| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-10页 |
| 1 绪论 | 第10-25页 |
| ·纤维素酶 | 第10-14页 |
| ·纤维素酶的来源和组成 | 第10-11页 |
| ·纤维素酶的作用机制 | 第11页 |
| ·纤维素酶的应用 | 第11-13页 |
| ·能源工业 | 第11页 |
| ·食品工业 | 第11-12页 |
| ·造纸工业 | 第12页 |
| ·洗涤剂工业 | 第12页 |
| ·纺织工业 | 第12-13页 |
| ·饲料工业 | 第13页 |
| ·医药工业 | 第13页 |
| ·纤维素酶的生产 | 第13-14页 |
| ·纤维素酶的分离纯化 | 第14-19页 |
| ·沉淀 | 第14-15页 |
| ·凝胶过滤 | 第15-16页 |
| ·吸附层析 | 第16页 |
| ·离子交换层析 | 第16-17页 |
| ·高效液相色谱 | 第17-18页 |
| ·亲和层析 | 第18页 |
| ·凝胶电泳 | 第18-19页 |
| ·纤维素酶的动力学研究 | 第19-23页 |
| ·动力学模型 | 第19-20页 |
| ·酶促反应动力学 | 第20-21页 |
| ·抑制动力学 | 第21页 |
| ·化学修饰动力学 | 第21-23页 |
| ·论文研究的主要内容和意义 | 第23-25页 |
| 2 实验材料 | 第25-30页 |
| ·主要药品 | 第25-26页 |
| ·主要仪器 | 第26-27页 |
| ·主要试剂 | 第27-29页 |
| ·供试菌株 | 第29-30页 |
| 3 纤维素酶中内切β-葡聚糖苷酶的分离纯化 | 第30-39页 |
| ·硫酸铵盐析 | 第30-31页 |
| ·原理 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-31页 |
| ·粗酶液的制备 | 第30-31页 |
| ·确定硫酸铵最佳饱和度区间及缓冲液的最佳pH | 第31页 |
| ·最佳条件下盐析 | 第31页 |
| ·Sephadex G100凝胶柱层析 | 第31-32页 |
| ·原理 | 第31页 |
| ·实验步骤 | 第31-32页 |
| ·DEAE FF弱阴离子交换柱层析 | 第32-34页 |
| ·原理 | 第32-33页 |
| ·实验方法 | 第33-34页 |
| ·洗脱液pH和离子强度的选择 | 第33页 |
| ·FPLC步骤 | 第33-34页 |
| ·SDS-PAGE不连续垂直平板电泳 | 第34-36页 |
| ·原理 | 第34页 |
| ·分离胶浓度的选择 | 第34-35页 |
| ·电泳步骤 | 第35-36页 |
| ·纤维素酶活力的测定 | 第36-39页 |
| ·3,5—二硝基水杨酸比色法(DNS法)测定还原糖浓度 | 第36-37页 |
| ·原理 | 第36-37页 |
| ·葡萄糖标准曲线的绘制 | 第37页 |
| ·求取还原糖浓度 | 第37页 |
| ·纤维素酶活力的测定 | 第37-39页 |
| ·内切β-葡聚糖苷酶活力的测定 | 第37-38页 |
| ·外切β-葡聚糖苷酶活力的测定 | 第38页 |
| ·β-葡萄糖苷酶活力的测定 | 第38-39页 |
| 4 内切β-葡聚糖苷酶的动力学 | 第39-46页 |
| ·最适反应温度 | 第39页 |
| ·最适pH | 第39页 |
| ·米氏常数Km和最大反应速率Vmax | 第39-40页 |
| ·葡萄糖对内切β-葡聚糖苷酶热稳定性影响机理模型及热动力学 | 第40-41页 |
| ·葡萄糖对内切酶热稳定性影响的机理模型及验证 | 第40页 |
