应用重组工程技术构建侵袭性E.coli DH10B
| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-20页 |
| ·载体细菌 | 第11-12页 |
| ·Red重组工程 | 第12-15页 |
| ·Red同源重组系统的应用策略 | 第15-16页 |
| ·Red同源重组的应用 | 第16-18页 |
| ·染色体上基因的修饰 | 第16-17页 |
| ·对 BAC质粒进行修饰 | 第17页 |
| ·缺口修复(gap repair) | 第17-18页 |
| ·本论文的研究内容 | 第18-20页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第20-31页 |
| ·实验材料 | 第20-24页 |
| ·实验方法 | 第24-31页 |
| 第三章 实验结果 | 第31-46页 |
| ·质粒pGB2Ωinv-hly的构建 | 第31-32页 |
| ·重组菌 E.coli DH10B的构建 | 第32-39页 |
| ·hly基因替换lac操纵子lacZ | 第32-33页 |
| ·inv基因替换lac操纵子lacA | 第33-35页 |
| ·P4黏附因子敲入1am B | 第35-37页 |
| ·asd基因的缺失 | 第37-38页 |
| ·E.coli DH10B △asd功能鉴定 | 第38页 |
| ·重组菌株的稳定性实验 | 第38-39页 |
| ·体外侵袭实验 | 第39-43页 |
| ·重组菌对细胞的毒性 | 第39-40页 |
| ·重组菌运送外源 DNA的能力 | 第40-41页 |
| ·重组菌 CWY6运送蛋白的能力 | 第41-42页 |
| ·激光共聚焦荧光显微镜观察胞内细菌 | 第42-43页 |
| ·体内侵袭实验 | 第43-46页 |
| ·表达 CTB疫苗株的构建 | 第43页 |
| ·RNA水平检测 CTB基因的表达情况 | 第43-44页 |
| ·蛋白水平检测 CTB基因的表达情况 | 第44页 |
| ·血清IgG抗体测定 | 第44-46页 |
| 第四章 讨论 | 第46-51页 |
| ·侵袭性大肠杆菌的构建 | 第46-47页 |
| ·体外侵袭实验 | 第47-48页 |
| ·体内侵袭实验 | 第48-51页 |
| 第五章 结论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-56页 |
| 发表文章 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
