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应用RAPD技术对(木奈)亲缘关系的探讨及红巴梨花青素生成相关基因f3h和dfr基因的克隆

缩略词对照表第1-9页
摘要(中文)第9-10页
Abstract(English)第10-11页
第一部分 应用RAPD技术对(木奈)、李、桃部分品种的鉴定及对(木奈)亲缘关系的探讨第11-28页
 前言第11-17页
  1. (木奈)在落叶果树中的分类地位及存在问题第11-12页
   1.1 形态学比较第11-12页
   1.2 生化分析第12页
  2. RAPD原理简介第12-13页
   2.1 基本原理第12-13页
   2.2 RAPD技术的特点第13页
  3. RAPD技术在果树上的应用第13-17页
   3.1 品种或品系鉴定第13-14页
   3.2 属种间亲缘关系的鉴定第14页
   2.3 体细胞变异和杂种后代的鉴定第14-15页
   3.4 遗传图谱构建和基因定位第15-16页
   3.5 问题与展望第16-17页
 1. 材料与方法第17-20页
  1.1 (木奈)、桃、李基因组DNA的提取及鉴定第17-18页
   1.1.1 材料第17页
   1.1.2 试剂第17页
   1.1.3 方法第17-18页
  1.2 RAPD条件优化第18-19页
   1.2.1 材料第18页
   1.2.2 试剂第18页
   1.2.3 PCR扩增条件第18-19页
   1.2.4 参数梯度设计第19页
   1.2.5 电泳检测第19页
  1.3 RAPD技术对(木奈)、桃、李、部分品种的鉴定第19-20页
   1.3.1 材料第19页
   1.3.2 方法第19-20页
 2. 结果与分析第20-23页
  2.1 DNA提取及鉴定第20页
   2.1.1 DNA提取结果第20页
   2.1.2 试材选用第20页
  2.2 RAPD条件优化第20-21页
   2.2.1 Mg~(2-)浓度的影响第20页
   2.2.2 随机引物浓度的影响第20页
   2.2.3 dNTP浓度的影响第20-21页
   2.2.4 Taq酶浓度影响第21页
   2.2.5 DNA模板浓度的影响第21页
  2.3 品种聚类分析第21-23页
   2.3.1 引物的选择及多态性分析第21页
   2.3.2 品种聚类分析结果第21-23页
 3. 结论第23-24页
 参考文献第24-26页
 附录第26-28页
第二部分 红巴梨果皮总RNA的提取及花青素生成相关基因f3h基因的克隆第28-58页
 前言 花色素简介第28-38页
  1. 花色素的种类及生物合成途径第28-29页
  2. 花色素的生理功能及用途第29页
  3. 提取花色素的工艺流程及鉴定方法第29-30页
  4. 影响植物着色的因素(尤其是果皮着色的因素)第30-32页
   4.1 组织溶液PH值第30页
   4.2 组织中每种花色素的绝对含量和各种花色素的相对含量第30页
   4.3 协同着色现象及螯合金属离子的作用第30页
   4.4 细胞结构第30页
   4.5 品种遗传性第30页
   4.6 营养状况第30-31页
    4.6.1 碳水化合物第30-31页
    4.6.2 矿质元素的种类和含量第31页
   4.7 生态条件与果实着色第31-32页
    4.7.1 光照第31-32页
    4.7.2 温度第32页
    4.7.3 水分第32页
   4.8 生长调节剂第32页
  5. 花色素生物合成的遗传学背景第32-34页
   5.1 影响花色素生成的结构基因第32-33页
   5.2 影响花色素结构基因表达的调节基因第33-34页
  6. 花青素生成相关基因f3h基因研究进展第34-35页
  7. 花青素生成相关基因dfr基因研究进展第35-37页
  8. 红巴梨简介第37页
  9. 仁果类果实中色素含量变化及花青素的分布情况第37页
  10. 研究目的和意义第37-38页
 第一章 红巴梨果皮总RNA的提取第38-41页
  1. 材料和方法第38-39页
   1.1 材料第38页
   1.2 试剂第38页
   1.3 仪器与设备第38页
   1.4 提取方法第38-39页
  2. 实验结果第39页
  3. 讨论第39-41页
 第二章 花青素生成相关基因f3h基因的克隆第41-55页
  1. 材料第41页
   1.1 材料第41页
   1.2 菌株和试剂第41页
   1.3 仪器与设备第41页
  2. 方法第41-45页
   2.1 f3h基闲全长序列的获得第41-43页
    2.1.1 RT-PCR反应第41-42页
    2.1.2 f3h基因3′端cDNA的获得第42页
    2.1.3 f3h基因5′端cDNA的获得第42-43页
   2.2 DNA片段回收第43页
    2.2.1 回收第43页
    2.2.2 电泳检测回收片段纯度、大小第43页
   2.3   回收片段的连接第43页
   2.4 连接产物的转化第43-44页
    2.4.1 f coli感受态细胞的制备第44页
    2.4.2 转化第44页
   2.5 质粒DNA的提取第44页
   2.6 插入片段的质粒检测第44-45页
    2.6.1 f3h基因3′端cDNA的PCR检测第44-45页
    2.6.2 f3h基因5′端cDNA的PGR检测第45页
  3. 结果与讨论第45-54页
   3.1 f3h基因3端的获得第45-46页
    3.1.1 Y_2和Y_3对cDNA的扩增结果第45-46页
    3.1.2 扩增产物的克隆和重组子的筛选第46页
    3.1.3 PCR检测变大的质粒图第46页
    3.1.4 f3h基因3′端测序结果第46页
   3.2 f3h基因5′端cDNA的获得第46-48页
    3.2.1 Y_1和A_1对cDNA的扩增结果第47页
    3.2.2 扩增产物的克隆和重组子的筛选第47页
    3.2.3 PCR检测变大的质粒电泳图第47页
    3.2.4 f3h基因5′端测序结果第47-48页
   3.3 f3h基因全序列拼接结果第48页
   3.4 f3h基因全序列Blast结果第48-50页
   3.5 f3h基因酶切位点分析第50-51页
   3.6 f3h基因编码蛋白质序列的推导第51-54页
  4. 讨论第54-55页
 第三章 花青素生成相关基因dfr基因的克隆第55-58页
  1. 材料和试剂第55页
   1.1 材料第55页
   1.2 菌株和试剂第55页
   1.3 仪器与设备第55页
  2. 方法第55-57页
   2.1 3′端RT-PCR反应第55-57页
  3. 结果与讨论第57-58页
参考文献第58-62页
附录第62-65页
 图1 3′端测序图第62-63页
 图2 5′端测序图第63-64页
 图3 f3h基因在GenBank中的登录第64-65页
致谢第65页

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