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双T-DNA共转化获得无选择标记的抗虫转基因籼稻植株

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-9页
本文缩写词第9-10页
前言第10-12页
Ⅰ 文献综述第12-25页
 1.1 水稻遗传转化技术的发展第12-13页
 1.2 蛋白酶抑制剂基因第13-15页
 1.3 标记基因第15-16页
 1.4 去除选择标记基因的必要性第16-17页
 1.5 去除选择标记基因的策略第17-24页
  1.5.1 位点特异性重组系统第17-20页
  1.5.2 利用共转化系统删除选择标记基因第20-21页
  1.5.3 利用转座子成分删除选择标记基因第21-22页
  1.5.4 同源序列重组删除选择标记基因第22-23页
  1.5.5 多次自动转化(MAT)载体系统第23-24页
 1.6 本文的立题思想第24-25页
Ⅱ 材料与方法第25-32页
 2.1 实验材料第25-26页
  2.1.1 供试水稻品种第25页
  2.1.2 菌株及质粒第25-26页
  2.1.3 主要试剂和仪器第26页
 2.2 实验方法第26-32页
  2.2.1 水稻胚性愈伤组织的诱导及继代第26-27页
  2.2.2 农杆菌介导的水稻愈伤转化方法第27-28页
  2.2.3 抗性愈伤的继代与再生成完整植株第28页
  2.2.4 水稻叶片DNA提取第28-29页
  2.2.5 PCR检测转基因植株第29-30页
  2.2.6 双探针PCR-Southern blot检测第30页
  2.2.7 转基因植株后代的田间抗虫性调查第30-31页
  2.2.8 转基因水稻抗虫性的离体检测方法第31页
  2.2.9 转基因植株潮霉素抗性测定第31-32页
Ⅲ 结果和分析第32-43页
 3.1 双T-DNA载体转化明恢86获得再生植株第32-34页
 3.2 转基因T0代植株目的基因与选择标记基因共转化频率检测第34-36页
 3.3 共转化植株后代目的基因与选择标记基因的分离检测第36-40页
 3.4 T_2代植株检测获得纯合无选择标记的转sck基因株系第40页
 3.5 T_3代植株检测获得纯合无选择标记的转sck基因植株第40-41页
 3.6 转sck基因水稻的抗虫性分析第41-43页
Ⅳ 讨论第43-47页
 4.1 双T-DNA共转化获得无选择标记的抗虫转基因籼稻是十分可行的第43页
 4.2 无选择标记的转基因植株在杂交育种中的应用第43-44页
 4.3 目的基因与选择标记基因的共转化频率及其在后代植株中的分离第44-45页
 4.4 共转化系统去除选择标记基因缺憾与改进策略第45-46页
 4.5 双T-DNA系统与去除标记基因的其他方法的比较第46-47页
参考文献第47-52页
附件第52-57页
致谢第57页

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