1 前言 | 第1-22页 |
1.1 海湾扇贝养殖现状 | 第10-12页 |
1.2 金属硫蛋白的结构、功能与分类 | 第12-18页 |
1.3 金属硫蛋白的应用 | 第18-19页 |
1.4 双壳类金属硫蛋白研究进展 | 第19-20页 |
1.5 本研究的目的及意义 | 第20-22页 |
2 海湾扇贝金属硫蛋白cDNA序列克隆与分析 | 第22-34页 |
2.1 引言 | 第22页 |
2.2 材料与方法 | 第22-26页 |
2.2.1 海湾扇贝cDNA文库的构建 | 第22页 |
2.2.2 引物设计及PCR扩增 | 第22-24页 |
2.2.3 PCR扩增产物的分子克隆 | 第24-26页 |
2.2.4 序列测定与拼接 | 第26页 |
2.2.5 海湾扇贝金属硫蛋白序列的同源性分析及分子进化分析 | 第26页 |
2.3 结果 | 第26-32页 |
2.3.1 海湾扇贝金属硫蛋白cDNA全长序列的特征分析 | 第26-28页 |
2.3.2 海湾扇贝金属硫蛋白氨基酸序列分析 | 第28-32页 |
2.4 讨论 | 第32-34页 |
3 重金属镉和鳗弧菌诱导下海湾扇贝金属硫蛋白基因的表达 | 第34-52页 |
3.1 引言 | 第34-38页 |
3.1.1 背景 | 第34-35页 |
3.1.2 mRNA表达的半定量和定量检测技术 | 第35-38页 |
3.1.2.1 半定量RT-PCR法 | 第35-36页 |
3.1.2.2 实时定量PCR法 | 第36-38页 |
3.2 材料与方法 | 第38-43页 |
3.2.1 扇贝的暂养和应激诱导 | 第38页 |
3.2.2 扇贝总RNA的提取 | 第38-39页 |
3.2.3 扇贝cDNA模板第一链的合成 | 第39-40页 |
3.2.4 金属硫蛋白基因的表达分析 | 第40-43页 |
3.2.4.1 半定量RT-PCR法检测重金属镉诱导的表达 | 第40-42页 |
3.2.4.2 实时定量RT-PCR法检测鳗弧菌诱导的表达 | 第42-43页 |
3.3 结果 | 第43-48页 |
3.3.1 重金属镉刺激下AIMT基因表达的半定量分析结果 | 第43-45页 |
3.3.2 鳗弧菌刺激下AIMT基因表达的定量分析结果 | 第45-48页 |
3.4 讨论 | 第48-52页 |
参考文献 | 第52-59页 |
己完成的文章 | 第59-60页 |
致谢 | 第60页 |