| 目录 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略词表(Abbreviation) | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-21页 |
| ·TGEV的病原学 | 第11-13页 |
| ·病毒的生物学特征 | 第13页 |
| ·基因组结构 | 第13-14页 |
| ·病毒的蛋白及其功能 | 第14-18页 |
| ·病毒结构蛋白及其功能 | 第14-17页 |
| ·TGEV的非结构蛋白及其功能 | 第17-18页 |
| ·TGEV的诊断方法 | 第18-19页 |
| ·杆状病毒表达系统研究进展 | 第19-21页 |
| ·杆状病毒表达系统简介 | 第19页 |
| ·杆状病毒基因组操作新技术 | 第19-20页 |
| ·TGEV S基因的杆状病毒表达的研究 | 第20-21页 |
| 2 目的意义 | 第21-22页 |
| 3 材料与方法 | 第22-31页 |
| ·材料 | 第22-23页 |
| ·病毒、细胞、质粒、细菌及阳性血清 | 第22页 |
| ·生化试剂及试剂盒 | 第22页 |
| ·培养基与抗生素 | 第22-23页 |
| ·引物设计与合成 | 第23页 |
| ·方法 | 第23-31页 |
| ·主要溶液的配制 | 第23-25页 |
| ·TGEV病毒在PK-15细胞上的增殖 | 第25页 |
| ·RT-PCR扩增与检测 | 第25-26页 |
| ·DNA片段的克隆 | 第26-27页 |
| ·目的基因的原核表达 | 第27-28页 |
| ·ELISA方法的初步建立 | 第28页 |
| ·重组杆状病毒DNA(Bacmid，杆粒)的构建 | 第28-29页 |
| ·目的基因的杆状病毒表达 | 第29-31页 |
| 4 结果与分析 | 第31-37页 |
| ·RT-PCR扩增及PCR产物的克隆 | 第31页 |
| ·序列分析 | 第31-32页 |
| ·重组原核表达载体的构建 | 第32页 |
| ·pGEX-S_1及pGEX-S_(1-2)在E.coli中表达及Western-blot分析 | 第32-33页 |
| ·ELISA最佳条件的确定 | 第33-35页 |
| ·重组杆状病毒穿梭表达载体的构建 | 第35-36页 |
| ·目的基因的杆状病毒表达 | 第36-37页 |
| 5 讨论 | 第37-42页 |
| ·TGEV病毒基因组RNA提取 | 第37页 |
| ·目的基因的选择 | 第37页 |
| ·目的基因的原核表达 | 第37-39页 |
| ·大肠杆菌原核表达系统 | 第37-38页 |
| ·原核表达载体的选择 | 第38页 |
| ·目的基因的表达 | 第38-39页 |
| ·目的基因的杆状病毒表达 | 第39-42页 |
| 6 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献: | 第43-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 附录: 杆状病毒表达系统示意图 | 第52页 |