缩略词对照表 | 第1-9页 |
摘要(中文) | 第9-10页 |
Abstract(English) | 第10-11页 |
第一部分 应用RAPD技术对(木奈)、李、桃部分品种的鉴定及对(木奈)亲缘关系的探讨 | 第11-28页 |
前言 | 第11-17页 |
1. (木奈)在落叶果树中的分类地位及存在问题 | 第11-12页 |
1.1 形态学比较 | 第11-12页 |
1.2 生化分析 | 第12页 |
2. RAPD原理简介 | 第12-13页 |
2.1 基本原理 | 第12-13页 |
2.2 RAPD技术的特点 | 第13页 |
3. RAPD技术在果树上的应用 | 第13-17页 |
3.1 品种或品系鉴定 | 第13-14页 |
3.2 属种间亲缘关系的鉴定 | 第14页 |
2.3 体细胞变异和杂种后代的鉴定 | 第14-15页 |
3.4 遗传图谱构建和基因定位 | 第15-16页 |
3.5 问题与展望 | 第16-17页 |
1. 材料与方法 | 第17-20页 |
1.1 (木奈)、桃、李基因组DNA的提取及鉴定 | 第17-18页 |
1.1.1 材料 | 第17页 |
1.1.2 试剂 | 第17页 |
1.1.3 方法 | 第17-18页 |
1.2 RAPD条件优化 | 第18-19页 |
1.2.1 材料 | 第18页 |
1.2.2 试剂 | 第18页 |
1.2.3 PCR扩增条件 | 第18-19页 |
1.2.4 参数梯度设计 | 第19页 |
1.2.5 电泳检测 | 第19页 |
1.3 RAPD技术对(木奈)、桃、李、部分品种的鉴定 | 第19-20页 |
1.3.1 材料 | 第19页 |
1.3.2 方法 | 第19-20页 |
2. 结果与分析 | 第20-23页 |
2.1 DNA提取及鉴定 | 第20页 |
2.1.1 DNA提取结果 | 第20页 |
2.1.2 试材选用 | 第20页 |
2.2 RAPD条件优化 | 第20-21页 |
2.2.1 Mg~(2-)浓度的影响 | 第20页 |
2.2.2 随机引物浓度的影响 | 第20页 |
2.2.3 dNTP浓度的影响 | 第20-21页 |
2.2.4 Taq酶浓度影响 | 第21页 |
2.2.5 DNA模板浓度的影响 | 第21页 |
2.3 品种聚类分析 | 第21-23页 |
2.3.1 引物的选择及多态性分析 | 第21页 |
2.3.2 品种聚类分析结果 | 第21-23页 |
3. 结论 | 第23-24页 |
参考文献 | 第24-26页 |
附录 | 第26-28页 |
第二部分 红巴梨果皮总RNA的提取及花青素生成相关基因f3h基因的克隆 | 第28-58页 |
前言 花色素简介 | 第28-38页 |
1. 花色素的种类及生物合成途径 | 第28-29页 |
2. 花色素的生理功能及用途 | 第29页 |
3. 提取花色素的工艺流程及鉴定方法 | 第29-30页 |
4. 影响植物着色的因素(尤其是果皮着色的因素) | 第30-32页 |
4.1 组织溶液PH值 | 第30页 |
4.2 组织中每种花色素的绝对含量和各种花色素的相对含量 | 第30页 |
4.3 协同着色现象及螯合金属离子的作用 | 第30页 |
4.4 细胞结构 | 第30页 |
4.5 品种遗传性 | 第30页 |
4.6 营养状况 | 第30-31页 |
4.6.1 碳水化合物 | 第30-31页 |
4.6.2 矿质元素的种类和含量 | 第31页 |
4.7 生态条件与果实着色 | 第31-32页 |
4.7.1 光照 | 第31-32页 |
4.7.2 温度 | 第32页 |
4.7.3 水分 | 第32页 |
4.8 生长调节剂 | 第32页 |
5. 花色素生物合成的遗传学背景 | 第32-34页 |
