| 摘要 | 第1-8页 |
| 引言 | 第8-16页 |
| 1 植物病原菌抗药性的概念 | 第9-10页 |
| 2 对苯并咪唑类杀菌剂的抗性发生 | 第10页 |
| 3 苯并咪唑类杀菌剂的作用机制 | 第10-11页 |
| 4 植物病原菌对苯并咪唑类杀菌剂抗药性的形成机制 | 第11-12页 |
| 5 抗药性的监测及治理 | 第12页 |
| 6 抗药性的利用 | 第12-13页 |
| 7 芒果炭疽病菌的发生、防治及其抗药性发生现状 | 第13-14页 |
| 8 本研究的目的和意义 | 第14-15页 |
| 9 本研究的技术路线 | 第15-16页 |
| 一、 材料和方法 | 第16-27页 |
| 1 实验材料 | 第16-17页 |
| ·植物材料 | 第16页 |
| ·供试药剂 | 第16页 |
| ·供试菌株 | 第16页 |
| ·用于测序的菌株 | 第16页 |
| ·质粒、转化受体菌种及试剂 | 第16-17页 |
| ·仪器 | 第17页 |
| ·PDA和PD培养基 | 第17页 |
| 2 实验方法 | 第17-27页 |
| ·病菌的抗药性研究 | 第17-19页 |
| ·含药PDA培养基制备 | 第17页 |
| ·病菌在PDA培养基上对多菌灵敏感性的测定 | 第17页 |
| ·对多菌灵敏感基线及抗药性水平测定 | 第17-18页 |
| ·生物学特性测定 | 第18页 |
| ·不同分离系致病力测定 | 第18页 |
| ·抗性菌株的稳定性测定 | 第18页 |
| ·杀菌剂的交互抗药性的测定 | 第18页 |
| ·病菌在离体芒果果实上对多菌灵的敏感性测定 | 第18-19页 |
| ·β-微管蛋白基因的克隆 | 第19-27页 |
| ·DNA的提取 | 第19页 |
| ·引物的设计 | 第19-20页 |
| ·β-微管蛋白基因的PCR扩增 | 第20页 |
| ·扩增产物的凝胶电泳观察 | 第20页 |
| ·目的片段的回收 | 第20-21页 |
| ·目的片段的克隆及转化 | 第21-22页 |
| ·连接反应 | 第21页 |
| ·E.coli JM109感受态细胞的制备 | 第21-22页 |
| ·转化 | 第22页 |
| ·质粒DNA的微量提取 | 第22-23页 |
| ·阳性重组质粒的稍大量提取 | 第23-24页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第24页 |
| ·重组质粒的PCR法鉴定 | 第24-25页 |
| ·重组子阳性克隆菌的保存 | 第25页 |
| ·β-微管蛋白基因全序列的测定 | 第25页 |
| ·抗、感菌株β-微管蛋白基因全序列的比较 | 第25-27页 |
| 二、 结果与分析 | 第27-38页 |
| 1 抗药性研究结果与分析 | 第27-37页 |
| ·病菌在培养基上对多菌灵的敏感性测定结果 | 第27页 |
| ·抗性测定 | 第27页 |
| ·抗性菌株与敏感菌株的生物学特性和致病力比较 | 第27-28页 |
| ·抗性菌株的遗传稳定性测定结果 | 第28页 |
| ·交互抗药性测定 | 第28页 |
| ·病菌在离体芒果果实上对多菌灵的敏感性测定结果 | 第28-37页 |
| 2 C.g.mβ-微管蛋白基因的克隆 | 第37-38页 |
| ·C.g.mβ-微管蛋白基因的PCR扩增结果 | 第37页 |
| ·C.g.mβ-微管蛋白基因的克隆和鉴定 | 第37页 |
| ·C.g.mβ-微管蛋白基因全序列测定结果 | 第37页 |
| ·C.g.m的抗、感菌株β-微管蛋白基因氨基酸序列的比较 | 第37-38页 |
| 三、 讨论 | 第38-40页 |
| 1 我国热带地区芒果炭疽病菌抗药性形成概况 | 第38页 |
| 2 抗药性菌株的生测及监测初步 | 第38页 |
| 3 抗药性治理有关问题 | 第38-39页 |
| 4 C.g.mβ-微管蛋白与抗药性的关系 | 第39页 |
| 5 C.g.mβ-微管蛋白基因的突变与抗药性形成的关系 | 第39-40页 |
| 6 后续研究 | 第40页 |
| 四、 结论 | 第40-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 致谢 | 第50页 |