1 前言 | 第1-45页 |
·纹枯病病原 | 第15-16页 |
·玉米纹枯病病菌病害的组织病理学 | 第16-17页 |
·玉米的生育阶段与感病程度 | 第17页 |
·玉米纹枯病病原菌的致病机制 | 第17-18页 |
·纹枯病抗性机制研究 | 第18-20页 |
·玉米纹枯病抗性遗传效应的研究 | 第20-21页 |
·植物抗病研究 | 第21-37页 |
·植物的抗病性 | 第21-22页 |
·植物抗病的分子机理 | 第22-31页 |
·信号识别 | 第22-25页 |
·信号传导 | 第25-31页 |
·Ca~(2+)信使 | 第25页 |
·cAMP信使 | 第25-26页 |
·磷脂酰肌醇信使 | 第26页 |
·某些特殊的信号分子 | 第26-31页 |
·水杨酸 | 第26页 |
·乙烯 | 第26-28页 |
·活性氧 | 第28-31页 |
·超敏反应 | 第31页 |
·植物系统获得抗病性 | 第31-33页 |
·细胞程序化死亡在植物抗病中的研究 | 第33页 |
·几种含铁蛋白在植物抗病中的研究 | 第33-37页 |
·功能基因组学与植物抗病研究 | 第37-42页 |
·mRNA差别显示技术 | 第38-39页 |
·代表性差异显示技术 | 第39页 |
·cDNA-AFLP技术 | 第39-40页 |
·cDNA微阵列和DNA芯片技术 | 第40-41页 |
·抑制性差减杂交技术 | 第41-42页 |
·玉米和水稻的比较基因组分析 | 第42-43页 |
·本研究的目的意义 | 第43-44页 |
·实验技术路线 | 第44-45页 |
2 材料和方法 | 第45-50页 |
·实验材料 | 第45页 |
·植物材料 | 第45页 |
·玉米纹枯病病菌 | 第45页 |
·材料的处理方法 | 第45页 |
·纹枯病菌培养 | 第45页 |
·纹枯病病菌接种 | 第45页 |
·扫描电镜观察侵染病菌的组织病理学变化 | 第45-46页 |
·总RNA的提取、检测和cDNA合成 | 第46页 |
·总RNA的提取、检测 | 第46页 |
·mRNA的分离纯化及cDNA合成 | 第46页 |
·抑制性差减杂交 | 第46-47页 |
·引物和接头序列 | 第46-47页 |
·双链cDNA Rsa Ⅰ酶切 | 第47页 |
·接头连接 | 第47页 |
·二次差减杂交反应 | 第47页 |
·二次抑制PCR | 第47页 |
·二次PCR产物的纯化回收 | 第47-48页 |
·差减文库的构建 | 第48页 |
·文库插入片段的检测 | 第48页 |
·差异表达基因cDNA片段的杂交筛选 | 第48页 |
·序列测定及EST序列功能比对 | 第48-49页 |
·RT-PCR | 第49页 |
·玉米和水稻比较基因组分析 | 第49-50页 |
3 结果与分析 | 第50-76页 |
·玉米纹枯病病菌的培养 | 第50页 |
·纹枯病病菌侵入过程的电镜观察 | 第50-52页 |
·接种后发病植株病斑的观察 | 第52-54页 |
·RNA的提取和检测 | 第54页 |
·mRNA的纯化 | 第54-55页 |
·抑制性差减杂交的结果 | 第55-58页 |
·cDNA双链合成与Rsa Ⅰ酶切 | 第55-56页 |
·接头连接效率检测 | 第56-57页 |
·消减杂交与抑制PCR | 第57-58页 |
·抑制性消减杂交文库的构建 | 第58-59页 |
·T/A克隆与文库构建 | 第58-59页 |
·文库插入片段的检测 | 第59页 |
·文库的反向Northern杂交筛选 | 第59-61页 |
·阳性克隆的测序和生物信息学功能比对分析 | 第61-67页 |
·RT-PCR验证功能基因在不同时间段的表达 | 第67-71页 |
·几个重要候选基因在玉米染色体上的定位研究 | 第71-76页 |
4 讨论 | 第76-98页 |
·玉米纹枯病病菌接种后菌丝和植株感病病斑的变化 | 第76-77页 |
·SSH文库在抗病差异表达基因研究的优势和不足 | 第77-78页 |
·玉米对纹枯病诱导产生的抗性机制 | 第78-89页 |
·玉米纹枯病诱导的信号传导 | 第78-81页 |
·蛋白酶在玉米纹枯病诱导的抗性机制中的作用 | 第81-82页 |
·超敏反应或细胞凋亡在纹枯病诱导的抗性机制中的作用 | 第82-85页 |
·活性氧在纹枯病诱导的抗性机制中的作用 | 第85-89页 |
·玉米纹枯病诱导的寄主基因转录调控 | 第89页 |
·纹枯病诱导引起产量降低的原因 | 第89-95页 |
·玉米纹枯病的抗性机制 | 第95-96页 |
·比较基因组学对重要功能基因的染色体定位和抗性QTL的比较 | 第96-97页 |
·本试验今后的研究方向 | 第97-98页 |
5 结论 | 第98-99页 |
参考文献 | 第99-111页 |
致谢 | 第111-112页 |
附录1:分子生物学试验方法 | 第112-123页 |
附录2:抑制消减杂交在玉米抗病基因研究中的应用—综述 | 第123-131页 |
附录3:研究生在读期间发表的文章 | 第131页 |