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射阳盐场地区鲫源嗜水气单胞菌分子流行病学研究

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
引言第11-22页
第一章 射阳地区银鲫细菌性败血症流行病学调查及鲫源致病性嗜水气单胞菌分离鉴定第22-34页
 1 材料第22-23页
   ·实验动物第22页
   ·培养基第22页
   ·主要试剂第22页
   ·主要仪器第22-23页
 2 方法第23-24页
   ·流行病学调查第23页
   ·病原菌的分离第23页
   ·人工感染试验第23页
   ·病原菌株的鉴定第23-24页
   ·致病菌株药敏特性的研究第24页
 3 结果第24-31页
   ·流行病学调查第24-26页
   ·临床症状第26页
   ·病原菌分离第26-27页
   ·人工感染试验第27页
   ·菌株的形态观察第27-29页
   ·菌株生理生化鉴定第29页
   ·16srDNA 片段扩增及序列分析第29-30页
   ·药敏试验第30-31页
 4 讨论第31-33页
 5 小结第33-34页
第二章 鲫源致病性嗜水气单胞菌ERIC-PCR 分型第34-46页
 1 材料第34-35页
   ·菌株来源第34页
   ·主要试剂第34-35页
   ·主要仪器第35页
 2 方法第35-39页
   ·菌株培养第35页
   ·细菌模版DNA 提取第35页
   ·DNA 浓度检测第35页
   ·DNA 模版的稀释第35页
   ·引物设计第35-36页
   ·ERIC-PCR 扩增方法的建立与优化第36-38页
   ·稳定性试验第38页
   ·鲫源嗜水气单胞菌ERIC-PCR 扩增第38页
   ·结果分析第38-39页
 3 结果第39-44页
   ·退火温度的优化第39页
   ·引物添加量的优化第39-40页
   ·dNTP mixture、Taq 酶添加量的优化第40页
   ·延伸时间的优化第40-41页
   ·循环次数的优化第41页
   ·稳定性检验第41-42页
   ·鲫源嗜水气单胞菌ERIC-PCR 指纹图谱第42页
   ·鲫源嗜水气单胞菌ERIC-PCR 聚类分析第42-43页
   ·菌株基因型与致病性的关系第43-44页
 4 讨论第44-45页
 5 小结第45-46页
第三章 鲫源嗜水气单胞菌主要毒力因子分布及其与ERIC-PCR 基因型相关性第46-61页
 1 材料第46-47页
   ·菌株来源第46页
   ·主要试剂第46-47页
   ·主要仪器第47页
 2 方法第47-52页
   ·菌株培养第47页
   ·细菌模版DNA 提取第47页
   ·aer、alt、act、hly、ahp 5 个毒力基因单独扩增第47-49页
   ·aer、alt、act、hly、ahp 5 个毒力基因多重PCR 条件建立及优化第49-52页
   ·敏感性、特异性实验第52页
   ·射阳地区17 株鲫源致病性嗜水气单胞菌5 个毒力基因多重PCR 检测第52页
 3 结果第52-58页
   ·aer、alt、act、hly、ahp 5 个毒力基因单独扩增结果第52-53页
   ·aer、alt、act、hly、ahp 5 个毒力基因多重PCR 条件建立及优化第53-55页
   ·敏感性、特异性实验结果第55-57页
   ·17 株鲫源致病性嗜水气单胞菌5 个毒力基因多重PCR 检测结果第57-58页
   ·菌株ERIC-PCR 基因型与毒力基因的相关性第58页
 4 讨论第58-60页
 5 小结第60-61页
第四章 鲫源嗜水气单胞菌免疫原性及其与ERIC-PCR 基因型的相关性第61-69页
 1 材料第61-62页
   ·菌株来源第61页
   ·实验动物第61-62页
   ·主要试剂第62页
   ·主要仪器第62页
 2 方法第62-63页
   ·免疫原的制备第62-63页
   ·抗血清的制备第63页
   ·凝集实验第63页
 3 结果第63-66页
   ·嗜水气单胞菌灭活条件第63-65页
   ·抗原抗体凝集实验第65页
   ·鲫源嗜水气单胞菌基因型与免疫原性的相关性第65-66页
 4 讨论第66-68页
 5 小结第68-69页
全文小结第69-70页
参考文献第70-78页
附录1 缩略表(Abbreviations)第78-79页
附录2 试剂的配制第79-80页
致谢第80页

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