| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 缩略词表 | 第12-14页 |
| 第一章 文章综述 | 第14-26页 |
| 1 番木瓜果实成熟研究进展 | 第14-16页 |
| ·番木瓜的经济价值 | 第14页 |
| ·番木瓜果实成熟生理研究进展 | 第14-15页 |
| ·果实色泽 | 第14页 |
| ·碳水化合物的变化 | 第14-15页 |
| ·营养成分的变化 | 第15页 |
| ·细胞壁结构及组分的变化 | 第15页 |
| ·番木瓜果实成熟分子生物学研究 | 第15-16页 |
| ·采后呼吸强度与乙烯的变化关系 | 第15-16页 |
| ·果实乙烯代谢调控机理 | 第16页 |
| 2 果实成熟软化相关基因研究 | 第16-22页 |
| ·乙烯相关基因的研究 | 第16-17页 |
| ·果实软化相关基因的研究 | 第17-20页 |
| ·多聚半乳糖醛酸酶（D-Galacturonanases,PG） | 第17-18页 |
| ·纤维素酶（Cellulases,CX） | 第18页 |
| ·果胶甲酯酶（Pectin methylesterase,PME） | 第18-19页 |
| ·β-半乳糖苷酶（β-Galactosidase, β-Gal） | 第19-20页 |
| ·木葡聚糖内糖基转移酶（XET） | 第20页 |
| ·其他相关基因的克隆及研究 | 第20-22页 |
| ·WD-repeat 蛋白研究进展 | 第20-21页 |
| ·锌指蛋白研究进展 | 第21-22页 |
| 3 RACE 技术的研究进展及其应用 | 第22-23页 |
| ·RACE 技术原理 | 第22页 |
| ·RACE 技术的优点及局限性 | 第22-23页 |
| ·RACE 技术在植物基因上的研究现状 | 第23页 |
| 4 半定量RT-PCR 的研究及应用 | 第23-24页 |
| ·半定量RT-PCR 技术原理 | 第23页 |
| ·半定量RT-PCR 技术的优点及应用 | 第23-24页 |
| 5 本研究的背景及意义 | 第24-26页 |
| 第二章 番木瓜果实WD-repeat 蛋白基因的克隆与分析 | 第26-44页 |
| 1 实验材料 | 第26-27页 |
| ·植物材料 | 第26页 |
| ·菌株和载体 | 第26页 |
| ·试剂 | 第26页 |
| ·主要仪器和设备 | 第26页 |
| ·实验用具与耗材 | 第26-27页 |
| ·引物合成与测序 | 第27页 |
| 2 实验方法 | 第27-35页 |
| ·番木瓜果肉RNA 的提取 | 第27-28页 |
| ·RNA 提取的方法 | 第27-28页 |
| ·总RNA 完整性、含量和纯度检测 | 第28页 |
| ·cDNA 合成 | 第28-29页 |
| ·第一链cDNA 合成 | 第28-29页 |
| ·第一链cDNA 纯化 | 第29页 |
| ·WD-repeat 蛋白基因的克隆 | 第29-35页 |
| ·引物设计 | 第29页 |
| ·WD-repeat 基因的3′RACE 扩增 | 第29-31页 |
| ·PCR 产物回收纯化 | 第31页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第31-32页 |
| ·连接和转化 | 第32页 |
| ·鉴定 | 第32-33页 |
| ·WD-repeat 蛋白基因的5′RACE 扩增 | 第33-34页 |
| ·WD-repeat 蛋白基因开放阅读框的扩增 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-39页 |
| ·番木瓜果肉RNA 的提取及纯度分析 | 第35页 |
| ·WD-repeat 蛋白基因的3′RACE 及序列分析 | 第35-37页 |
| ·WD-repeat 蛋白基因的5′RACE 及序列分析 | 第37-38页 |
