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活性氧在蓝萼甲素诱导的HL-60细胞凋亡中的作用研究

中文摘要第1-6页
Abstract第6-12页
第一章 引言第12-19页
   ·香茶菜属植物抗癌活性及蓝萼香茶菜研究现状第12-14页
     ·香茶菜属植物抗癌活性研究进展第12页
     ·蓝萼香茶菜概况第12-13页
     ·蓝萼香茶菜药理活性概况第13-14页
   ·细胞死亡方式第14-16页
     ·细胞坏死(Necrosis)第14页
     ·细胞凋亡(Apoptosis)第14-15页
     ·自噬(Autophage)第15页
     ·自噬、凋亡与坏死三者联系第15-16页
   ·活性氧与细胞凋亡第16-18页
     ·活性氧(reactive oxygen species,ROS)种类第16-17页
     ·活性氧的产生和抗氧化系统第17页
     ·活性氧对DNA、脂质、蛋白质及糖类的损伤第17-18页
     ·ROS 与凋亡第18页
   ·本课题研究的主要内容第18-19页
第二章 蓝萼甲素和蓝萼丙素细胞毒活性比较及构效关系分析第19-28页
   ·引言第19页
   ·实验仪器与试剂第19-21页
     ·药物及试剂的配制第19-20页
     ·主要仪器第20页
     ·细胞株第20-21页
   ·实验方法第21-22页
     ·GLA 和GLC 纯度的评价第21页
     ·细胞的复苏与培养第21页
     ·MTT 法检测抑瘤作用第21页
     ·GLA 或者GLC 与Bcl-2 蛋白的分子对接第21-22页
   ·实验结果与讨论第22-26页
     ·GLA 和GLC 纯度评价第22-23页
     ·GLA 和GLC 细胞毒性的比较第23-26页
     ·GLA 或者GLC 与Bcl-2 蛋白的分子对接第26页
   ·本章小结第26-28页
第三章 蓝萼甲素诱导HL-60 细胞凋亡的研究第28-37页
   ·引言第28页
   ·实验仪器与试剂第28-29页
     ·主要试剂及其溶液配制第28-29页
     ·主要仪器第29页
   ·实验方法第29-31页
     ·MTT 法检测HL-60 细胞存活率第29页
     ·细胞形态观察第29页
     ·AO/EB 双染第29-30页
     ·DAPI 染色第30页
     ·Annexin V-FITC/PI 双染第30页
     ·TUNEL 检测第30-31页
     ·DNA Ladder 检测第31页
     ·流式细胞仪检测细胞的Sub-G1 峰第31页
     ·统计分析第31页
   ·实验结果与讨论第31-36页
     ·GLA 对HL-60 的细胞毒作用第31-32页
     ·GLA 诱导HL-60 细胞凋亡第32-36页
     ·GLA 诱导白血病K562 细胞凋亡第36页
   ·本章小结第36-37页
第四章 蓝萼甲素诱导HL-60 细胞凋亡信号转导通路的研究第37-58页
   ·引言第37-38页
   ·实验仪器与试剂第38-40页
     ·主要试剂及其溶液配制第38-40页
     ·主要仪器第40页
   ·实验方法第40-47页
     ·Caspase 3、Caspase 8、 Caspase 9 酶活性检测第40-41页
     ·线粒体膜电位(?ψm)检测第41页
     ·活性氧的检测第41-42页
     ·线粒体耗氧量检测第42页
     ·丙二醛(MDA)含量测定第42-43页
     ·抗氧化酶(SOD、CAT)活性检测第43-44页
     ·免疫荧光法检测细胞色素C 的亚细胞定位第44页
     ·Western blot 检测Bax、Bcl-2 蛋白水平第44-45页
     ·RT-PCR 检测Fas m RNA 水平第45-47页
     ·统计分析第47页
   ·实验结果与讨论第47-57页
     ·GLA 激活caspase 活性第47-48页
     ·GLA 诱导线粒体膜(?ψm)电位下降第48-49页
     ·GLA 诱导HL-60 细胞ROS 的爆发第49-53页
     ·GLA 降低HL-60 细胞的氧耗量第53页
     ·GLA 引起HL-60 细胞脂质过氧化第53-54页
     ·GLA 引起抗氧化酶(SOD、CAT)活性升高第54-55页
     ·GLA 引起细胞色素C 的释放第55页
     ·GLA 下调Bcl-2 蛋白的表达和上调Bax 蛋白的表达第55-56页
     ·GLA 对Fas 基因表达的影响第56-57页
   ·本章小结第57-58页
第五章 NAC 对蓝萼甲素诱导HL-60 细胞凋亡的影响第58-64页
   ·引言第58页
   ·实验仪器与试剂第58-59页
     ·主要试剂第58页
     ·主要仪器第58-59页
   ·实验方法第59-60页
     ·不同抗氧化剂对GLA 细胞毒作用的影响第59页
     ·NAC 对GLA 诱导的ROS 爆发的影响第59页
     ·NAC 对GLA 诱导的细胞毒作用的影响第59页
     ·NAC 对GLA 诱导的细胞凋亡的影响第59页
     ·NAC 对GLA 诱导的线粒体膜电位下降的影响第59页
     ·统计分析第59-60页
   ·实验结果与讨论第60-63页
     ·不同抗氧化剂对GLA 细胞毒作用的影响第60页
     ·NAC 抑制GLA 诱导的ROS 爆发第60页
     ·NAC 抑制GLA 的细胞毒作用第60页
     ·NAC 抑制GLA 诱导的细胞凋亡第60-61页
     ·NAC 抑制GLA 诱导的线粒体膜电位下降第61-63页
   ·本章小结第63-64页
论文总结与展望第64-66页
参考文献第66-74页
攻读学位期间本人出版或公开发表的论著、论文第74-75页
附录第75-76页
致谢第76-77页

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