摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
第一章 前言 | 第13-37页 |
1 硫代葡萄糖苷—黑芥子酶系统 | 第13-25页 |
·硫苷 | 第13-21页 |
·硫苷的结构 | 第14页 |
·硫苷的生物合成 | 第14-20页 |
·硫苷降解 | 第20-21页 |
·黑芥子酶及其复合体 | 第21-24页 |
·黑芥子酶的性质和特点 | 第22页 |
·黑芥子酶与黑芥子酶复合体 | 第22-24页 |
·黑芥子酶细胞 | 第24页 |
·硫苷—黑芥子酶系统在植物防御反应中的作用 | 第24-25页 |
2 植物启动子 | 第25-35页 |
·启动子组成 | 第26-27页 |
·TATA框 | 第26-27页 |
·一般上游启动子元件 | 第27页 |
·特殊的上游元件 | 第27页 |
·植物基因启动子分类 | 第27-35页 |
·组成型启动子 | 第28-29页 |
·细胞、组织或器官特异型启动子 | 第29-31页 |
·在生殖器官中的特异表达的启动子 | 第31-32页 |
·诱导型启动子 | 第32-35页 |
3 本研究的主要内容和意义 | 第35-37页 |
第二章 iMyAP启动子的分段扩增与表达载体的构建 | 第37-53页 |
1 材料与方法 | 第37-42页 |
·材料 | 第37页 |
·药品与试剂 | 第37-38页 |
·方法 | 第38-42页 |
·iMyAP启动子序列分析 | 第38页 |
·双元表达载体构建 | 第38-41页 |
·PCR反应用引物 | 第38-39页 |
·PCR反应、产物回收和测序 | 第39页 |
·双元表达载体的构建 | 第39-41页 |
·工程菌转化 | 第41-42页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第41页 |
·热激法转化大肠杆菌 | 第41页 |
·冻熔法转化根癌农杆菌 | 第41-42页 |
2 结果与分析 | 第42-49页 |
·iMyAP启动子基序分析 | 第42-46页 |
·目的序列克隆与PCR扩增检测结果 | 第46页 |
·测序结果的同源性比对 | 第46-48页 |
·表达载体转化农杆菌后的检测 | 第48-49页 |
3 讨论 | 第49-53页 |
·感受态细胞的制备和转化 | 第49-50页 |
·PCR扩增 | 第50页 |
·目的序列克隆的筛选与鉴定 | 第50-51页 |
·双元表达载体的构建 | 第51-53页 |
第三章 拟南芥的遗传转化及转化子的筛选 | 第53-63页 |
1 材料与方法 | 第55-58页 |
·材料 | 第55页 |
·药品及试剂 | 第55页 |
·仪器设备 | 第55-56页 |
·方法 | 第56-58页 |
·拟南芥的培养(栽培) | 第56页 |
·拟南芥的遗传转化 | 第56-57页 |
·农杆菌的扩大培养 | 第56页 |
·浸花法转化拟南芥 | 第56-57页 |
·转化子的筛选 | 第57-58页 |
2 结果 | 第58-61页 |
·不同的农杆菌菌株转化的结果 | 第58-61页 |
·转化子的鉴定 | 第61页 |
3 讨论 | 第61-63页 |
·有关拟南芥的遗传转化 | 第61-62页 |
·转化子的筛选 | 第62-63页 |
第四章 iMyAP启动子启动功能的分段分析 | 第63-86页 |
1 材料与方法 | 第64-69页 |
·材料 | 第64-65页 |
·药品试剂与仪器 | 第65页 |
·方法 | 第65-69页 |
·转化子的生长与处理 | 第65-66页 |
·茉莉酸处理 | 第65页 |
·创伤处理 | 第65-66页 |
·高低温处理 | 第66页 |
·GUS活性的组织化学检测 | 第66-67页 |
·大规模叶片GUS荧光定量检测 | 第67-68页 |
·样品制备 | 第67页 |
·蛋白质定量分析 | 第67-68页 |
·GUS活性检测 | 第68页 |
·数据统计分析 | 第68-69页 |
2 结果与分析 | 第69-81页 |
·GUS活性的组织化学检测 | 第69-77页 |
·甲基茉莉酸诱导GUS基因表达的结果 | 第69-70页 |
·创伤诱导GUS基因表达的结果 | 第70-71页 |
·诱导型启动子转变为保卫细胞组织特异性启动子 | 第71-73页 |
·温度变化与不同长度iMyAP启动子的诱导作用 | 第73-75页 |
·iMyAP启动子诱导启动组织细胞水平上的GUS基因表达 | 第75-77页 |
·叶片GUS荧光定量检测 | 第77-81页 |
·叶片BSA蛋白质标准曲线 | 第77-78页 |
·4—甲基伞形酮标准曲线 | 第78-79页 |
·叶片GUS活性荧光定量检测结果 | 第79-81页 |
3 讨论 | 第81-86页 |
·蛋白质含量的测定方法 | 第81-83页 |
·诱导型iMyAP启动子的特征和核心启动子 | 第83-84页 |
·根尖中GUS表达的特征分析 | 第84-86页 |
参考文献 | 第86-94页 |
符号表 | 第94-96页 |
致谢 | 第96-97页 |
作者简历 | 第97-98页 |