| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-13页 |
| 缩略词 | 第13-14页 |
| 前言 | 第14-17页 |
| 技术路线 | 第17-18页 |
| 第一部分 IDH1~(R132)基因突变在人脑胶质瘤中的分布特征 | 第18-28页 |
| 1. 前言 | 第18页 |
| 2. 材料与方法 | 第18-22页 |
| ·标本收集 | 第18-19页 |
| ·仪器与设计 | 第19页 |
| ·DNA提取 | 第19-20页 |
| ·IDH~(R132)基因分析 | 第20-21页 |
| ·统计学分析 | 第21-22页 |
| 3. 结果 | 第22-25页 |
| ·IDH1~(R132)基因突变在脑肿瘤中的分布 | 第22-23页 |
| ·IDH1~(R132)基因突变在肿瘤中的年龄分布 | 第23-25页 |
| 4. 讨论 | 第25-28页 |
| 第二部分 构建稳定转染IDH1~(R132)基因的Hela、U251细胞系 | 第28-43页 |
| 1. 前言 | 第28-29页 |
| 2. 材料与方法 | 第29-40页 |
| ·菌株及质粒 | 第29页 |
| ·仪器与设计 | 第29-30页 |
| ·细菌的转化 | 第30-31页 |
| ·碱裂解法小量抽提质粒 | 第31页 |
| ·质粒双酶切、鉴定 | 第31页 |
| ·质粒的大量提取 | 第31-32页 |
| ·细胞株复苏及传代 | 第32-34页 |
| ·稳定表达细胞株的构建 | 第34-35页 |
| ·稳定转染细胞株的鉴定 | 第35-40页 |
| ·细胞冻存 | 第40页 |
| 3. 结果 | 第40-41页 |
| ·质粒双酶切鉴定 | 第40-41页 |
| ·IDH1 Wild-pCDNA3.1及IDH1~(R132H)-pCDNA3.1细胞株的建立 | 第41页 |
| 4. 讨论 | 第41-43页 |
| 第三部分 IDH1~(R132H)基因功能研究 | 第43-56页 |
| 1. 前言 | 第43-44页 |
| 2. 材料和方法 | 第44-47页 |
| ·细胞 | 第44页 |
| ·仪器与试剂 | 第44-45页 |
| ·MTT法检测细胞增值 | 第45页 |
| ·流式细胞仪分析细胞周期及凋亡 | 第45-46页 |
| ·酶活力的鉴定 | 第46页 |
| ·免疫组化 | 第46页 |
| ·统计学分析 | 第46-47页 |
| 3. 结果 | 第47-53页 |
| ·MTT法检测细胞增值生长 | 第47页 |
| ·流式细胞仪分析细胞周期及凋亡 | 第47-48页 |
| ·IDH1酶活力的测定 | 第48页 |
| ·免疫组化的检测 | 第48-53页 |
| 4. 讨论 | 第53-56页 |
| 第四部分 转染IDH1~(R132)基因后细胞对化疗药物敏感性变化 | 第56-66页 |
| 1. 前言 | 第56-57页 |
| 2. 材料与方法 | 第57-60页 |
| ·细胞 | 第57页 |
| ·主要仪器 | 第57页 |
| ·主要试剂 | 第57-58页 |
| ·细胞分组及给药 | 第58页 |
| ·流式细胞仪检测细胞凋亡率 | 第58-59页 |
| ·蛋白的提取及Western-Blotting | 第59页 |
| ·统计学分析 | 第59-60页 |
| 3. 结果 | 第60-64页 |
| ·不同浓度DDP对于U251细胞生长率的影响 | 第60-61页 |
| ·流式细胞仪检测细胞凋亡率 | 第61-63页 |
| ·Caspase-3蛋白Western-Blotting检测 | 第63-64页 |
| 4. 讨论 | 第64-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-72页 |
| 综述一 | 第72-87页 |
| 胶质瘤遗传学改变及其信号通路 | 第72-87页 |
| 1. 胶质瘤分类 | 第72-73页 |
| 2. EGFR/RAS/NF1/PTEN/PI3通路 | 第73-74页 |
| 3. TP53/MDM2/MDM4/p14ARF通路 | 第74-75页 |
| 4. p16INK4a/CDK4/RB1通路 | 第75页 |
| 5. IDH1 | 第75-76页 |
| 6. 杂合子丢失(LOH) | 第76页 |
| 7. 1p和19q丢失 | 第76-77页 |
| 8. cDNA及蛋白表达 | 第77页 |
| 9. 对于化疗的反应 | 第77-78页 |
| 10. 脑肿瘤干细胞 | 第78页 |
| 11. 展望 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-87页 |
| 综述二 | 第87-93页 |
| IDH1突变与胶质瘤 | 第87-93页 |
| 1. 异柠檬酸脱氢酶(isocitrate dehydrogenase,IDH)功能及分类 | 第88页 |
| 2. IDH1突变的发现 | 第88-89页 |
| 3. 胶质瘤中IDH1突变特点 | 第89-90页 |
| 4. 展望 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-93页 |
| 附录 | 第93-95页 |
| 个人简历 | 第95-96页 |
| 攻读博士学位期间主要研究成果 | 第96-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |
