| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-18页 |
| 1．1 本课题研究的目的意义 | 第9页 |
| 1．2 碱性成纤维细胞生长因子 | 第9-11页 |
| 1．3 碱性成纤维细胞生长因子抗体 | 第11-13页 |
| 1．4 碱性成纤维细胞生长因子的检测方法 | 第13-15页 |
| 1．5 体液中碱性成纤维细胞生长因子的检测的意义 | 第15-18页 |
| 第二章 单抗的筛选和鉴定 | 第18-25页 |
| 2．1 实验材料 | 第18-19页 |
| 2．1．1 主要试剂 | 第18页 |
| 2．1．2 主要仪器设备 | 第18页 |
| 2．1．3 溶液配制 | 第18-19页 |
| 2．2 实验方法 | 第19-21页 |
| 2．2．1 杂交瘤细胞复苏 | 第19页 |
| 2．2．2 杂交瘤细胞的有限稀释法克隆 | 第19-20页 |
| 2．2．3 单克隆细胞产生抗体水平的测定及阳性细胞的筛选 | 第20-21页 |
| 2．2．4 腹水制备 | 第21页 |
| 2．2．5 腹水效价测定 | 第21页 |
| 2．3 实验结果 | 第21-24页 |
| 2．3．1 抗bFGF单抗杂交瘤细胞的阳性单克隆孔的筛选 | 第21-23页 |
| 2．3．1．1 2H2细胞株的筛选 | 第21-22页 |
| 2．3．1．2 2B5细胞的筛选 | 第22-23页 |
| 2．3．2 腹水效价的测定 | 第23-24页 |
| 2．3．2．1 2H2腹水效价的测定 | 第23-24页 |
| 2．3．2．2 2B5腹水效价的测定 | 第24页 |
| 2．4 讨论 | 第24-25页 |
| 第三章 bFGF双抗夹心ELISA检测方法的建立 | 第25-42页 |
| 3．1 实验材料 | 第25-27页 |
| 3．1．1 实验动物 | 第25页 |
| 3．1．2 主要试剂 | 第25-26页 |
| 3．1．3 主要仪器设备 | 第26页 |
| 3．1．4 试剂配制 | 第26-27页 |
| 3．2 实验方法 | 第27-30页 |
| 3．2．1 抗bFGF鼠血清的制备 | 第27页 |
| 3．2．2 抗bFGF鼠多抗的提纯 | 第27-28页 |
| 3．2．2．1 多抗的硫酸铵沉淀法粗提 | 第27页 |
| 3．2．2．2 Sepherdex G-200分子筛层析提纯多抗 | 第27页 |
| 3．2．2．3 DEAE Sepherose Fast Flow离子交换层析提纯多抗 | 第27-28页 |
| 3．2．3 2B5单抗的提纯 | 第28页 |
| 3．2．4 抗体纯度的鉴定 | 第28-30页 |
| 3．2．4．1 SDS-PAGE电泳 | 第28-29页 |
| 3．2．4．1．1 试剂的配制 | 第28-29页 |
| 3．2．4．1．2 实验方法 | 第29页 |
| 3．2．4．2 Western-blot实验 | 第29-30页 |
| 3．2．4．2．1 试剂的配制 | 第29页 |
| 3．2．4．2．2 实验方法 | 第29-30页 |
| 3．2．5 抗bFGF多抗的酶标 | 第30页 |
| 3．2．5．1 溶液的配制 | 第30页 |
| 3．2．5．2 实验方法 | 第30页 |
| 3．3 实验结果 | 第30-40页 |
| 3．3．1 血清效价的测定 | 第30-32页 |
| 3．3．2 抗bFGF多抗与不同浓度的bFGF结合曲线 | 第32页 |
| 3．3．3 2B5单抗与不同浓度的bFGF结合曲线 | 第32-33页 |
| 3．3．4 多抗的纯化和鉴定 | 第33-35页 |
| 3．3．4．1 多抗的Sephadex G-200分子筛法纯化 | 第33页 |
| 3．3．4．2 多抗的DEAE Sepherose Fast Flow离子交换法纯化 | 第33-34页 |
| 3．3．4．3 纯化的多抗SDS-PAGE电泳及Western-blot实验结果 | 第34-35页 |
| 3．3．4．4 酶标多抗的Sephadex G-200分子筛法纯化 | 第35页 |
| 3．3．5 单抗的纯化和鉴定 | 第35-36页 |
| 3．3．5．1 2B5单抗Protein A亲和层析法纯化 | 第35-36页 |
| 3．3．5．2 纯化的2B5单抗SDS-PAGE电泳及Western-blot实验结果 | 第36页 |
| 3．3．6 酶标多抗效价的测定 | 第36-37页 |
| 3．3．7 方阵滴定法确定双抗夹心ELISA法各组分的浓度 | 第37-38页 |
| 3．3．7．1 双抗夹心ELISA法的实验步骤 | 第37页 |
| 3．3．7．2 包被抗体以及检测抗体浓度的确定 | 第37-38页 |
| 3．3．8 双抗夹心ELISA实验的稳定性研究 | 第38-40页 |
| 3．4 讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 间接ELISA和竞争ELISA法检测微量bFGF | 第42-50页 |
| 4．1 2H2单抗的纯化和鉴定 | 第42-44页 |
| 4．1．1 2H2单抗Protein A亲和层析法纯化 | 第42-43页 |
| 4．1．2 纯化的2H2单抗SDS-PAGE电泳及Western-blot实验结果 | 第43-44页 |
| 4．2 应用2H2单抗检测bFGF | 第44-48页 |
| 4．2．1 ELISA竞争法实验步骤 | 第44页 |
| 4．2．2 2H2单抗与不同浓度的bFGF结合曲线 | 第44-45页 |
| 4．2．3 bFGF饱和浓度的测定 | 第45-46页 |
| 4．2．4 bFGF竞争ELISA检测 | 第46页 |
| 4．2．5 应用间接ELISA法检测细胞培养上清中的bFGF | 第46-48页 |
| 4．2．5．1 SWO-38细胞培养上清的检测 | 第46-47页 |
| 4．2．5．2 血管内皮细胞培养上清的检测 | 第47-48页 |
| 4．3 讨论 | 第48-50页 |
| 第五章 小结及展望 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 在校期间发表论文 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