| ·WD-repeat 蛋白基因开放阅读框（ORF）扩增 | 第38-39页 |
| 4 生物信息学分析 | 第39-42页 |
| ·WD-repeat 蛋白基因cDNA 序列及其编码产物的同源性分析 | 第39页 |
| ·WD-repeat 蛋白基因氨基酸编码产物同源性分析 | 第39-40页 |
| ·WD-repeat 蛋白基因的蛋白序列分析 | 第40-42页 |
| 5 讨论 | 第42-44页 |
| ·番木瓜果肉RNA 提取 | 第42页 |
| ·RACE 扩增 | 第42-43页 |
| ·WD-repeat 蛋白基因的克隆及分析 | 第43-44页 |
| 第三章 番木瓜果实锌指蛋白基因的克隆与分析 | 第44-58页 |
| 1 实验材料 | 第44页 |
| 2 实验方法 | 第44-48页 |
| ·番木瓜果肉RNA 的提取 | 第44页 |
| ·总RNA 完整性、含量和纯度检测 | 第44页 |
| ·cDNA 合成 | 第44页 |
| ·锌指蛋白基因的克隆 | 第44-48页 |
| ·引物设计 | 第44-45页 |
| ·锌指蛋白基因的3′RACE 扩增 | 第45-46页 |
| ·锌指蛋白基因的5′RACE 扩增 | 第46-47页 |
| ·锌指蛋白基因开放阅读框的扩增 | 第47-48页 |
| 3 结果与分析 | 第48-52页 |
| ·锌指蛋白基因的3′RACE 及序列分析 | 第48-50页 |
| ·锌指蛋白基因的5′RACE 及序列分析 | 第50-51页 |
| ·锌指蛋白基因开放阅读框（ORF）扩增 | 第51-52页 |
| 4 生物信息学分析 | 第52-55页 |
| ·锌指蛋白基因cDNA 序列及其编码产物的同源性分析 | 第52-53页 |
| ·锌指蛋白基因氨基酸编码产物同源性分析 | 第53-55页 |
| 5 讨论 | 第55-58页 |
| 第四章 半定量RT-PCR 分析 | 第58-68页 |
| 1 实验材料 | 第58页 |
| ·植物材料 | 第58页 |
| ·试剂药品 | 第58页 |
| 2 实验方法 | 第58-62页 |
| ·番木瓜果实四个不同成熟期果肉RNA 的提取 | 第58-59页 |
| ·总RNA 完整性、含量和纯度检测 | 第59页 |
| ·cDNA 合成 | 第59页 |
| ·PCR 引物设计 | 第59-60页 |
| ·PCR 扩增 | 第60-62页 |
| ·Actin 基因的PCR 扩增 | 第60-61页 |
| ·WD-repeat 蛋白基因片段的PCR 扩增 | 第61页 |
| ·锌指蛋白基因片段的PCR 扩增 | 第61-62页 |
| 3 结果与分析 | 第62-66页 |
| ·RNA 的提取 | 第62页 |
| ·Actin 基因 | 第62-64页 |
| ·模板量的确定 | 第62-63页 |
| ·Actin 基因表达量一致时模板量的确定 | 第63-64页 |
| ·WD-repeat 蛋白基因的表达量分析 | 第64-65页 |
| ·锌指蛋白基因的表达量分析 | 第65-66页 |
| 4 讨论 | 第66-68页 |
| ·RNA 的提取 | 第66页 |
| ·半定量RT-PCR | 第66页 |
| ·WD-repeat 蛋白基因和锌指蛋白基因表达量分析 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-78页 |
| 附录1 四个不同成熟度番木瓜果实照片 | 第78-79页 |
| 附录2 番木瓜WD-repeat 蛋白基因核苷酸及氨基酸序列 | 第79-80页 |
| 附录3 番木瓜WD-repeat 蛋白基因氨基酸序列同源性比对分析 | 第80-81页 |
| 附录4 番木瓜锌指蛋白基因核苷酸及氨基酸序列 | 第81-82页 |
| 附录5 六种高等植物锌指蛋白基因氨基酸序列同源性比对分析 | 第82-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
