| 中文摘要 | 第1-4页 |
| 英文摘要 | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-10页 |
| 符号说明 | 第10-13页 |
| 综述 | 第13-30页 |
| 前言 | 第30-35页 |
| 第一部分 SAG2基因片段的克隆及重组质粒的鉴定 | 第35-56页 |
| 材料与方法 | 第35-47页 |
| 1 材料 | 第35-39页 |
| ·生物材料及来源 | 第35页 |
| ·生化试剂及部分配制方法 | 第35-38页 |
| ·仪器设备及生产厂家 | 第38页 |
| ·试剂盒 | 第38-39页 |
| 2 方法 | 第39-47页 |
| ·弓形虫速殖子的提取以及纯化 | 第39页 |
| ·弓形虫总RNA的提取 | 第39-40页 |
| ·弓形虫cDNA的合成 | 第40页 |
| ·引物设计与合成 | 第40-41页 |
| ·PCR扩增反应 | 第41页 |
| ·PCR产物的琼脂糖电泳 | 第41页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第41-42页 |
| ·pGEX-4T-1载体质粒DNA的提取 | 第42-43页 |
| ·PCR纯化产物与载体质粒DNA的双酶切及纯化回收 | 第43-44页 |
| ·重组质粒的构建 | 第44页 |
| ·pGEX-4T-1/SAG2重组质粒的转化 | 第44-46页 |
| ·pGEX-4T-1/SAG2重组质粒的PCR筛 | 第46页 |
| ·pGEX-4T-1/SAG2重组质粒的鉴定 | 第46页 |
| ·pGEX-4T-1/SAG2重组质粒的保种 | 第46-47页 |
| 结果 | 第47-53页 |
| 1. 弓形虫速殖子的纯化 | 第47页 |
| 2. 弓形虫总RNA的分析和定量 | 第47页 |
| 3. PCR产物的琼脂糖电泳 | 第47-48页 |
| 4. PCR产物的纯化 | 第48页 |
| 5. pGEX-4T-1质粒载体DNA的提取 | 第48-49页 |
| 6. PCR纯化产物与质粒载体DNA的双酶切及纯化回收 | 第49-50页 |
| 7. 重组质粒的构建 | 第50页 |
| 8. pGEX-4T-1/SAG2重组质粒的PCR筛选 | 第50-51页 |
| 9. pGEX-4T-1/gG_1重组质粒的双酶切鉴定 | 第51-52页 |
| 10. pGEX-4T-1/gG_1重组质粒的DNA测序鉴定 | 第52-53页 |
| 讨论 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-56页 |
| 第二部分 GST/SAG2融合蛋白的表达、复性及纯化 | 第56-70页 |
| 材料与方法 | 第56-64页 |
| 1 材料 | 第56-60页 |
| ·生物材料及来源 | 第56页 |
| ·生化试剂及部分配制方法 | 第56-60页 |
| ·仪器设备及生产厂家 | 第60页 |
| ·试剂盒 | 第60页 |
| 2 方法 | 第60-64页 |
| ·pGEX-4T-1/SAG2重组质粒转化入表达宿主菌 | 第60页 |
| ·pGEX-4T-1/SAG2重组质粒的诱导表达 | 第60-61页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE电泳检测 | 第61-62页 |
| ·表达产物的定位 | 第62页 |
| ·表达产物的洗涤 | 第62-63页 |
| ·表达产物的复性以及超滤浓缩 | 第63页 |
| ·表达产物的纯化 | 第63-64页 |
| 结果 | 第64-66页 |
| 1. 表达产物的SDS-PAGE电泳检测 | 第64-65页 |
| 2. 表达产物的纯化 | 第65-66页 |
| 讨论 | 第66-69页 |
| 参考文献 | 第69-70页 |
| 第三部分 SAG2重组蛋白的初步鉴定 | 第70-82页 |
| 材料与方法 | 第70-75页 |
| 1 材料 | 第70-71页 |
| ·生物材料及来源 | 第70页 |
| ·生化试剂及部分配制方法 | 第70-71页 |
| ·仪器设备及生产厂家 | 第71页 |
| 2 方法 | 第71-75页 |
| ·SAG2重组抗原包涵体的ELISA检测 | 第71-72页 |
| ·GST/SAG2融合蛋白的ELISA检测 | 第72-73页 |
| ·金标捕获法检测SAG2重组抗原 | 第73-74页 |
| ·金标双夹心抗原法检测SAG2重组抗 | 第74页 |
| ·弓形虫全抗原以及重组抗原检测人特异性IgG水平 | 第74-75页 |
| 结果 | 第75-79页 |
| 1. GST-SAG2包涵体蛋白的ELISA检测 | 第75-76页 |
| 2. SAG2重组蛋白的ELISA检测结果 | 第76-77页 |
| 3. 金标捕获法鉴定SAG2融合蛋白 | 第77页 |
| 4. 金标双抗原夹心法鉴定SAG2融合蛋白 | 第77-78页 |
| 5. 弓形虫全虫抗原或重组抗原检测人血清中特异性IgG水平 | 第78-79页 |
| 讨论 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
