| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-14页 |
| 第一部分 肝细胞非酒精性脂肪变模型的制备及细胞损伤情况的研究 | 第14-27页 |
| ·材料 | 第15-16页 |
| ·实验用肝细胞 | 第15页 |
| ·主要试剂 | 第15页 |
| ·主要仪器 | 第15-16页 |
| ·主要试剂配制 | 第16页 |
| ·方法 | 第16-19页 |
| ·肝细胞培养 | 第16页 |
| ·肝细胞生长曲线的绘制 | 第16-17页 |
| ·细胞活力的检测和油红0染色 | 第17-18页 |
| ·染色前细胞的处理 | 第17页 |
| ·细胞活力的检测-台盼蓝排斥实验 | 第17-18页 |
| ·细胞油红0染色 | 第18页 |
| ·细胞内TG、ATP及培养液中ALT、AST检测 | 第18-19页 |
| ·细胞内TG及ATP含量的检测 | 第18-19页 |
| ·培养液中AST及ALT含量的检测 | 第19页 |
| ·结果 | 第19-24页 |
| ·确定肝细胞对数生长期 | 第19-20页 |
| ·台盼蓝染色计数细胞活力 | 第20-21页 |
| ·细胞染色结果 | 第21-23页 |
| ·肉眼观察 | 第21页 |
| ·染色后观察 | 第21-23页 |
| ·生化指标的检测 | 第23-24页 |
| ·细胞内TG的检测结果 | 第23页 |
| ·细胞ALT、AST检测结果 | 第23-24页 |
| ·讨论 | 第24-27页 |
| 第二部分 UCP2在不同程度脂肪变的肝细胞中表达的研究 | 第27-46页 |
| ·材料与方法 | 第29-31页 |
| ·研究对象 | 第29页 |
| ·主要试剂 | 第29-30页 |
| ·主要试剂的配制 | 第30-31页 |
| ·主要仪器 | 第31页 |
| ·Western-blot检测细胞内UCP2的表达情况 | 第31-33页 |
| ·细胞培养及肝细胞脂肪变模型的建立 | 第31页 |
| ·总蛋白的提取和定量 | 第31-32页 |
| ·Western-blot的步骤:SDS—PAGE电泳 | 第32页 |
| ·转膜 | 第32-33页 |
| ·抗体孵育 | 第33页 |
| ·化学发光,显影,定影 | 第33页 |
| ·RNA的提取和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR) | 第33-36页 |
| ·提取总RNA | 第33-34页 |
| ·RNA纯度的测定 | 第34页 |
| ·RT-PCR | 第34-36页 |
| ·c-DNA的合成 | 第34-35页 |
| ·PCR反应 | 第35-36页 |
| ·统计学处理 | 第36页 |
| ·结果 | 第36-39页 |
| ·正常肝细胞及脂肪变肝细胞内UCP2蛋白表达情况 | 第36-37页 |
| ·正常肝细胞及脂肪变肝细胞UCP2mRNA表达情况 | 第37-38页 |
| ·肝细胞及肝癌细胞内UCP2mRNA表达情况比较 | 第38-39页 |
| ·肝细胞内ATP、TG含量与UCP2表达情况的相关性分析 | 第39页 |
| ·讨论 | 第39-44页 |
| ·NAFLD模型的建立 | 第39-40页 |
| ·正常细胞及脂肪变的肝细胞内UCP2表达的意义 | 第40-43页 |
| ·UCP2核酸和蛋白水平表达的不一致性 | 第43-44页 |
| ·不同细胞内UCP2表达的意义 | 第44页 |
| 总结 | 第44-46页 |
| 第三部分 综述:UCP2与非酒精性脂肪性肝病关系研究进展 | 第46-52页 |
| ·UCP2的作用 | 第46-50页 |
| ·UCP2的概述 | 第46-47页 |
| ·UCP2与脂肪酸的相互作用 | 第47-48页 |
| ·UCP2与反应性氧簇的生成 | 第48-49页 |
| ·UCP2与胰岛素的分泌 | 第49-50页 |
| ·UCP2与细胞凋亡 | 第50页 |
| ·UCP2与NAFLD的进展 | 第50-51页 |
| ·UCP2与脂肪性肝炎 | 第50-51页 |
| ·NAFLD时UCP2表达的细胞特异性 | 第51页 |
| ·结语 | 第51-52页 |
| 主要结论和展望 | 第52-53页 |
| ·主要结论 | 第52页 |
| ·展望 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 中英文对照索引 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 攻读硕士学位期间发表的文章 | 第60页 |
