摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
第1章 绪论 | 第11-18页 |
·Na~+/H~+逆向转运蛋白 | 第11-13页 |
·Hsp18.2 与 rd29A 启动子 | 第13-14页 |
·Cre/loxP 特异位点重组系统 | 第14-17页 |
·Cre/loxP 特异位点重组系统在基因切除上的应用 | 第14-15页 |
·Cre/loxP 特异位点重组系统在基因定点整合上的应用 | 第15-17页 |
·本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
第2章 AtNHX1、TvNHX1 植物表达载体的构建与鉴定 | 第18-29页 |
·试验和材料 | 第18-19页 |
·质粒和菌种 | 第18页 |
·酶和主要试剂 | 第18页 |
·培养基 | 第18页 |
·质粒提取试剂 | 第18页 |
·引物 | 第18-19页 |
·主要仪器设备 | 第19页 |
·试验方法 | 第19-21页 |
·质粒 DNA 的提取 | 第19页 |
·目的片段及载体的酶切、胶回收与连接 | 第19-20页 |
·连接产物的转化、筛选和鉴定 | 第20-21页 |
·农杆菌感受态细胞制备 | 第21页 |
·电击法转化农杆菌感受态细胞 | 第21页 |
·结果与分析 | 第21-26页 |
·中间载体 pBnUAS-TvNHX1-T_n 的构建与鉴定 | 第21-23页 |
·植物表达载体 pGII227-UASTvNHX1T_n-rd29ACREN 构建与鉴定 | 第23-24页 |
·植物表达载体 pGII227-UASAtNHX1T_n-rd29ACREN 构建与鉴定 | 第24-25页 |
·植物表达载体转化农杆菌及鉴定 | 第25-26页 |
·讨论 | 第26-28页 |
·植物表达载体的特点 | 第26-27页 |
·助质粒 pSoup 的作用 | 第27页 |
·电击法转化策略 | 第27-28页 |
·本章小结 | 第28-29页 |
第3章 农杆菌介导的共转化和转基因植株的筛选与鉴定 | 第29-38页 |
·试验材料 | 第29-30页 |
·植物材料 | 第29页 |
·质粒和菌种 | 第29页 |
·酶和主要试剂 | 第29-30页 |
·引物 | 第30页 |
·主要仪器设备 | 第30页 |
·试验方法 | 第30-32页 |
·基质培养法栽培拟南芥 | 第30页 |
·农杆菌介导的共转化 | 第30-31页 |
·转基因拟南芥植株的抗性筛选 | 第31页 |
·转基因植株基因组 DNA 的提取 | 第31-32页 |
·转基因植株的 PCR 检测 | 第32页 |
·结果与分析 | 第32-35页 |
·基质中拟南芥的生长及共转化后的状态 | 第32页 |
·转基因植株的抗性筛选 | 第32-33页 |
·转基因植株的 PCR 检测 | 第33-35页 |
·讨论 | 第35-36页 |
·拟南芥转化 | 第35-36页 |
·抗性筛选 | 第36页 |
·本章小结 | 第36-38页 |
第4章 耐盐基因和启动子的功能分析 | 第38-60页 |
·试验材料 | 第39-40页 |
·植物材料 | 第39页 |
·酶和主要试剂 | 第39-40页 |
·引物 | 第40页 |
·主要仪器设备 | 第40页 |
·试验方法 | 第40-43页 |
·转基因拟南芥植株的盐胁迫处理 | 第40-41页 |
·盐胁迫植株主根长的测量及表型观察 | 第41页 |
·叶绿素含量的测定 | 第41页 |
·激光共聚焦显微镜下 GFP 的观察 | 第41页 |
·Cre 重组酶介导 loxP 位点删除反应的 PCR 检测 | 第41-42页 |
·RNA 的制备 | 第42页 |
·cDNA 第一链的合成(反转录) | 第42-43页 |
·cDNA 的 PCR 反应 | 第43页 |
·数据统计分析 | 第43页 |
·结果与分析 | 第43-56页 |
·盐处理植株的主根长 | 第43-45页 |
·盐胁迫对不同转基因植株表型的影响 | 第45-47页 |
·盐胁迫对叶绿素含量的影响 | 第47页 |
·Cre 重组酶介导 loxP 位点删除反应的检验 | 第47-48页 |
·激光共聚焦显微镜观察 GFP | 第48-51页 |
·总 RNA 提取及半定量 RT-PCR 反应条件的优化 | 第51-52页 |
·盐胁迫下转基因植株目的基因与报告基因的表达分析 | 第52-56页 |
·讨论 | 第56-58页 |
·激光共聚焦显微镜观察 GFP | 第56页 |
·半定量 RT-PCR 中 GFP 与 NHX1 的表达 | 第56-58页 |
·TvNHX1 和 AtNHX1 的耐盐性分析 | 第58页 |
·本章小结 | 第58-60页 |
结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-70页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论 | 第70-71页 |
致谢 | 第71页 |