| 摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第一章 前言 | 第12-22页 |
| 1.1 花青素的生物合成途径 | 第12-14页 |
| 1.2 芸薹属花青素合成相关基因研究进展 | 第14-15页 |
| 1.3 DFR生物学功能研究进展 | 第15-17页 |
| 1.3.1 DFR的基因结构 | 第15-16页 |
| 1.3.2 DFR基因的功能 | 第16页 |
| 1.3.3 环境因素对DFR的调控 | 第16页 |
| 1.3.4 激素对DFR的调控 | 第16-17页 |
| 1.3.5 转录因子对DFR的调控 | 第17页 |
| 1.4 VIGS研究进展 | 第17-20页 |
| 1.4.1 VIGS作用原理 | 第17-18页 |
| 1.4.2 VIGS病毒载体 | 第18页 |
| 1.4.3 VIGS的影响因素 | 第18-19页 |
| 1.4.4 VIGS的优点和缺点 | 第19-20页 |
| 1.5 本研究的目的与意义及技术路线 | 第20-22页 |
| 1.5.1 本研究的目的与意义 | 第20-21页 |
| 1.5.2 技术路线 | 第21-22页 |
| 第二章 羽衣甘蓝DFR基因全长克隆 | 第22-32页 |
| 2.1 试验材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第22页 |
| 2.1.2 试验试剂及配置 | 第22-23页 |
| 2.1.3 试验仪器 | 第23页 |
| 2.2 试验方法 | 第23-25页 |
| 2.2.1 羽衣甘蓝叶片DNA提取 | 第23-24页 |
| 2.2.2 羽衣甘蓝DFR基因全长克隆 | 第24-25页 |
| 2.2.3 羽衣甘蓝DFR基因序列比对和分析 | 第25页 |
| 2.2.4 羽衣甘蓝DFR基因氨基酸序列比对和分析 | 第25页 |
| 2.3 结果与分析 | 第25-30页 |
| 2.3.1 PCR产物检测 | 第25页 |
| 2.3.2 羽衣甘蓝DFR基因全长序列比对与分析 | 第25-28页 |
| 2.3.3 羽衣甘蓝DFR氨基酸序列比对和分析 | 第28-30页 |
| 2.4 小结与讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 羽衣甘蓝DFR基因沉默载体的构建 | 第32-43页 |
| 3.1 试验材料 | 第32-33页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第32页 |
| 3.1.2 试验试剂及配置 | 第32页 |
| 3.1.3 试验仪器 | 第32-33页 |
| 3.2 试验方法 | 第33-39页 |
| 3.2.1 羽衣甘蓝叶片总RNA的提取 | 第33页 |
| 3.2.2 反转录合成第一条链cDNA | 第33-34页 |
| 3.2.3 羽衣甘蓝DFR基因沉默片段的克隆 | 第34-36页 |
| 3.2.4 双酶切反应 | 第36-37页 |
| 3.2.5 构建沉默载体pTRV2-DFR | 第37-38页 |
| 3.2.6 转化大肠杆菌感受态细胞及阳性克隆鉴定 | 第38页 |
| 3.2.7 重组质粒导入农杆菌及阳性克隆鉴定 | 第38-39页 |
| 3.2.8 农杆菌菌液侵染浓度 | 第39页 |
| 3.3 结果与分析 | 第39-42页 |
| 3.3.1 PCR扩增 | 第39页 |
| 3.3.2 大肠杆菌菌落PCR检测 | 第39-40页 |
| 3.3.3 目的片段双酶切 | 第40页 |
| 3.3.4 沉默载体pTRV2双酶切 | 第40-41页 |
| 3.3.5 大肠杆菌菌落PCR检测 | 第41页 |
| 3.3.6 农杆菌菌落PCR检测 | 第41-42页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第42-43页 |
| 第四章 羽衣甘蓝DFR基因瞬时沉默植株表型鉴定 | 第43-46页 |
| 4.1 材料与方法 | 第43页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第43页 |
| 4.1.2 试验试剂 | 第43页 |
| 4.1.3 试验仪器 | 第43页 |
| 4.2 试验方法 | 第43页 |
| 4.3 结果与分析 | 第43-45页 |
| 4.3.1 农杆菌菌液浓度对侵染植株的影响 | 第43-44页 |
| 4.3.2 BoDFR沉默对羽衣甘蓝‘圆叶‘0835’’的影响 | 第44页 |
| 4.3.3 BoDFR沉默对羽衣甘蓝‘裂叶‘0819’’的影响 | 第44-45页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第45-46页 |
| 第五章 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
