| 摘要 | 第1-13页 |
| Abstract | 第13-15页 |
| 第一章 灵芝三萜研究进展和体外抑瘤活性筛选简介 | 第15-52页 |
| ·灵芝三萜的化学结构 | 第15-21页 |
| ·灵芝三萜的生理活性 | 第21-29页 |
| ·抗肿瘤作用及机制 | 第21-23页 |
| ·免疫抑制活性 | 第23页 |
| ·抑制补体激活 | 第23-24页 |
| ·诱导NAD(P)H:QR(苯醌氧化还原酶) | 第24页 |
| ·对血小板凝集的影响 | 第24-25页 |
| ·保肝作用 | 第25页 |
| ·抑制胆固醇的合成 | 第25页 |
| ·抗氧化 | 第25-26页 |
| ·抗病毒 | 第26-27页 |
| ·抑菌作用 | 第27页 |
| ·抗炎作用 | 第27页 |
| ·抑制血管紧张素转化酶(ACE) | 第27-28页 |
| ·抑制组织胺释放 | 第28页 |
| ·镇痛 | 第28页 |
| ·酶抑制活性 | 第28-29页 |
| ·抑制真核细胞DNA 多聚酶活性 | 第28页 |
| ·对金合欢酯转移酶(FPT)的抑制作用 | 第28-29页 |
| ·抑制磷脂酶A2(PLA2) | 第29页 |
| ·生产工艺 | 第29-36页 |
| ·影响灵芝三萜形成的因素 | 第29-32页 |
| ·液体发酵 | 第32-33页 |
| ·提取分离 | 第33-34页 |
| ·提取 | 第33-34页 |
| ·分离纯化 | 第34页 |
| ·定性定量分析 | 第34-36页 |
| ·TLC | 第34-35页 |
| ·HPLC | 第35-36页 |
| ·比色法测总三萜含量 | 第36页 |
| ·展望 | 第36-37页 |
| ·MTT 法在抗肿瘤药物体外筛选方法中的应用 | 第37页 |
| ·细胞凋亡与抗肿瘤药物 | 第37-39页 |
| ·细胞凋亡的定义 | 第37-39页 |
| ·细胞凋亡与抗癌药物 | 第39页 |
| ·细胞凋亡的检测方法 | 第39-42页 |
| ·细胞周期与抗肿瘤药物 | 第42-44页 |
| ·细胞周期与肿瘤 | 第43页 |
| ·细胞周期与细胞凋亡 | 第43页 |
| ·细胞周期与抗癌药物 | 第43页 |
| ·细胞周期分布的检测方法 | 第43-44页 |
| ·本课题的研究背景,目的和意义 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-52页 |
| 第二章 灵芝总三萜含量测定的方法学研究 | 第52-63页 |
| ·材料和仪器 | 第52-53页 |
| ·材料 | 第52页 |
| ·仪器 | 第52页 |
| ·主要试剂 | 第52-53页 |
| ·方法 | 第53-55页 |
| ·灵芝酸的提取 | 第53页 |
| ·可行性试验 | 第53页 |
| ·试验条件的优化 | 第53-54页 |
| ·香草醛用量的选择 | 第53页 |
| ·高氯酸用量的选择 | 第53-54页 |
| ·反应温度的选择 | 第54页 |
| ·反应时间的选择 | 第54页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第54页 |
| ·灵芝样品的测定 | 第54页 |
| ·稳定性试验 | 第54页 |
| ·重现性试验 | 第54-55页 |
| ·加样回收率测定 | 第55页 |
| ·结果 | 第55-60页 |
| ·可行性试验结果 | 第55页 |
| ·最佳显色条件的确定 | 第55-58页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第58页 |
| ·灵芝样品的测定 | 第58页 |
| ·稳定性测试 | 第58-60页 |
| ·重现性测试 | 第60页 |
| ·加样回收率测定 | 第60页 |
| ·讨论 | 第60-61页 |
