| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 引言 | 第9-17页 |
| ·ADAM（A DISINTEGRIN AND METALLO-PROTEINASE）蛋白家族 | 第9-11页 |
| ·受精素（FERTILIN，又称PH-30） | 第11-17页 |
| ·受精素的发展历程 | 第11页 |
| ·受精素基因 | 第11-12页 |
| ·受精素的蛋白质结构 | 第12-14页 |
| ·受精素在精子表面的分布位置 | 第14页 |
| ·受精素在精卵相互结合与融合中的作用 | 第14-16页 |
| ·受精素β是免疫避孕疫苗的候选靶分子 | 第16-17页 |
| 2 实验一 绵羊受精素Β基因去整合素结构域的克隆与原核表达 | 第17-38页 |
| ·材料 | 第17-20页 |
| ·主要仪器 | 第17-18页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·载体 | 第18页 |
| ·菌株 | 第18页 |
| ·质粒 | 第18页 |
| ·常用试剂的配方 | 第18-20页 |
| ·方法 | 第20-28页 |
| ·构建策略 | 第20-22页 |
| ·PCR 引物设计与合成 | 第22-23页 |
| ·PCR 产物的回收 | 第23页 |
| ·重组克隆载体的构建 | 第23-26页 |
| ·绵羊受精素β去整合素结构域原核融合表达载体的构建 | 第26-27页 |
| ·重组菌的诱导表达 | 第27-28页 |
| ·结果 | 第28-36页 |
| ·绵羊受精素β去整合素结构域cDNA 的PCR 扩增结果 | 第28-29页 |
| ·重组克隆载体的鉴定 | 第29-32页 |
| ·重组表达载体的鉴定 | 第32-34页 |
| ·绵羊受精素β去整合素结构域在大肠杆菌中的表达 | 第34-36页 |
| ·讨论 | 第36-38页 |
| ·原核表达载体的选择 | 第37页 |
| ·重组质粒pGEX-4T-1-sf279 的构建 | 第37页 |
| ·GST-sf279 融合蛋白的诱导表达 | 第37-38页 |
| 3 实验二 小鼠GST-SF279 多克隆抗体的制备 | 第38-46页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·实验动物 | 第38页 |
| ·主要试剂 | 第38页 |
| ·实验仪器 | 第38页 |
| ·常用试剂配方 | 第38-39页 |
| ·方法 | 第39-43页 |
| ·GST- sf279 融合蛋白的亲和纯化 | 第39-40页 |
| ·GST-sf279 融合蛋白的浓缩 | 第40-41页 |
| ·GST- sf279 融合蛋白定量 | 第41页 |
| ·小鼠GST- sf279 多克隆抗体的制备 | 第41-42页 |
| ·融合蛋白GST- sf279 的 Western-Blot 鉴定 | 第42-43页 |
| ·结果 | 第43-45页 |
| ·SDS-PAGE 检测亲和柱纯化的融合蛋白GST- sf279 | 第43页 |
| ·纯化后的GST-sf279 的浓度测定 | 第43-44页 |
| ·抗GST-sf279 多克隆抗体的特异性检测 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-46页 |
| 4 结论 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-51页 |
| 附录 | 第51-52页 |
| 作者简介 | 第52页 |
