| 中文摘要 | 第1-11页 |
| 英文摘要 | 第11-16页 |
| 英文缩略词表 | 第16-18页 |
| 前言 | 第18-20页 |
| 文献回顾 | 第20-39页 |
| 一、间隙连接的形态与结构 | 第20-22页 |
| 二、间隙连接多基因家族 | 第22-24页 |
| 三、间隙连接的功能 | 第24-26页 |
| 四、间隙连接功能的调节 | 第26-31页 |
| 五、间隙连接的研究方法 | 第31-32页 |
| 六、间隙连接在肝细胞肝癌中的研究现状 | 第32-39页 |
| 实验部分 | 第39-112页 |
| 第一部分 间隙连接蛋白Cx32、Cx43在肝细胞肝癌组织和细胞系中的表达及意义研究 | 第39-63页 |
| 前言 | 第39-41页 |
| 1 材料 | 第41-43页 |
| ·标本来源 | 第41页 |
| ·细胞系 | 第41页 |
| ·主要仪器 | 第41-42页 |
| ·主要试剂 | 第42-43页 |
| 2 方法 | 第43-46页 |
| ·免疫组织化学 | 第43-44页 |
| ·SP免疫组织化学 | 第43页 |
| ·结果判定 | 第43-44页 |
| ·细胞培养 | 第44页 |
| ·流式细胞仪分析 | 第44-45页 |
| ·间接免疫荧光染色 | 第44页 |
| ·流式细胞仪检测 | 第44-45页 |
| ·激光扫描共聚焦显微镜分析 | 第45-46页 |
| ·间接免疫荧光染色 | 第45页 |
| ·激光扫描共聚焦显微镜定位、定量分析 | 第45-46页 |
| 3 结果 | 第46-59页 |
| ·免疫组织化学结果 | 第46-49页 |
| ·流式细胞仪分析结果 | 第49-53页 |
| ·激光扫描共聚焦显微镜分析结果 | 第53-59页 |
| 4 讨论 | 第59-63页 |
| 第二部分 间隙连接基因cx32、cx43mRNA在肝细胞肝癌组织和细胞系中的表达及意义研究 | 第63-86页 |
| 前言 | 第63-65页 |
| 1 材料 | 第65-70页 |
| ·细胞系 | 第65页 |
| ·质粒与菌种 | 第65页 |
| ·主要仪器 | 第65-66页 |
| ·主要试剂 | 第66-67页 |
| ·主要溶液配制 | 第67-70页 |
| 2 方法 | 第70-77页 |
| ·组织mRNA原位杂交 | 第70-75页 |
| ·组织切片准备 | 第70页 |
| ·质粒的大量提取 | 第70-71页 |
| ·质粒的纯化 | 第71页 |
| ·质粒的酶切鉴定 | 第71-72页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第72页 |
| ·目的基因片段回收及纯化 | 第72页 |
| ·探针标记 | 第72-73页 |
| ·mRNA原位杂交 | 第73-74页 |
| ·结果判定 | 第74-75页 |
| ·培养细胞mRNA原位杂交 | 第75-77页 |
| ·探针制备、标记 | 第75页 |
| ·mRNA原位杂交 | 第75-76页 |
| ·结果判定 | 第76-77页 |
| 3 结果 | 第77-84页 |
| ·组织mRNA原位杂交结果 | 第77-81页 |
| ·细胞mRNA原位杂交结果 | 第81-84页 |
| 4 讨论 | 第84-86页 |
| 第三部分 间隙连接通讯功能和cx基因信号转导机制的初步研究 | 第86-112页 |
| 前言 | 第86-88页 |
| 1 材料 | 第88-93页 |
| ·细胞系 | 第88页 |
| ·主要仪器 | 第88页 |
| ·主要试剂 | 第88-89页 |
| ·主要溶液配制 | 第89-93页 |
| 2 方法 | 第93-97页 |
| ·细胞培养 | 第93页 |
| ·Lucifer Yellow划痕标记荧光传输法 | 第93页 |
| ·细胞内第二信使Ca~(2+)含量测定 | 第93-94页 |
| ·Fluo-3 AM负载 | 第93-94页 |
| ·激光扫描共聚焦显微镜测定[Ca~(2+)]i | 第94页 |
| ·Cx32、Cx43蛋白及其酪氨酸磷酸化分析 | 第94-97页 |
| ·细胞裂解 | 第94-95页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第95-96页 |
| ·Western blot | 第96-97页 |
| 3 结果 | 第97-109页 |
| ·间隙连接通讯功能测定结果 | 第97-99页 |
| ·细胞内第二信使[Ca~(2+)]i含量分析结果 | 第99-106页 |
| ·Cx32、Cx43蛋白及其酪氨酸磷酸化分析结果 | 第106-109页 |
| 4 讨论 | 第109-112页 |
| 结论 | 第112-113页 |
| 致谢 | 第113-114页 |
| 附录 | 第114-116页 |
| 参考文献 | 第116-128页 |
