致谢 | 第1-6页 |
中文摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-11页 |
1 引言 | 第11-17页 |
·脂肪干细胞 | 第11-12页 |
·ASCs的分离培养与鉴定 | 第12-14页 |
·ASCs的分离培养 | 第12-13页 |
·ASCs的鉴定 | 第13-14页 |
·ASCs的生物学特性 | 第14-17页 |
·ASCs的自我更新能力 | 第14页 |
·ASCs的分化能力 | 第14-15页 |
·一种具有生物活性的小分子reversine | 第15-17页 |
2 实验材料 | 第17-21页 |
·细胞供体 | 第17页 |
·细胞培养所用主要培养基 | 第17页 |
·主要试剂和试剂盒 | 第17-18页 |
·主要实验仪器及耗材 | 第18-19页 |
·主要溶液的配制 | 第19-21页 |
·细胞培养所用培养基及主要溶液配制 | 第19-20页 |
·核酸电泳缓冲液的配制 | 第20-21页 |
3 实验方法 | 第21-31页 |
·ASC的原代分离 | 第21页 |
·ASC的传代 | 第21-22页 |
·ASC的冻存 | 第22页 |
·ASC的复苏 | 第22页 |
·RT-PCR检测特定基因的表达 | 第22-25页 |
·从细胞中提取总RNA | 第22-23页 |
·RNA的反转录 | 第23页 |
·PCR反应 | 第23-25页 |
·PCR产物的鉴定(1%琼脂糖凝胶电泳) | 第25页 |
·免疫组化 | 第25-26页 |
·MTT法测定ASCs生长曲线 | 第26页 |
·ASCs的多向分化潜能 | 第26-31页 |
·诱导ASCs向脂肪细胞分化及鉴定 | 第26-27页 |
·诱导ASCs向成骨细胞分化及鉴定 | 第27-28页 |
·诱导ASCs向精子细胞分化及鉴定 | 第28-30页 |
·睾丸组织的分离培养 | 第28-29页 |
·ASCs与睾丸组织共培养 | 第29页 |
·睾丸组织条件培养液及RA共同作用诱导ASCs向精子细胞分化 | 第29-30页 |
·Reversine对ASCs生物学特性的影响 | 第30-31页 |
·MTT法测定reversine对ASCs细胞活性的影响 | 第30页 |
·RT-PCR检测不同浓度reversine对ASCs干性基因的影响. | 第30页 |
·Reversine作用对ASCs分化潜能的影响 | 第30-31页 |
4 结果 | 第31-51页 |
·ASC的分离、培养及鉴定 | 第31-41页 |
·ASC的形态 | 第31-33页 |
·ASCs的免疫组化鉴定 | 第33-40页 |
·RT-PCR检测ASCs特异基因的表达 | 第40页 |
·ASCs的生长曲线和倍增时间 | 第40-41页 |
·ASCs的多向分化潜能 | 第41-46页 |
·将ASCs诱导为脂肪细胞 | 第41-43页 |
·将ASCs诱导为成骨细胞 | 第43-45页 |
·诱导ASCs向精子细胞分化 | 第45-46页 |
·Reversine对ASCs生物学特性的影响 | 第46-51页 |
·reversine对ASCs活性的影响 | 第46-48页 |
·RT-PCR检测不同浓度reversine对ASCs干性基因的影响 | 第48-49页 |
·Reversine对ASCs分化潜能的影响 | 第49-51页 |
5 讨论 | 第51-54页 |
6 结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-59页 |
作者简历 | 第59-61页 |
学位论文数据集 | 第61页 |