| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 1 引言 | 第11-33页 |
| ·菊花基因工程研究进展 | 第11-22页 |
| ·菊花受体系统的研究 | 第12-14页 |
| ·菊花遗传转化体系的建立 | 第14-20页 |
| ·菊花基因工程中存在的问题 | 第20-21页 |
| ·提高转化率 | 第20页 |
| ·提高对转化外源基因表达的调控能力 | 第20-21页 |
| ·展望 | 第21-22页 |
| ·高等植物成花机理研究进展 | 第22-31页 |
| ·花发育概述 | 第22-28页 |
| ·花诱导 | 第22-23页 |
| ·花发育的基因调控 | 第23-26页 |
| ·花器官形成的基因调控 | 第26-28页 |
| ·花发育调控基因的结构特征与作用机制 | 第28页 |
| ·花发育调控基因的结构特征 | 第28页 |
| ·花发育调控基因的作用机制 | 第28页 |
| ·花发育调控基因在国内外的应用研究进展 | 第28-29页 |
| ·展望 | 第29-31页 |
| ·本课题研究的目的意义和主要内容 | 第31-33页 |
| 2 菊花离体再生系统的建立 | 第33-60页 |
| ·材料和方法 | 第33-36页 |
| ·材料 | 第33-34页 |
| ·试验方法 | 第34-36页 |
| ·结果与分析 | 第36-55页 |
| ·不同灭菌时间和不同接种时间对外植体启动培养的影响 | 第36-37页 |
| ·不同培养基对菊花增殖培养的影响 | 第37-39页 |
| ·不同培养基对菊花生长的影响 | 第39-41页 |
| ·不同生长调节剂对不同菊花品种叶片外植体再生的影响 | 第41-49页 |
| ·不同生长调节剂组合对菊花叶片外植体再生的影响 | 第41-44页 |
| ·不同浓度6-BA和NAA对不同菊花品种叶片外植体再生的影响 | 第44-48页 |
| ·影响‘紫妍’叶片外植体褐化和再生率的因素 | 第48-49页 |
| ·Vc、活性炭对‘紫妍’叶片外植体再生的影响 | 第49-50页 |
| ·不同苗龄及叶片着生部位对不定芽再生的影响 | 第50-51页 |
| ·AgNO_3对菊花叶片外植体再生的影响 | 第51-52页 |
| ·不同外植体不定芽再生能力比较 | 第52-54页 |
| ·继代培养对菊花叶片形态发生能力的影响 | 第54-55页 |
| ·结论与讨论 | 第55-60页 |
| 3 植物表达载体pBI-AP1的构建 | 第60-71页 |
| ·材料和方法 | 第60-66页 |
| ·材料 | 第60-61页 |
| ·方法 | 第61-66页 |
| ·结果和分析 | 第66-71页 |
| ·目的片段测序及酶切图分析 | 第66-68页 |
| ·P ZEROBLUNT Ⅱ ToPo、pBI121质粒的酶切及目的片段回收 | 第68页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第68-69页 |
| ·植物表达载体向农杆菌转化和转化子的鉴定 | 第69-71页 |
| 4 菊花遗传转化体系的建立和转基因植株的获得 | 第71-96页 |
| ·材料和方法 | 第71-72页 |
| ·材料 | 第71页 |
| ·根癌农杆菌菌株及载体 | 第71页 |
| ·培养基及添加成分 | 第71页 |
| ·分子生物学试剂及缓冲液试剂的配制 | 第71页 |
| ·主要仪器和设备 | 第71-72页 |
| ·方法 | 第72-76页 |
| ·抗生素Cef、Carb对农杆菌的抑菌试验 | 第72页 |
| ·不同抗生素对菊花叶片外植体再生和试管苗生根的影响 | 第72-73页 |
| ·叶盘法遗传转化及筛选 | 第73-74页 |
| ·影响遗传转化体系因素的筛选和优化 | 第74-75页 |
| ·应用微弹轰击辅助农杆菌转化 | 第75-76页 |
| ·结果与分析 | 第76-91页 |
| ·羧卞青霉素和头孢霉素对农杆菌的抑菌效果 | 第76-77页 |
| ·不同抗生素对菊花叶片外植体再生和试管苗生根的影响 | 第77-83页 |
| ·不同选择抗生素对菊花叶片外植体再生的影响 | 第77-79页 |
| ·不同抗生素对菊花生根的影响 | 第79-80页 |
| ·羧卞青霉素和头孢霉素对叶片再生的影响 | 第80-81页 |
| ·羧卞青霉素和头孢霉素对菊花无菌苗生长的影响 | 第81-83页 |
| ·菊花遗传转化体系的优化 | 第83-88页 |
| ·预培养时间的确定 | 第83-84页 |
| ·农杆菌浓度、侵染时间的确定 | 第84-85页 |
| ·共培养温度和时间的确定 | 第85-86页 |
| ·选择压对转化率的影响 | 第86-88页 |
| ·转基因植株的获得 | 第88-90页 |
| ·微弹轰击辅助农杆菌转化 | 第90-91页 |
| ·讨论与结论 | 第91-96页 |
| 5 转AP1基因植株的检测 | 第96-111页 |
| ·材料和方法 | 第96-101页 |
| ·材料 | 第96页 |
| ·方法 | 第96-101页 |
| ·结果与分析 | 第101-108页 |
| ·转基因植株的GUS检测 | 第101-102页 |
| ·转AP1基因植株的PCR检测 | 第102-103页 |
| ·探针标记效率的检测 | 第103页 |
| ·转基因植株的PCR-Southern检测 | 第103页 |
| ·转基因植株的Southern-blotting杂交分析 | 第103-104页 |
| ·转基因菊花苗叶片再生能力鉴定 | 第104-105页 |
| ·转AP1基因抗性株的性状分析 | 第105-108页 |
| ·转基因菊花的营养生长 | 第105页 |
| ·转基因菊花开花特性 | 第105-108页 |
| ·结论与讨论 | 第108-111页 |
| 6 结论 | 第111-113页 |
| 参考文献 | 第113-127页 |
| 附录 | 第127-132页 |
| 个人简历 | 第132-133页 |
| 导师简介 | 第133-134页 |
| 致谢 | 第134页 |