| 英文缩略写 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-8页 |
| 前言 | 第8-16页 |
| 1 材料与方法 | 第16-21页 |
| 1．1 试验材料 | 第16页 |
| 1．2 试剂 | 第16页 |
| 1．3 实验方法 | 第16-20页 |
| 1．3．1 低温锻炼 | 第16页 |
| 1．3．2 预培养 | 第16页 |
| 1．3．3 玻璃化保护剂处理及冻存 | 第16-17页 |
| 1．3．4 材料化冻 | 第17页 |
| 1．3．5 恢复培养 | 第17页 |
| 1．3．6 TTC法测细胞活力 | 第17页 |
| 1．3．7 成活率和相对成活率的计算方法 | 第17-18页 |
| 1．3．8 水分测定方法 | 第18页 |
| 1．3．9 可溶性糖测定方法 | 第18页 |
| 1．3．10 可溶性蛋白质电泳 | 第18页 |
| 1．3．10．1 样品制备 | 第18页 |
| 1．3．10．2 电泳条件 | 第18页 |
| 1．3．10．3 染色 | 第18页 |
| 1．3．11 同工酶电泳及染色 | 第18-19页 |
| 1．3．11．1 样品制备 | 第18-19页 |
| 1．3．11．2 电泳条件 | 第19页 |
| 1．3．11．3 染色 | 第19页 |
| 1．3．12 DNA提取及RAPD分析 | 第19页 |
| 1．3．12．1 DNA提取 | 第19页 |
| 1．3．12．2 RAPD分析 | 第19页 |
| 1．3．13 琼脂糖电泳 | 第19-20页 |
| 1．4 数据分析 | 第20-21页 |
| 2 结果与分析 | 第21-39页 |
| 2．1 继代培养时间长短对成活率的影响 | 第21页 |
| 2．2 低温锻炼对成活率的影响 | 第21-22页 |
| 2．3 预培养对成活率及茎尖含水量和含糖量的影响 | 第22-25页 |
| 2．3．1 蔗糖浓度及预培养时间对成活率的影响 | 第22-23页 |
| 2．3．2 蔗糖与甘露醇配合使用及预培养时间对成活率的影响 | 第23页 |
| 2．3．3 NH_4~+和DMSO对成活率的影响 | 第23页 |
| 2．3．4 预培养过程中茎尖含水量和含糖量的变化 | 第23页 |
| 2．3．5 预培养对冻存后细胞活力的影响 | 第23-25页 |
| 2．4 冰冻保护剂对成活率的影响 | 第25-27页 |
| 2．4．1 冰冻保护剂及处理时间的筛选 | 第25页 |
| 2．4．2 不同处理方式对成活率的影响 | 第25-26页 |
| 2．4．3 茎尖大小对PVS3耐受力的差异 | 第26-27页 |
| 2．5 液氮中保存时间对成活率的 | 第27-28页 |
| 2．6 不同的化冻方法对成活率的影响 | 第28页 |
| 2．7 不同恢复培养方式对成活率的影响 | 第28-32页 |
| 2．7．1 恢复培养基的选择 | 第28-29页 |
| 2．7．2 NH_4~+和茎尖长度对生长迟滞期的影响 | 第29页 |
| 2．7．3 恢复生长的动态变化 | 第29-32页 |
| 2．8 不同苹果品种成活率差异的比较 | 第32-33页 |
| 2．9 冻存成活苗的生长发育情况 | 第33-34页 |
| 2．10 超低温保存后叶片的再生能力 | 第34-35页 |
| 2．11 蛋白质变异检测 | 第35-36页 |
| 2．12 POD同工酶变异检测 | 第36-37页 |
| 2．13 RAPD方法检测遗传变异 | 第37-39页 |
| 3 讨论 | 第39-43页 |
| 3．1 前处理提高成活率的问题 | 第39-40页 |
| 3．2 玻璃化保护剂 | 第40页 |
| 3．3 生长迟滞期的问题 | 第40-41页 |
| 3．4 超低温保存后再生途径对遗传稳定性的影响 | 第41页 |
| 3．5 再生植株遗传稳定性检测 | 第41-42页 |
| 3．6 进一步研究的设想 | 第42-43页 |
| 4 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-50页 |
| 英文摘要 | 第50-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 在学期间发表及待发表的文章 | 第53页 |