| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-38页 |
| ·植物温敏雄性不育的研究利用 | 第15-23页 |
| ·温度敏感型不育系的类型及产生原因 | 第15-16页 |
| ·温度敏感不育系的形态及生理生化研究进展 | 第16-18页 |
| ·温敏雄性不育系育性转化的温度敏感时期研究进展 | 第18-19页 |
| ·光温敏雄性不育系的遗传特性研究 | 第19-20页 |
| ·温敏雄性不育基因的研究 | 第20-22页 |
| ·温度敏感雄性不育系调控机理研究 | 第22-23页 |
| ·酯酶同工酶与雄性不育的研究进展 | 第23-25页 |
| ·本论文涉及的实验技术研究进展 | 第25-35页 |
| ·功能产物的克隆方法（特异蛋白质寻找法）：即反向遗传学方法 | 第25-28页 |
| ·cDNA-AFLP 技术及其应用进展 | 第28-32页 |
| ·电子克隆技术 | 第32-35页 |
| ·本研究的目的意义及设想 | 第35-36页 |
| ·技术路线 | 第36-38页 |
| ·基因表达水平(EST 同工酶)研究 | 第36-37页 |
| ·转录水平(mRNA)研究 | 第37-38页 |
| 第二章 大白菜温敏雄性不育系育性转化相关β-酯酶同功酶分析 | 第38-50页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·实验材料 | 第38页 |
| ·材料处理及取样方法 | 第38页 |
| ·主要试剂 | 第38-39页 |
| ·主要仪器 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-41页 |
| ·AT 系花蕾在不同温度环境下长势及育性的表型观察 | 第39页 |
| ·β-EST 同功酶分析 | 第39页 |
| ·对特异β-EST 同功酶酶带回收方法的探索 | 第39-40页 |
| ·特异β-EST 同功酶酶带回收 | 第40页 |
| ·特异β-EST 同功酶粗酶干粉制备 | 第40页 |
| ·特异β-EST 同功酶纯化 | 第40页 |
| ·等电点及分子量测定 | 第40-41页 |
| ·目的肽的Q-TOF 质谱序列分析 | 第41页 |
| ·肽序比对分析 | 第41页 |
| ·结果与分析 | 第41-48页 |
| ·AT 系花蕾在不同温度环境下的长势及育性表型的观察 | 第41-42页 |
| ·A 系、B 系和AT 系的β-EST 同功酶单向活性凝胶分析 | 第42-43页 |
| ·目的β-EST 同功酶回收方法的确定 | 第43-44页 |
| ·特异β-酯酶同功酶酶带回收和粗酶干粉制备效果 | 第44页 |
| ·特异β-EST 同功酶多肽的分离纯化 | 第44-45页 |
| ·Q-TOF 质谱分析结果 | 第45-46页 |
| ·氨基酸序列比对分析 | 第46-47页 |
| ·p27SJ 蛋白二级结构及3 个短肽序列的可能功能分析 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| ·大白菜育性转化探讨 | 第48页 |
| ·自制IEF 凝胶系统分离目的β-EST 同功酶的优越性 | 第48页 |
| ·β-EST 同功酶粗酶粉的IEF 分离效果 | 第48页 |
| ·β-EST 短肽序列的推断及酯酶功能的预测 | 第48-50页 |
| 第三章 大白菜温敏雄性不育系育性转化相关基因的cDNA-AFLP 分析 | 第50-77页 |
| ·材料 | 第50-52页 |
| ·材料 | 第50页 |
| ·材料处理及取样方法 | 第50页 |
| ·主要试剂 | 第50-51页 |
| ·载体、菌株、接头和引物 | 第51页 |
| ·主要仪器 | 第51-52页 |
| ·RNA 提取过程中所用器皿及试剂的RNase 的处理 | 第52页 |
| ·实验方法 | 第52-57页 |
| ·RNA 的提取 | 第52页 |
| ·RNA 的纯化 | 第52-53页 |
| ·双链cDNA 的合成及精制 | 第53-54页 |
| ·cDNA-AFLP 差异显示 | 第54-56页 |
| ·差异片段的克隆、转化与测序 | 第56-57页 |
| ·差异片段的生物信息学分析 | 第57页 |
| ·结果与分析 | 第57-74页 |
| ·RNA 的质量分析 | 第57-58页 |
| ·cDNA 二链合成 | 第58页 |
| ·连接产物的预扩增结果检测 | 第58页 |
| ·选择性扩增产物检测 | 第58-59页 |
| ·不同时间所取样的基因差异片段显示 | 第59-65页 |
| ·部分差异片段的回收与再扩增 | 第65-66页 |
| ·阳性克隆鉴定 | 第66页 |
| ·差异条带的序列分析 | 第66-74页 |
| ·讨论 | 第74-77页 |
| ·取样方法 | 第74-75页 |
| ·cDNA-AFLP 技术的优缺点 | 第75页 |
| ·温敏不育系育性转化的复杂性 | 第75页 |
| ·大白菜育性转化的可能机理推测 | 第75-77页 |
| 第四章 相关EST 的电子克隆及RT-PCR验证 | 第77-93页 |
| ·材料、种子序列和引物 | 第77-78页 |
| ·供试材料 | 第77页 |
| ·种子序列 | 第77页 |
| ·质粒、菌株 | 第77页 |
| ·引物设计及合成 | 第77-78页 |
| ·数据库和软件 | 第78页 |
| ·实验方法 | 第78-79页 |
| ·种子序列的电子克隆 | 第78页 |
| ·基因的RT-PCR 扩增 | 第78页 |
| ·目的片段的回收、克隆转化及测序 | 第78-79页 |
| ·结果与分析 | 第79-90页 |
| ·电子克隆结果 | 第79页 |
| ·RT-PCR 实验验证 | 第79-83页 |
| ·阅读框分析 | 第83-86页 |
| ·序列同源性分析 | 第86-90页 |
| ·保守结构域分析 | 第90页 |
| ·讨论 | 第90-93页 |
| ·电子克隆方法 | 第90-91页 |
| ·木葡聚糖内糖基转移酶（XET） | 第91页 |
| ·酪氨酸磷酸酯酶样蛋白PAS | 第91页 |
| ·阅读框完整性判断 | 第91-92页 |
| ·cDNA 的生物学功能的鉴定 | 第92-93页 |
| 第五章 结论 | 第93-95页 |
| 参考文献 | 第95-110页 |
| 致谢 | 第110-112页 |
| 作者简介 | 第112页 |
