| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-13页 |
| 第二章 材料与方法 | 第13-35页 |
| ·实验材料 | 第13-18页 |
| ·细胞株和细菌 | 第13页 |
| ·试剂 | 第13-15页 |
| ·溶液的配置 | 第15-17页 |
| ·实验仪器 | 第17-18页 |
| ·实验方法 | 第18-34页 |
| ·细胞培养 | 第18页 |
| ·细胞基因组DNA 提取 | 第18-19页 |
| ·细胞m RNA 提取 | 第19页 |
| ·逆转录 | 第19-20页 |
| ·RealTime-PCR | 第20-21页 |
| ·质粒构建 | 第21-26页 |
| ·转化及鉴定 | 第26页 |
| ·重组质粒测序 | 第26-28页 |
| ·质粒小抽 | 第28页 |
| ·质粒中抽 | 第28-29页 |
| ·细胞转染 | 第29-30页 |
| ·测量萤光数值 | 第30页 |
| ·细胞总蛋白的提取 | 第30-31页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第31页 |
| ·蛋白质免疫印迹实验 | 第31-33页 |
| ·凝胶迁移试验和超迁移试验 | 第33-34页 |
| ·数据处理与统计分析 | 第34-35页 |
| 第三章 结果 | 第35-43页 |
| ·低氧对IRP1 mRNA 转录水平的影响 | 第35-36页 |
| ·低氧对HepG2 细胞HIF-1α及IRP1 蛋白表达的影响 | 第36页 |
| ·确定人类IRP1 基因5'-调控区HRE 的存在及功能 | 第36-42页 |
| ·MatInspector 软件分析人类IRP1 基因调控区 | 第36-37页 |
| ·EMSA 及Supershift 试验对疑似HRE 与 HIF-1 结合能力的分析 | 第37-39页 |
| ·构建质粒确定疑似HRE的功能 | 第39-41页 |
| ·共转染试验验证IRP1 调控区HRE 的功能 | 第41-42页 |
| ·IRP1 对下游靶基因的调控 | 第42-43页 |
| 第四章 讨论 | 第43-48页 |
| 第五章 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-52页 |
| 英文缩写词表 | 第52-54页 |
| 综述 | 第54-68页 |
| 综述参考文献 | 第63-68页 |
| 在攻读硕士学位期间公开发表的论文与参加的项目 | 第68-69页 |
| A:在国内外刊物上发表的论文 | 第68页 |
| B:在国际国内学术会议上发表的论文 | 第68页 |
| C:参加的项目 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |