摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
引言 | 第11-22页 |
第一章 射阳地区银鲫细菌性败血症流行病学调查及鲫源致病性嗜水气单胞菌分离鉴定 | 第22-34页 |
1 材料 | 第22-23页 |
·实验动物 | 第22页 |
·培养基 | 第22页 |
·主要试剂 | 第22页 |
·主要仪器 | 第22-23页 |
2 方法 | 第23-24页 |
·流行病学调查 | 第23页 |
·病原菌的分离 | 第23页 |
·人工感染试验 | 第23页 |
·病原菌株的鉴定 | 第23-24页 |
·致病菌株药敏特性的研究 | 第24页 |
3 结果 | 第24-31页 |
·流行病学调查 | 第24-26页 |
·临床症状 | 第26页 |
·病原菌分离 | 第26-27页 |
·人工感染试验 | 第27页 |
·菌株的形态观察 | 第27-29页 |
·菌株生理生化鉴定 | 第29页 |
·16srDNA 片段扩增及序列分析 | 第29-30页 |
·药敏试验 | 第30-31页 |
4 讨论 | 第31-33页 |
5 小结 | 第33-34页 |
第二章 鲫源致病性嗜水气单胞菌ERIC-PCR 分型 | 第34-46页 |
1 材料 | 第34-35页 |
·菌株来源 | 第34页 |
·主要试剂 | 第34-35页 |
·主要仪器 | 第35页 |
2 方法 | 第35-39页 |
·菌株培养 | 第35页 |
·细菌模版DNA 提取 | 第35页 |
·DNA 浓度检测 | 第35页 |
·DNA 模版的稀释 | 第35页 |
·引物设计 | 第35-36页 |
·ERIC-PCR 扩增方法的建立与优化 | 第36-38页 |
·稳定性试验 | 第38页 |
·鲫源嗜水气单胞菌ERIC-PCR 扩增 | 第38页 |
·结果分析 | 第38-39页 |
3 结果 | 第39-44页 |
·退火温度的优化 | 第39页 |
·引物添加量的优化 | 第39-40页 |
·dNTP mixture、Taq 酶添加量的优化 | 第40页 |
·延伸时间的优化 | 第40-41页 |
·循环次数的优化 | 第41页 |
·稳定性检验 | 第41-42页 |
·鲫源嗜水气单胞菌ERIC-PCR 指纹图谱 | 第42页 |
·鲫源嗜水气单胞菌ERIC-PCR 聚类分析 | 第42-43页 |
·菌株基因型与致病性的关系 | 第43-44页 |
4 讨论 | 第44-45页 |
5 小结 | 第45-46页 |
第三章 鲫源嗜水气单胞菌主要毒力因子分布及其与ERIC-PCR 基因型相关性 | 第46-61页 |
1 材料 | 第46-47页 |
·菌株来源 | 第46页 |
·主要试剂 | 第46-47页 |
·主要仪器 | 第47页 |
2 方法 | 第47-52页 |
·菌株培养 | 第47页 |
·细菌模版DNA 提取 | 第47页 |
·aer、alt、act、hly、ahp 5 个毒力基因单独扩增 | 第47-49页 |
·aer、alt、act、hly、ahp 5 个毒力基因多重PCR 条件建立及优化 | 第49-52页 |
·敏感性、特异性实验 | 第52页 |
·射阳地区17 株鲫源致病性嗜水气单胞菌5 个毒力基因多重PCR 检测 | 第52页 |
3 结果 | 第52-58页 |
·aer、alt、act、hly、ahp 5 个毒力基因单独扩增结果 | 第52-53页 |
·aer、alt、act、hly、ahp 5 个毒力基因多重PCR 条件建立及优化 | 第53-55页 |
·敏感性、特异性实验结果 | 第55-57页 |
·17 株鲫源致病性嗜水气单胞菌5 个毒力基因多重PCR 检测结果 | 第57-58页 |
·菌株ERIC-PCR 基因型与毒力基因的相关性 | 第58页 |
4 讨论 | 第58-60页 |
5 小结 | 第60-61页 |
第四章 鲫源嗜水气单胞菌免疫原性及其与ERIC-PCR 基因型的相关性 | 第61-69页 |
1 材料 | 第61-62页 |
·菌株来源 | 第61页 |
·实验动物 | 第61-62页 |
·主要试剂 | 第62页 |
·主要仪器 | 第62页 |
2 方法 | 第62-63页 |
·免疫原的制备 | 第62-63页 |
·抗血清的制备 | 第63页 |
·凝集实验 | 第63页 |
3 结果 | 第63-66页 |
·嗜水气单胞菌灭活条件 | 第63-65页 |
·抗原抗体凝集实验 | 第65页 |
·鲫源嗜水气单胞菌基因型与免疫原性的相关性 | 第65-66页 |
4 讨论 | 第66-68页 |
5 小结 | 第68-69页 |
全文小结 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-78页 |
附录1 缩略表(Abbreviations) | 第78-79页 |
附录2 试剂的配制 | 第79-80页 |
致谢 | 第80页 |