| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 1 前言 | 第8-19页 |
| 1．1 文献综述 | 第8-18页 |
| 1．1．1 严重急性呼吸系统综合症的流行病学及其危害 | 第8-10页 |
| 1．1．2 SARS-CoV的形态和结构 | 第10页 |
| 1．1．3 SARS-CoV的基因组结构 | 第10-11页 |
| 1．1．4 SARS-CoV的增殖周期 | 第11-12页 |
| 1．1．5 SARS-CoV编码的主要蛋白 | 第12-15页 |
| 1．1．6 SARS-CoV的受体 | 第15-18页 |
| 1．2 目的和意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-31页 |
| 2．1 材料 | 第19-22页 |
| 2．1．1 实验动物及细胞 | 第19页 |
| 2．1．2 质粒及菌株 | 第19-20页 |
| 2．1．3 培养基 | 第20-21页 |
| 2．1．4 工具酶及试剂盒 | 第21页 |
| 2．1．5 其它相关试剂 | 第21页 |
| 2．1．6 主要溶液 | 第21-22页 |
| 2．2 方法 | 第22-31页 |
| 2．2．1 样品总 RNA的提取 | 第22-23页 |
| 2．2．2 样品总 RNA的纯化 | 第23页 |
| 2．2．3 家猫 ACE2基因mRNA编码区序列的扩增 | 第23-25页 |
| 2．2．4 PCR产物的克隆 | 第25-26页 |
| 2．2．5 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第26页 |
| 2．2．6 连接产物的转化 | 第26页 |
| 2．2．7 质粒的少量制备(碱裂解法) | 第26页 |
| 2．2．8 DNA胶快速回收试剂盒的使用 | 第26-27页 |
| 2．2．9 DNA重组技术(DNA酶切、连接) | 第27页 |
| 2．2．10 序列测定 | 第27页 |
| 2．2．11 生物信息学分析 | 第27页 |
| 2．2．12 家猫 ACE2组织分布 RT-PCR | 第27-29页 |
| 2．2．13 家猫 ACE2基因用于原核表达片段的 PCR扩增 | 第29页 |
| 2．2．14 大肠杆菌 BL21(DE3) plysS的表达诱导与样本处理 | 第29页 |
| 2．2．15 SDS-PAGE电泳 | 第29-30页 |
| 2．2．16 Western blot | 第30-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-43页 |
| 3．1 家猫 ACE2基因mRNA编码区序列的测定及序列比较 | 第31-36页 |
| 3．2 家猫 ACE2蛋白的生物信息学分析 | 第36-40页 |
| 3．2．1 家猫 ACE2基因编码蛋白结构及理化性质分析 | 第36-38页 |
| 3．2．2 家猫 ACE2基因编码蛋白的功能预测 | 第38-40页 |
| 3．3 家猫 ACE2表达组织分布 | 第40页 |
| 3．4 家猫 ACE2基因原核表达质粒的构建与鉴定 | 第40页 |
| 3．5 家猫 ACE2基因在 BL21(DE3) plysS中的表达 | 第40-42页 |
| 3．6 家猫 ACE2基因原核表达产物活性检测 | 第42-43页 |
| 4 讨论 | 第43-45页 |
| 参考文献 | 第45-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 附录 | 第55页 |
