摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-14页 |
符号与缩略语 | 第14-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-38页 |
1 酶的体外定向进化研究进展 | 第15-29页 |
1.1 酶的体外定向进化的概念及理论依据 | 第15-16页 |
1.2 酶体外定向进化的常用策略 | 第16-25页 |
1.3 定向进化在改造酶分子中的应用 | 第25-29页 |
2 α-淀粉酶研究进展 | 第29-38页 |
2.1 α-淀粉酶简介 | 第29-30页 |
2.2 α-淀粉酶的结构特征与催化机制 | 第30-33页 |
2.3 α-淀粉酶体外定向进化研究进展 | 第33-36页 |
2.4 国内α-淀粉酶研究状况及本研究的工作思路 | 第36-38页 |
第二章 野油菜黄单胞菌α-淀粉酶的性质及基因克隆 | 第38-50页 |
1 材料与方法 | 第38-41页 |
2 结果与分析 | 第41-49页 |
2.1 野油菜黄单胞菌α-淀粉酶的性质 | 第41-44页 |
2.2 野油菜黄单胞菌α-淀粉酶基因的克隆 | 第44-49页 |
3 讨论 | 第49-50页 |
第三章 野油菜黄单胞菌α-淀粉酶基因的体外诱变 | 第50-58页 |
1 材料与方法 | 第50-52页 |
2 结果与分析 | 第52-56页 |
2.1 5-溴脱氧尿苷三磷酸5-BrdUTP的体外诱变效应 | 第52-53页 |
2.2 突变基因的筛选 | 第53-55页 |
2.3 突变基因的核苷酸序列及氨基酸序列分析 | 第55-56页 |
3 讨论 | 第56-58页 |
第四章 α-淀粉酶基因的DNA改组 | 第58-71页 |
1 材料与方法 | 第58-59页 |
2 结果与分析 | 第59-69页 |
2.1 野油菜黄单胞菌α-淀粉酶基因的DNA改组 | 第60-63页 |
2.2 枯草芽孢杆菌α-淀粉酶基因的克隆 | 第63-68页 |
2.3 野油菜黄单胞菌和枯草杆菌的α-淀粉酶基因家族DNA改组 | 第68-69页 |
3 讨论 | 第69-71页 |
第五章 野油菜黄单胞菌α-淀粉酶的结构与功能的关系 | 第71-80页 |
1 材料与方法 | 第72页 |
2 结果与分析 | 第72-77页 |
2.1 野油菜黄单胞菌α-淀粉酶的三维结构及催化氨基酸 | 第72-75页 |
2.2 α-淀粉酶高酶活突变体的分析 | 第75-77页 |
3 讨论 | 第77-80页 |
第六章 突变酶与野生酶基因的高效表达及酶性质研究 | 第80-92页 |
1 材料与方法 | 第80-82页 |
2 结果与分析 | 第82-88页 |
2.1 α-淀粉酶基因在pET30a(+)上的表达 | 第82-84页 |
2.2 新淀粉酶蛋白质的分析 | 第84-85页 |
2.3 新淀粉酶蛋白质的证实 | 第85-87页 |
2.4 新淀粉酶与野生基因淀粉酶的底物专一性及动力学参数比较 | 第87页 |
2.5 突变酶与野生酶性质的比较 | 第87-88页 |
3 讨论 | 第88-92页 |
第七章 主要结论及对后续研究工作的设想 | 第92-97页 |
1 主要结论 | 第92-95页 |
2 对后续研究工作的设想 | 第95-97页 |
参考文献 | 第97-110页 |
博士研究生在校期间发表论文 | 第110-111页 |
致谢 | 第111页 |