| 第一章 生物技术概况 | 第1-16页 |
| 1．1 生物技术及其发展现状 | 第8-9页 |
| 1．2 现代生物技术--基因工程发展概况 | 第9页 |
| 1．3 生物技术制药及其发展现状 | 第9-14页 |
| 1．3．1 生物药物的分类 | 第10-12页 |
| 1．3．2 生物技术制药现状 | 第12-14页 |
| 1．3．2．1 欧洲国家生物技术制药发展现状 | 第12-13页 |
| 1．3．2．2 美国生物制药现状 | 第13页 |
| 1．3．2．3 中国生物制药现状 | 第13-14页 |
| 1．4 生物制药展望 | 第14-16页 |
| 第二章 骨质疏松症与甲状旁腺激素 | 第16-24页 |
| 2．1 骨质疏松症现状 | 第16-18页 |
| 2．1．1 骨质疏松症及其分类 | 第16-17页 |
| 2．1．2 骨质疏松症的危害 | 第17页 |
| 2．1．3 骨质疏松症治疗药物 | 第17-18页 |
| 2．2 甲状旁腺激素 | 第18-24页 |
| 2．2．1 PTH基因及其结构 | 第19-20页 |
| 2．2．2 PTH基因的表达与调控 | 第20页 |
| 2．2．3 PTH受体及相关肽 | 第20-21页 |
| 2．2．4 PTH的生理功能 | 第21-22页 |
| 2．2．5 PTH生理功能的研究进展 | 第22页 |
| 2．2．6 PTH的临床应用展望 | 第22-24页 |
| 第三章 本论文研究的主要内容及其意义 | 第24-26页 |
| 3．1 本论文研究的意义 | 第24-25页 |
| 3．2 本论文研究的主要内容 | 第25-26页 |
| 第四章 实验材料和方法 | 第26-41页 |
| 4．1 实验原理 | 第26-27页 |
| 4．1．1 原核表达 | 第26页 |
| 4．1．2 表达载体的选择 | 第26-27页 |
| 4．2 材料 | 第27-30页 |
| 4．3 方法 | 第30-41页 |
| 4．3．1 基因克隆 | 第31-33页 |
| 4．3．2 双酶切 | 第33页 |
| 4．3．3 连接 | 第33-34页 |
| 4．3．4 大肠杆菌DH5α，BL21(DE3)感受态细胞的制备与转化 | 第34页 |
| 4．3．5 挑选阳性克隆 | 第34-36页 |
| 4．3．6 pThioHisA-PTH在大肠杆菌中的表达 | 第36-38页 |
| 4．3．7 目的蛋白(rhPTH)体外活性的检测 | 第38-41页 |
| 第五章 结果 | 第41-49页 |
| 5．1 目的基因PTH(1-34)的克隆 | 第41-42页 |
| 5．2 pThioHisA-rhPTH表达载体的构建及在大肠杆菌中的表达 | 第42-43页 |
| 5．2．1 表达载体的构建 | 第42-43页 |
| 5．2．2 表达菌液破碎检测 | 第43页 |
| 5．3 表达产物的Western-blot分析结果 | 第43-45页 |
| 5．4 优化表达条件 | 第45-47页 |
| 5．4．1 筛选表达菌株 | 第45页 |
| 5．4．2 筛选诱导时间 | 第45-46页 |
| 5．4．3 IPTG终浓度筛选 | 第46-47页 |
| 5．5 重组目的蛋白生物活性的体外检测 | 第47-49页 |
| 第六章 讨论 | 第49-52页 |
| 6．1 原核表达的经验 | 第49页 |
| 6．2 大肠杆菌中表达异源基因的现状 | 第49-50页 |
| 6．3 PTH合成途径及其特点 | 第50页 |
| 6．4 本实验结论 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 附录A 溶液的配制方法 | 第59-62页 |
| 附录B (攻读硕士学位期间发表论文目录) | 第62页 |