5.1 影响花色素生成的结构基因 | 第32-33页 |
5.2 影响花色素结构基因表达的调节基因 | 第33-34页 |
6. 花青素生成相关基因f3h基因研究进展 | 第34-35页 |
7. 花青素生成相关基因dfr基因研究进展 | 第35-37页 |
8. 红巴梨简介 | 第37页 |
9. 仁果类果实中色素含量变化及花青素的分布情况 | 第37页 |
10. 研究目的和意义 | 第37-38页 |
第一章 红巴梨果皮总RNA的提取 | 第38-41页 |
1. 材料和方法 | 第38-39页 |
1.1 材料 | 第38页 |
1.2 试剂 | 第38页 |
1.3 仪器与设备 | 第38页 |
1.4 提取方法 | 第38-39页 |
2. 实验结果 | 第39页 |
3. 讨论 | 第39-41页 |
第二章 花青素生成相关基因f3h基因的克隆 | 第41-55页 |
1. 材料 | 第41页 |
1.1 材料 | 第41页 |
1.2 菌株和试剂 | 第41页 |
1.3 仪器与设备 | 第41页 |
2. 方法 | 第41-45页 |
2.1 f3h基闲全长序列的获得 | 第41-43页 |
2.1.1 RT-PCR反应 | 第41-42页 |
2.1.2 f3h基因3′端cDNA的获得 | 第42页 |
2.1.3 f3h基因5′端cDNA的获得 | 第42-43页 |
2.2 DNA片段回收 | 第43页 |
2.2.1 回收 | 第43页 |
2.2.2 电泳检测回收片段纯度、大小 | 第43页 |
2.3 回收片段的连接 | 第43页 |
2.4 连接产物的转化 | 第43-44页 |
2.4.1 f coli感受态细胞的制备 | 第44页 |
2.4.2 转化 | 第44页 |
2.5 质粒DNA的提取 | 第44页 |
2.6 插入片段的质粒检测 | 第44-45页 |
2.6.1 f3h基因3′端cDNA的PCR检测 | 第44-45页 |
2.6.2 f3h基因5′端cDNA的PGR检测 | 第45页 |
3. 结果与讨论 | 第45-54页 |
3.1 f3h基因3端的获得 | 第45-46页 |
3.1.1 Y_2和Y_3对cDNA的扩增结果 | 第45-46页 |
3.1.2 扩增产物的克隆和重组子的筛选 | 第46页 |
3.1.3 PCR检测变大的质粒图 | 第46页 |
3.1.4 f3h基因3′端测序结果 | 第46页 |
3.2 f3h基因5′端cDNA的获得 | 第46-48页 |
3.2.1 Y_1和A_1对cDNA的扩增结果 | 第47页 |
3.2.2 扩增产物的克隆和重组子的筛选 | 第47页 |
3.2.3 PCR检测变大的质粒电泳图 | 第47页 |
3.2.4 f3h基因5′端测序结果 | 第47-48页 |
3.3 f3h基因全序列拼接结果 | 第48页 |
3.4 f3h基因全序列Blast结果 | 第48-50页 |
3.5 f3h基因酶切位点分析 | 第50-51页 |
3.6 f3h基因编码蛋白质序列的推导 | 第51-54页 |
4. 讨论 | 第54-55页 |
第三章 花青素生成相关基因dfr基因的克隆 | 第55-58页 |
1. 材料和试剂 | 第55页 |
1.1 材料 | 第55页 |
1.2 菌株和试剂 | 第55页 |
1.3 仪器与设备 | 第55页 |
2. 方法 | 第55-57页 |
2.1 3′端RT-PCR反应 | 第55-57页 |
3. 结果与讨论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-62页 |
附录 | 第62-65页 |
图1 3′端测序图 | 第62-63页 |
图2 5′端测序图 | 第63-64页 |
图3 f3h基因在GenBank中的登录 | 第64-65页 |
致谢 | 第65页 |