实验结果 | 第87-92页 |
·不同时间LPS 刺激RAW264.7,DC,原代巨噬细胞中Sik1 的mRNA 的表达情况 | 第87-88页 |
·质粒的鉴定结果 | 第88-89页 |
·流式细胞术及半定量PCR 检测病毒感染细胞的效率 | 第89-90页 |
·Sik1 过表达后相关细胞因子的mRNA 水平的检测结果 | 第90-91页 |
·Sik1 RNA 干扰之后,相关细胞因子的mRNA 水平的检测结果 | 第91页 |
·Western blot 及Luciferase assay 检测相关信号通路的变化 | 第91-92页 |
·小结及讨论 | 第92-94页 |
参考文献 | 第94-97页 |
附录 | 第97-98页 |
致谢 | 第98页 |