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HIV-1 gag基因在人精子基因组中的整合及在早期胚胎细胞中的复制与表达

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-12页
前言第12-15页
技术路线第15-16页
材料与方法第16-32页
 1. 材料第16-17页
   ·质粒第16页
   ·实验动物及标本第16页
   ·主要试剂第16-17页
   ·主要仪器第17页
   ·其它材料第17页
   ·主要溶液及培养基(配制见附录)第17页
 2. 方法第17-26页
   ·表达载体构建第17-22页
   ·目的 cDNA 的表达第22-23页
   ·样本收集和实验动物处理第23-24页
   ·精子样本基因组DNA的提取第24-25页
   ·精子细胞间期核制片第25页
   ·人精子染色体制片第25-26页
   ·荧光原位杂交探针的制备第26页
 3. 实验程序第26-32页
   ·PCR检测第26-27页
   ·RT-PCR检测第27-29页
   ·FISH检测第29-30页
   ·免疫荧光检测第30-32页
结果第32-42页
 1. 重组质粒构建与鉴定第32-35页
   ·重组质粒 pIRES2-EGFP-gag第32-33页
   ·质粒的酶切鉴定第33页
   ·质粒的PCR鉴定第33-34页
   ·重组质粒目的基因的表达检测第34-35页
 2. 精子基因组中gag基因的整合与转录第35-37页
   ·精子基因组DNA的PCR结果第35页
   ·人精子细胞核中gag基因的整合第35-36页
   ·人精子染色体上gag基因的整合第36-37页
   ·精子细胞中gag基因的转录第37页
 3. 胚胎细胞中gag基因的整合第37-39页
   ·受精卵FISH结果第37-38页
   ·2 -细胞胚FISH结果第38-39页
 4. 胚胎细胞中gag基因的转录第39页
 5. 精子和胚胎细胞中 gag p24 蛋白的表达第39-42页
   ·人精子细胞免疫荧光检测结果第39-40页
   ·2-细胞胚免疫荧光检测结果第40-42页
讨论第42-46页
全文小结第46-47页
参考文献第47-51页
附录1:主要混合液及培养基第51-55页
附录2:测序结果第55-57页
致谢第57-58页
综述第58-65页
 参考文献第63-65页
个人简历第65-66页

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