| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 英文缩略表 | 第11-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-20页 |
| ·牛支原体（Mycoplasma bovis）概述 | 第12-18页 |
| ·牛支原体（Mycoplasma bovis）简介 | 第12-14页 |
| ·M.bovis 的鉴定 | 第14-15页 |
| ·不同 M.bovis 菌株的区分 | 第15-16页 |
| ·M.bovis 血清学 | 第16页 |
| ·M.bovis 分子生物学检测方法 | 第16-17页 |
| ·M.bovis 膜表面相关蛋白的研究进展 | 第17-18页 |
| ·α-烯醇化酶（α-enolase）与病原致病能力相关性的研究进展 | 第18-19页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二章 α-enolase 的序列分析及原核表达 | 第20-35页 |
| ·材料 | 第20-22页 |
| ·菌株、质粒 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·主要设备仪器 | 第20页 |
| ·主要溶液及配置 | 第20-22页 |
| ·方法 | 第22-26页 |
| ·M.bovis α-enolase 基因的定位、分析 | 第22页 |
| ·M.bovis 菌株扩增与基因组的提取 | 第22页 |
| ·α-enolase 基因的克隆 | 第22-24页 |
| ·pET-32a-α-enolase 重组质粒的构建与鉴定 | 第24页 |
| ·重组质粒 pET-32a-α-enolase 转化及诱导表达 | 第24-25页 |
| ·rMbEno 诱导条件的优化 | 第25页 |
| ·rMbEno 可溶性判断 | 第25页 |
| ·rMbEno 的纯化 | 第25-26页 |
| ·rMbEno 的 Western Blotting 验证 | 第26页 |
| ·结果 | 第26-33页 |
| ·α-enolase 基因的生物信息学分析 | 第26-27页 |
| ·α-enolase 基因 PCR 扩增结果 | 第27-28页 |
| ·pET-32a-α-enolase 重组质粒的鉴定 | 第28-29页 |
| ·重组质粒 pET-32a-α-enolase 的双酶切鉴定结果 | 第29-30页 |
| ·重组蛋白的诱导 | 第30页 |
| ·重组蛋白诱导条件的优化 | 第30-31页 |
| ·rMbEno 的纯化结果 | 第31-32页 |
| ·Western Blotting 检测 | 第32-33页 |
| ·小结 | 第33页 |
| ·讨论 | 第33-35页 |
| 第三章 MbEno 膜定位以及纤溶酶原结合活性测定 | 第35-46页 |
| ·材料 | 第35页 |
| ·主要试剂 | 第35页 |
| ·菌株和血清 | 第35页 |
| ·实验设备 | 第35页 |
| ·方法 | 第35-38页 |
| ·兔抗 rMbEno 抗体的制备 | 第35-36页 |
| ·采用辛酸-硫酸铵沉淀法纯化抗体 | 第36页 |
| ·M.bovis 膜蛋白的提取 | 第36-37页 |
| ·MbEno 膜定位实验 | 第37页 |
| ·不同蛋白组分以及 rMbEno 的纤溶酶原结合活性测定 | 第37-38页 |
| ·结果 | 第38-44页 |
| ·制备抗体抗体水平的测定与纯化抗体抗体浓度的测定 | 第38-39页 |
| ·MbEno 的定位 | 第39-41页 |
| ·纤溶酶原结合实验 | 第41-44页 |
| ·小结 | 第44页 |
| ·讨论 | 第44-46页 |
| 第四章 M.bovis 粘附相关性研究 | 第46-54页 |
| ·材料 | 第46页 |
| ·菌株与细胞 | 第46页 |
| ·试剂 | 第46页 |
| ·方法 | 第46-49页 |
| ·激光共聚焦观察M.bovis粘附EBL细胞 | 第46-47页 |
| ·激光共聚焦观察不同因素影响M.bovis粘附EBL细胞 | 第47页 |
| ·M.bovis粘附EBL细胞的细菌计数实验 | 第47页 |
| ·细菌计数实验计算不同因素对M.bovis粘附率的影响 | 第47-49页 |
| ·结果 | 第49-53页 |
| ·激光共聚焦观察M.bovis粘附EBL细胞 | 第49-50页 |
| ·激光共聚焦观察不同因素影响M.bovis粘附EBL细胞 | 第50-51页 |
| ·M.bovis粘附EBL细胞的细菌计数实验 | 第51页 |
| ·不同因素对M.bovis粘附率的影响 | 第51-53页 |
| ·讨论 | 第53-54页 |
| 第五章 全文结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 作者简介 | 第62页 |
