| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-19页 |
| ·香茶菜属植物抗癌活性及蓝萼香茶菜研究现状 | 第12-14页 |
| ·香茶菜属植物抗癌活性研究进展 | 第12页 |
| ·蓝萼香茶菜概况 | 第12-13页 |
| ·蓝萼香茶菜药理活性概况 | 第13-14页 |
| ·细胞死亡方式 | 第14-16页 |
| ·细胞坏死(Necrosis) | 第14页 |
| ·细胞凋亡(Apoptosis) | 第14-15页 |
| ·自噬(Autophage) | 第15页 |
| ·自噬、凋亡与坏死三者联系 | 第15-16页 |
| ·活性氧与细胞凋亡 | 第16-18页 |
| ·活性氧(reactive oxygen species,ROS)种类 | 第16-17页 |
| ·活性氧的产生和抗氧化系统 | 第17页 |
| ·活性氧对DNA、脂质、蛋白质及糖类的损伤 | 第17-18页 |
| ·ROS 与凋亡 | 第18页 |
| ·本课题研究的主要内容 | 第18-19页 |
| 第二章 蓝萼甲素和蓝萼丙素细胞毒活性比较及构效关系分析 | 第19-28页 |
| ·引言 | 第19页 |
| ·实验仪器与试剂 | 第19-21页 |
| ·药物及试剂的配制 | 第19-20页 |
| ·主要仪器 | 第20页 |
| ·细胞株 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-22页 |
| ·GLA 和GLC 纯度的评价 | 第21页 |
| ·细胞的复苏与培养 | 第21页 |
| ·MTT 法检测抑瘤作用 | 第21页 |
| ·GLA 或者GLC 与Bcl-2 蛋白的分子对接 | 第21-22页 |
| ·实验结果与讨论 | 第22-26页 |
| ·GLA 和GLC 纯度评价 | 第22-23页 |
| ·GLA 和GLC 细胞毒性的比较 | 第23-26页 |
| ·GLA 或者GLC 与Bcl-2 蛋白的分子对接 | 第26页 |
| ·本章小结 | 第26-28页 |
| 第三章 蓝萼甲素诱导HL-60 细胞凋亡的研究 | 第28-37页 |
| ·引言 | 第28页 |
| ·实验仪器与试剂 | 第28-29页 |
| ·主要试剂及其溶液配制 | 第28-29页 |
| ·主要仪器 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-31页 |
| ·MTT 法检测HL-60 细胞存活率 | 第29页 |
| ·细胞形态观察 | 第29页 |
| ·AO/EB 双染 | 第29-30页 |
| ·DAPI 染色 | 第30页 |
| ·Annexin V-FITC/PI 双染 | 第30页 |
| ·TUNEL 检测 | 第30-31页 |
| ·DNA Ladder 检测 | 第31页 |
| ·流式细胞仪检测细胞的Sub-G1 峰 | 第31页 |
| ·统计分析 | 第31页 |
| ·实验结果与讨论 | 第31-36页 |
| ·GLA 对HL-60 的细胞毒作用 | 第31-32页 |
| ·GLA 诱导HL-60 细胞凋亡 | 第32-36页 |
| ·GLA 诱导白血病K562 细胞凋亡 | 第36页 |
| ·本章小结 | 第36-37页 |
| 第四章 蓝萼甲素诱导HL-60 细胞凋亡信号转导通路的研究 | 第37-58页 |
| ·引言 | 第37-38页 |
| ·实验仪器与试剂 | 第38-40页 |
| ·主要试剂及其溶液配制 | 第38-40页 |
| ·主要仪器 | 第40页 |
| ·实验方法 | 第40-47页 |
| ·Caspase 3、Caspase 8、 Caspase 9 酶活性检测 | 第40-41页 |
| ·线粒体膜电位(?ψm)检测 | 第41页 |
| ·活性氧的检测 | 第41-42页 |
| ·线粒体耗氧量检测 | 第42页 |
| ·丙二醛(MDA)含量测定 | 第42-43页 |
| ·抗氧化酶(SOD、CAT)活性检测 | 第43-44页 |
| ·免疫荧光法检测细胞色素C 的亚细胞定位 | 第44页 |
| ·Western blot 检测Bax、Bcl-2 蛋白水平 | 第44-45页 |
| ·RT-PCR 检测Fas m RNA 水平 | 第45-47页 |
| ·统计分析 | 第47页 |
| ·实验结果与讨论 | 第47-57页 |
| ·GLA 激活caspase 活性 | 第47-48页 |
| ·GLA 诱导线粒体膜(?ψm)电位下降 | 第48-49页 |
| ·GLA 诱导HL-60 细胞ROS 的爆发 | 第49-53页 |
| ·GLA 降低HL-60 细胞的氧耗量 | 第53页 |
| ·GLA 引起HL-60 细胞脂质过氧化 | 第53-54页 |
| ·GLA 引起抗氧化酶(SOD、CAT)活性升高 | 第54-55页 |
| ·GLA 引起细胞色素C 的释放 | 第55页 |
| ·GLA 下调Bcl-2 蛋白的表达和上调Bax 蛋白的表达 | 第55-56页 |
| ·GLA 对Fas 基因表达的影响 | 第56-57页 |
| ·本章小结 | 第57-58页 |
| 第五章 NAC 对蓝萼甲素诱导HL-60 细胞凋亡的影响 | 第58-64页 |
| ·引言 | 第58页 |
| ·实验仪器与试剂 | 第58-59页 |
| ·主要试剂 | 第58页 |
| ·主要仪器 | 第58-59页 |
| ·实验方法 | 第59-60页 |
| ·不同抗氧化剂对GLA 细胞毒作用的影响 | 第59页 |
| ·NAC 对GLA 诱导的ROS 爆发的影响 | 第59页 |
| ·NAC 对GLA 诱导的细胞毒作用的影响 | 第59页 |
| ·NAC 对GLA 诱导的细胞凋亡的影响 | 第59页 |
| ·NAC 对GLA 诱导的线粒体膜电位下降的影响 | 第59页 |
| ·统计分析 | 第59-60页 |
| ·实验结果与讨论 | 第60-63页 |
| ·不同抗氧化剂对GLA 细胞毒作用的影响 | 第60页 |
| ·NAC 抑制GLA 诱导的ROS 爆发 | 第60页 |
| ·NAC 抑制GLA 的细胞毒作用 | 第60页 |
| ·NAC 抑制GLA 诱导的细胞凋亡 | 第60-61页 |
| ·NAC 抑制GLA 诱导的线粒体膜电位下降 | 第61-63页 |
| ·本章小结 | 第63-64页 |
| 论文总结与展望 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-74页 |
| 攻读学位期间本人出版或公开发表的论著、论文 | 第74-75页 |
| 附录 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |