中文摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-12页 |
中英文对照表 | 第12-13页 |
目录 | 第13-18页 |
第一章 绪论 | 第18-39页 |
·引言 | 第18页 |
·高分子药物递送系统 | 第18页 |
·高分子药物载体 | 第18-20页 |
·当前肿瘤的化学治疗存在的问题 | 第20-21页 |
·基因治疗 | 第21-29页 |
·基因治疗概念 | 第21-23页 |
·基因治疗载体 | 第23-29页 |
·聚乙烯亚胺 | 第24-26页 |
·多聚赖氨酸 | 第26-27页 |
·嵌段共聚物 | 第27-28页 |
·环糊精 | 第28-29页 |
·药物基因联合治疗 | 第29-30页 |
·本课题的提出及创新点 | 第30-33页 |
·参考文献 | 第33-39页 |
第二章 FPC的合成及对神经胶质瘤的抗肿瘤活性的研究 | 第39-81页 |
·前言 | 第39-40页 |
·材料与仪器 | 第40-43页 |
·材料和试剂 | 第40-41页 |
·细胞、动物及工作溶液 | 第41-42页 |
·仪器 | 第42-43页 |
·实验方法 | 第43-53页 |
·阳离子聚合物PC的合成 | 第43页 |
·FPC的合成 | 第43-44页 |
·质子核磁共振波谱法(~1H-NMR) | 第44页 |
·紫外分光光度检测(UV) | 第44页 |
·FPC/DNA复合物的制备 | 第44-45页 |
·粒径和电位测定 | 第45页 |
·扫描电子显微镜观察 | 第45页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第45页 |
·质粒的提取 | 第45-46页 |
·FPC体外细胞毒性实验 | 第46页 |
·H&E细胞染色实验 | 第46-47页 |
·细胞划痕、迁移和侵袭实验 | 第47-49页 |
·C6细胞的体外划痕实验 | 第47-48页 |
·C6细胞的体外迁移实验 | 第48页 |
·C6细胞的体外侵袭实验 | 第48-49页 |
·FCM的细胞凋亡和细胞周期实验 | 第49页 |
·Annexin-Ⅴ染色检测细胞凋亡 | 第49页 |
·PI染色检测细胞周期 | 第49页 |
·FPC的细胞摄取研究 | 第49-50页 |
·FPC体外细胞转染 | 第50-51页 |
·聚合物与质粒DNA的复合物对细胞转基因试验 | 第50页 |
·荧光素酶的测定(使用荧光素酶检测试剂盒) | 第50-51页 |
·细胞裂解液的总蛋白测定 | 第51页 |
·共聚物/DNA复合物转染的最佳N/P比值的确定 | 第51页 |
·细胞转染pEGFP质粒后的绿色荧光的观察 | 第51页 |
·FPC瘤内基因转染实验 | 第51-52页 |
·数据的统计学处理 | 第52-53页 |
·结果与讨论 | 第53-77页 |
·PC和FPC的合成 | 第53-54页 |
·质子核磁共振图谱分析 | 第54-55页 |
·紫外分光光度检测 | 第55-56页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第56-57页 |
·粒径、电位表征及透射电镜观察 | 第57-59页 |
·MTT细胞毒性实验 | 第59-60页 |
·FPC的降解实验 | 第60-61页 |
·H&E细胞染色实验 | 第61-63页 |
·细胞划痕实验 | 第63-64页 |
·细胞迁移、侵袭实验 | 第64-66页 |
·细胞周期、凋亡实验 | 第66-69页 |
·细胞摄取实验 | 第69-71页 |
·体外细胞转染实验 | 第71-76页 |
·FPC小鼠瘤内基因转染 | 第76-77页 |
·小结 | 第77-78页 |
·参考文献 | 第78-81页 |
第三章 PC-Dox的合成及协同基因抗肿瘤活性的研究 | 第81-123页 |
·前言 | 第81-82页 |
·材料与仪器 | 第82-87页 |
·材料和试剂 | 第82-83页 |
·细胞、动物及工作溶液 | 第83-86页 |
·仪器 | 第86-87页 |
·实验方法 | 第87-97页 |
·阳离子聚合物PC的合成 | 第87-88页 |
·PC-Dox的合成 | 第88页 |
·质子核磁共振波谱法(~1H-NMR) | 第88页 |
·紫外分光光度检测(UV) | 第88页 |
·PC-Dox/DNA复合物的制备 | 第88-89页 |
·粒径和电位测定 | 第89页 |
·透射电子显微镜观察 | 第89页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第89页 |
·质粒的提取 | 第89-90页 |
·PC-Dox体外细胞毒性实验 | 第90页 |
·PC-Dox的细胞摄取研究 | 第90-91页 |
·PC-Dox体外细胞转染 | 第91-92页 |
·聚合物与质粒DNA的复合物对细胞转基因试验 | 第91页 |
·荧光素酶的测定(使用荧光素酶检测试剂盒) | 第91页 |
·细胞裂解液的总蛋白测定 | 第91-92页 |
·共聚物/DNA复合物转染的最佳N/P比值的确定 | 第92页 |
·细胞转染pEGFP质粒后的绿色荧光的观察 | 第92页 |
·荷瘤模型的建立 | 第92页 |
·PC-Dox体内滞留实验 | 第92-93页 |
·RT-PCR法测定p53 mRNA蛋白水平 | 第93-94页 |
·细胞总RNA的提取 | 第93页 |
·总RNA逆转录(RT)成cDNA | 第93-94页 |
·PCR扩增 | 第94页 |
·电泳分析 | 第94页 |
·Western blot免疫印迹测定细胞蛋白水平 | 第94-95页 |
·PC-Dox体内抑瘤实验 | 第95页 |
·心肌组织病理学检查 | 第95-96页 |
·数据的统计学处理 | 第96-97页 |
·结果与讨论 | 第97-118页 |
·PC-Dox的合成 | 第97-98页 |
·质子核磁共振波谱法(~1H-NMR) | 第98-99页 |
·紫外分光光度法(UV) | 第99-100页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第100-101页 |
·粒径和电位测定 | 第101-102页 |
·PC-Dox体外细胞毒性实验 | 第102-104页 |
·PC-Dox的细胞摄取实验 | 第104-106页 |
·PC-Dox的瘤内滞留实验 | 第106-108页 |
·PC-Dox体外细胞转染实验 | 第108-110页 |
·RT-PCR测定p53蛋白变化 | 第110-112页 |
·Western blot测定p27,p21,p53,bcl-2蛋白变化 | 第112-114页 |
·体内抑瘤实验 | 第114-117页 |
·裸鼠生存期比较 | 第114-115页 |
·裸鼠的鼠重比较 | 第115-116页 |
·裸鼠肿瘤大小比较 | 第116-117页 |
·心肌组织切片检查 | 第117-118页 |
·小结 | 第118-119页 |
·参考文献 | 第119-123页 |
全文结论、创新点及未来研究方向 | 第123-126页 |
综述 | 第126-136页 |
参考文献 | 第132-136页 |
致谢 | 第136页 |