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阳离子聚合物PC偶联小分子药物协同基因的抗肿瘤活性研究

中文摘要第1-8页
Abstract第8-12页
中英文对照表第12-13页
目录第13-18页
第一章 绪论第18-39页
   ·引言第18页
   ·高分子药物递送系统第18页
   ·高分子药物载体第18-20页
   ·当前肿瘤的化学治疗存在的问题第20-21页
   ·基因治疗第21-29页
     ·基因治疗概念第21-23页
     ·基因治疗载体第23-29页
       ·聚乙烯亚胺第24-26页
       ·多聚赖氨酸第26-27页
       ·嵌段共聚物第27-28页
       ·环糊精第28-29页
   ·药物基因联合治疗第29-30页
   ·本课题的提出及创新点第30-33页
   ·参考文献第33-39页
第二章 FPC的合成及对神经胶质瘤的抗肿瘤活性的研究第39-81页
   ·前言第39-40页
   ·材料与仪器第40-43页
     ·材料和试剂第40-41页
     ·细胞、动物及工作溶液第41-42页
     ·仪器第42-43页
   ·实验方法第43-53页
     ·阳离子聚合物PC的合成第43页
     ·FPC的合成第43-44页
     ·质子核磁共振波谱法(~1H-NMR)第44页
     ·紫外分光光度检测(UV)第44页
     ·FPC/DNA复合物的制备第44-45页
     ·粒径和电位测定第45页
     ·扫描电子显微镜观察第45页
     ·琼脂糖凝胶电泳第45页
     ·质粒的提取第45-46页
     ·FPC体外细胞毒性实验第46页
     ·H&E细胞染色实验第46-47页
     ·细胞划痕、迁移和侵袭实验第47-49页
       ·C6细胞的体外划痕实验第47-48页
       ·C6细胞的体外迁移实验第48页
       ·C6细胞的体外侵袭实验第48-49页
     ·FCM的细胞凋亡和细胞周期实验第49页
       ·Annexin-Ⅴ染色检测细胞凋亡第49页
       ·PI染色检测细胞周期第49页
     ·FPC的细胞摄取研究第49-50页
     ·FPC体外细胞转染第50-51页
       ·聚合物与质粒DNA的复合物对细胞转基因试验第50页
       ·荧光素酶的测定(使用荧光素酶检测试剂盒)第50-51页
       ·细胞裂解液的总蛋白测定第51页
       ·共聚物/DNA复合物转染的最佳N/P比值的确定第51页
       ·细胞转染pEGFP质粒后的绿色荧光的观察第51页
     ·FPC瘤内基因转染实验第51-52页
     ·数据的统计学处理第52-53页
   ·结果与讨论第53-77页
     ·PC和FPC的合成第53-54页
     ·质子核磁共振图谱分析第54-55页
     ·紫外分光光度检测第55-56页
     ·琼脂糖凝胶电泳第56-57页
     ·粒径、电位表征及透射电镜观察第57-59页
     ·MTT细胞毒性实验第59-60页
     ·FPC的降解实验第60-61页
     ·H&E细胞染色实验第61-63页
     ·细胞划痕实验第63-64页
     ·细胞迁移、侵袭实验第64-66页
     ·细胞周期、凋亡实验第66-69页
     ·细胞摄取实验第69-71页
     ·体外细胞转染实验第71-76页
     ·FPC小鼠瘤内基因转染第76-77页
   ·小结第77-78页
   ·参考文献第78-81页
第三章 PC-Dox的合成及协同基因抗肿瘤活性的研究第81-123页
   ·前言第81-82页
   ·材料与仪器第82-87页
     ·材料和试剂第82-83页
     ·细胞、动物及工作溶液第83-86页
     ·仪器第86-87页
   ·实验方法第87-97页
     ·阳离子聚合物PC的合成第87-88页
     ·PC-Dox的合成第88页
     ·质子核磁共振波谱法(~1H-NMR)第88页
     ·紫外分光光度检测(UV)第88页
     ·PC-Dox/DNA复合物的制备第88-89页
     ·粒径和电位测定第89页
     ·透射电子显微镜观察第89页
     ·琼脂糖凝胶电泳第89页
     ·质粒的提取第89-90页
     ·PC-Dox体外细胞毒性实验第90页
     ·PC-Dox的细胞摄取研究第90-91页
     ·PC-Dox体外细胞转染第91-92页
       ·聚合物与质粒DNA的复合物对细胞转基因试验第91页
       ·荧光素酶的测定(使用荧光素酶检测试剂盒)第91页
       ·细胞裂解液的总蛋白测定第91-92页
       ·共聚物/DNA复合物转染的最佳N/P比值的确定第92页
       ·细胞转染pEGFP质粒后的绿色荧光的观察第92页
     ·荷瘤模型的建立第92页
     ·PC-Dox体内滞留实验第92-93页
     ·RT-PCR法测定p53 mRNA蛋白水平第93-94页
       ·细胞总RNA的提取第93页
       ·总RNA逆转录(RT)成cDNA第93-94页
       ·PCR扩增第94页
       ·电泳分析第94页
     ·Western blot免疫印迹测定细胞蛋白水平第94-95页
     ·PC-Dox体内抑瘤实验第95页
     ·心肌组织病理学检查第95-96页
     ·数据的统计学处理第96-97页
   ·结果与讨论第97-118页
     ·PC-Dox的合成第97-98页
     ·质子核磁共振波谱法(~1H-NMR)第98-99页
     ·紫外分光光度法(UV)第99-100页
     ·琼脂糖凝胶电泳第100-101页
     ·粒径和电位测定第101-102页
     ·PC-Dox体外细胞毒性实验第102-104页
     ·PC-Dox的细胞摄取实验第104-106页
     ·PC-Dox的瘤内滞留实验第106-108页
     ·PC-Dox体外细胞转染实验第108-110页
     ·RT-PCR测定p53蛋白变化第110-112页
     ·Western blot测定p27,p21,p53,bcl-2蛋白变化第112-114页
     ·体内抑瘤实验第114-117页
       ·裸鼠生存期比较第114-115页
       ·裸鼠的鼠重比较第115-116页
       ·裸鼠肿瘤大小比较第116-117页
     ·心肌组织切片检查第117-118页
   ·小结第118-119页
   ·参考文献第119-123页
全文结论、创新点及未来研究方向第123-126页
综述第126-136页
 参考文献第132-136页
致谢第136页

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