| ·内切酶的热动力学参数 | 第40-41页 |
| ·pH值对内切β-葡聚糖苷酶活力影响的酶催化动力学模型 | 第41-42页 |
| ·动力学模型的建立 | 第41页 |
| ·动力学模型的验证 | 第41-42页 |
| ·糖对内切β-葡聚糖苷酶的作用动力学 | 第42-43页 |
| ·葡萄糖、半乳糖和蔗糖对内切酶的作用 | 第42页 |
| ·D-果糖对内切酶的作用 | 第42页 |
| ·动力学机理分析 | 第42-43页 |
| ·甲醇对内切β-葡聚糖苷酶侧链基团的化学修饰 | 第43-46页 |
| ·内切酶的部分纯化和浓缩 | 第43页 |
| ·甲醇修饰侧链基团的确定 | 第43页 |
| ·甲醇对内切酶活力的影响 | 第43-44页 |
| ·底物和葡萄糖对化学修饰的影响 | 第44页 |
| ·化学修饰的时间进程分析 | 第44-45页 |
| ·化学修饰对内切酶构象的影响 | 第45-46页 |
| 5 结果与讨论 | 第46-76页 |
| ·纤维素酶系中内切β-葡聚糖苷酶的分离纯化 | 第46-55页 |
| ·黑曲霉产内切酶的分离纯化 | 第46-50页 |
| ·盐析 | 第46-47页 |
| ·Sephadex G100凝胶柱层析 | 第47-48页 |
| ·DEAE FF弱阴离子交换柱层析 | 第48-49页 |
| ·SDS-PAGE不连续垂直平板电泳 | 第49-50页 |
| ·绿色木霉MJ1产内切酶的分离纯化 | 第50-55页 |
| ·盐析 | 第50-52页 |
| ·Sephadex G100凝胶柱层析 | 第52页 |
| ·DEAE FF弱阴离子交换柱层析 | 第52-53页 |
| ·SDS-PAGE不连续垂直平板电泳 | 第53-55页 |
| ·内切β-葡聚糖苷酶动力学研究 | 第55-76页 |
| ·最适反应温度 | 第55-56页 |
| ·黑曲霉产内切酶的最适反应温度 | 第55-56页 |
| ·绿色木霉MJ1产内切酶的最适反应温度 | 第56页 |
| ·最适pH | 第56-57页 |
| ·黑曲霉产内切酶的最适pH | 第56-57页 |
| ·绿色木霉MJ1产内切酶的最适pH | 第57页 |
| ·米氏常数Km和最大反应速率Vmax | 第57-58页 |
| ·黑曲霉产内切酶的Km和Vmax | 第57-58页 |
| ·绿色木霉MJ1产内切酶的Km和Vmax | 第58页 |
| ·葡萄糖对内切β-葡聚糖苷酶热稳定性影响机理模型及热动力学 | 第58-61页 |
| ·葡萄糖对内切酶热稳定性影响机理模型及验证 | 第58-60页 |
| ·内切酶的热动力学参数 | 第60-61页 |
| ·pH值对内切β-葡聚糖苷酶活力影响的酶催化动力学模型 | 第61-65页 |
| ·动力学模型的建立 | 第61-63页 |
| ·动力学模型的验证 | 第63-65页 |
| ·糖对内切β-葡聚糖苷酶的作用动力学 | 第65-67页 |
| ·葡萄糖、半乳糖和蔗糖对内切酶的作用 | 第65-66页 |
| ·D-果糖对内切酶的作用 | 第66页 |
| ·动力学机理分析 | 第66-67页 |
| ·甲醇对内切β-葡聚糖苷酶侧链基团的化学修饰 | 第67-76页 |
| ·甲醇修饰侧链基团的确定 | 第67-68页 |
| ·甲醇对内切酶活力的影响 | 第68-69页 |
| ·底物和葡萄糖对化学修饰的影响 | 第69-70页 |
| ·化学修饰的时间进程分析 | 第70-71页 |
| ·化学修饰对内切酶构象的影响 | 第71-76页 |
| 结论 | 第76-77页 |
| 展望 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 硕士论文期间发表论文清单 | 第85页 |
