中文摘要 | 第1-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-40页 |
综述一 菌类多重耐药分子机制的研究进展 | 第13-26页 |
1 几种革蓝氏阴性细菌的外输泵的分子机制 | 第14-18页 |
2 几种革蓝氏阳性细菌的外输泵的分子机制 | 第18-21页 |
3 几种真菌的外输泵的分子机制 | 第21-26页 |
综述二 大肠杆菌的耐药性分子机制的研究进展 | 第26-40页 |
1 抗生素作用位点的改变或新作用位点的产生 | 第26-28页 |
2 染色体,质粒或转座子介导的大肠杆菌中酶对抗生素的修饰和破坏 | 第28-30页 |
3 减少抗生素向大肠杆菌内的摄入 | 第30-31页 |
4 药物从大肠杆菌中主动外排的增加 | 第31-33页 |
5 结语 | 第33-40页 |
第二部分 研究内容 | 第40-106页 |
实验一 动物源性多重耐药大肠杆菌的分离与鉴定 | 第40-49页 |
1 材料与方法 | 第40-42页 |
2 结果 | 第42-46页 |
2.1 镜检与生化鉴定结果 | 第42页 |
2.2 132株大肠杆菌的耐药谱 | 第42-43页 |
2.3 132株大肠杆菌的药敏实验结果 | 第43页 |
2.4 随机挑选40株大肠杆菌对6种抗生素的最低抑菌浓度的测定结果 | 第43-45页 |
2.5 多重耐药株的筛选 | 第45-46页 |
3 讨论 | 第46页 |
4 小结 | 第46-49页 |
实验二 临床分离多重耐药大肠杆菌AcrA、AcrB基因的mRNA水平的定量测定 | 第49-80页 |
1 材料与方法 | 第49-64页 |
1.1 材料 | 第49-52页 |
1.2 方法 | 第52-64页 |
2 结果 | 第64-76页 |
2.1 大肠杆菌ATCC25922基因组的提取 | 第64页 |
2.2 大肠杆菌ATCC25922 AcrA、AcrB基因片段的扩增结果 | 第64-65页 |
2.3 PCR产物的克隆及阳性克隆的筛选 | 第65-66页 |
2.4 克隆质粒的序列分析 | 第66-67页 |
2.5 Acra、AcrB内参的构建结果 | 第67-68页 |
2.6 AcrA、AcrB内参的克隆、测序结果 | 第68-69页 |
2.7 对15株大肠杆菌AcrA、AcrB的mRNA水平的测定 | 第69-75页 |
2.8 大肠杆菌AcrA、AcrB的mRNA相对水平的比较 | 第75-76页 |
3 讨论 | 第76-78页 |
4 小结 | 第78-80页 |
实验三 大肠杆菌AcrA、AcrB部分基因的原核表达、抗体制备及多药耐药大肠杆菌AcrA蛋白表达水平的检测 | 第80-106页 |
1 材料与方法 | 第80-91页 |
1.1 材料 | 第80-82页 |
1.2 方法 | 第82-91页 |
2 结果 | 第91-102页 |
2.1 AcrA、AcrB基因的克隆 | 第91-93页 |
2.2 融合基因原核表达载体的构建 | 第93-98页 |
2.3 Pet28(a)-AcrA、Pet28(a)-AcrB在宿主菌中的诱导表达与初步纯化 | 第98-99页 |
2.4 表达产物的分析 | 第99-101页 |
2.5 受试大肠杆菌AcrA表达产物的Western-blot检测结果 | 第101-102页 |
3 讨论 | 第102-103页 |
4 小结 | 第103-106页 |
结论 | 第106-107页 |
致谢 | 第107-108页 |
CURRICULUM VITAE | 第108-109页 |
英文摘要 | 第109-111页 |