| ·小结 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-63页 |
| 第三章 提取分离工艺对灵芝三萜体外抑瘤活性影响的研究 | 第63-79页 |
| ·材料和仪器 | 第63-64页 |
| ·材料 | 第63页 |
| ·仪器 | 第63-64页 |
| ·主要试剂 | 第64页 |
| ·方法 | 第64-67页 |
| ·灵芝三萜类物质的提取分离 | 第64页 |
| ·灵芝三萜类提取物的定性检测 | 第64-66页 |
| ·柴可夫斯基反应(Salkowski) | 第64页 |
| ·醋酐-浓硫酸反应(Lieberman) | 第64-65页 |
| ·紫外检测 | 第65页 |
| ·薄层色谱(TLC)检测 | 第65-66页 |
| ·抑瘤活性的测定 | 第66-67页 |
| ·样品预备 | 第66页 |
| ·细胞培养 | 第66页 |
| ·接种细胞 | 第66页 |
| ·药物处理 | 第66页 |
| ·生长抑制率的测定 | 第66-67页 |
| ·半数生长抑制率(IC50)的计算 | 第67页 |
| ·细胞形态学观察 | 第67页 |
| ·早期凋亡细胞的定量检测 | 第67页 |
| ·结果 | 第67-74页 |
| ·灵芝三萜类提取物的定性检测 | 第67-69页 |
| ·灵芝提取物不同组分对HL-60 生长的影响 | 第69-70页 |
| ·灵芝提取物不同组分对MCF-7 生长的影响 | 第70页 |
| ·灵芝提取物不同组分诱导HL-60 和MCF-7 肿瘤细胞死亡方式的研究 | 第70-71页 |
| ·Annexin V 定量检测结果 | 第71-74页 |
| ·讨论 | 第74-76页 |
| ·小结 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-79页 |
| 第四章 高抑瘤活性菌株的筛选 | 第79-109页 |
| ·材料与仪器 | 第79-80页 |
| ·材料 | 第79页 |
| ·仪器 | 第79-80页 |
| ·主要试剂 | 第80页 |
| ·方法 | 第80-82页 |
| ·液体发酵 | 第80页 |
| ·灵芝粗三萜提取 | 第80页 |
| ·不同灵芝菌株液体发酵菌丝体总三萜含量的比较 | 第80页 |
| ·不同灵芝菌株液体发酵菌丝体三萜提取物体外抑瘤率的比较 | 第80-81页 |
| ·细胞培养 | 第80页 |
| ·半数生长抑制率(IC50)的测定 | 第80-81页 |
| ·不同灵芝菌株液体发酵菌丝体三萜提取物体外抑瘤率的比较 | 第81页 |
| ·细胞形态学观察 | 第81页 |
| ·细胞形态的观察 | 第81页 |
| ·细胞核形态的观察 | 第81页 |
| ·细胞早期凋亡检测 | 第81页 |
| ·细胞周期的检测 | 第81-82页 |
| ·结果 | 第82-104页 |
| ·灵芝菌株对液体发酵菌丝体生物量的影响 | 第82页 |
| ·不同灵芝菌株液体发酵菌丝体三萜提取物得率比较 | 第82-85页 |
| ·不同灵芝菌株液体发酵菌丝体三萜提取物的总三萜含量比较 | 第85-90页 |
| ·灵芝液体发酵菌丝体三萜提取物对HL-60 生长抑制的量效关系 | 第90-91页 |
| ·不同灵芝菌株液体发酵菌丝体三萜提取物对 HL-60 抑制作用的比较 | 第91页 |
| ·细胞周期的检测 | 第91-96页 |
| ·诱导细胞死亡方式的研究 | 第96-98页 |
| ·细胞凋亡的检测 | 第98-100页 |
| ·灵芝液体发酵菌丝体三萜提取物对 MCF-7 生长抑制的量效关系 | 第100-101页 |
| ·不同灵芝菌株液体发酵菌丝体三萜提取物对 MCF-7 抑制作用的比较 | 第101-104页 |
| ·讨论 | 第104-106页 |
| ·小结 | 第106-107页 |
| 参考文献 | 第107-109页 |
