摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 引言 | 第9-20页 |
1.1 猪圆环病毒及疫苗概论 | 第9-11页 |
1.1.1 猪圆环病毒简介 | 第9页 |
1.1.2 病毒样颗粒研究进展 | 第9-10页 |
1.1.3 猪圆环病毒疫苗研究进展 | 第10-11页 |
1.2 免疫细胞表面模式受体研究 | 第11-16页 |
1.2.1 甘露糖受体家族和结构特征 | 第11-14页 |
1.2.2 甘露糖受体在免疫系统中作用 | 第14-15页 |
1.2.3 靶向甘露糖受体的亚单位疫苗 | 第15-16页 |
1.3 疫苗载药系统 | 第16-17页 |
1.4 研究目的及意义 | 第17-18页 |
1.5 研究内容 | 第18-20页 |
第二章 猪圆环衣壳蛋白类病毒样颗粒(analogous-VLPs)的制备 | 第20-46页 |
2.1 实验材料 | 第20-27页 |
2.1.1 表达菌株和载体 | 第20页 |
2.1.2 主要药品 | 第20-21页 |
2.1.3 溶液及试剂配制 | 第21-26页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第26-27页 |
2.2 试验方法 | 第27-31页 |
2.2.1 菌种的转化及诱导表达目的蛋白PCV2_(ΔCap42—233) | 第27-28页 |
2.2.2 检测目的蛋白PCV2_(ΔCap42—233)的表达 | 第28-29页 |
2.2.3 目的蛋白PCV2_(ΔCap42—233)分离纯化 | 第29-30页 |
2.2.4 目的蛋白透析复性以及研究影响类病毒样颗粒稳定因素 | 第30-31页 |
2.3 结果分析与讨论 | 第31-44页 |
2.3.1 菌株的转化,诱导表达 | 第31-32页 |
2.3.2 目的蛋白PCV2_(ΔCap42—233)的分离纯化 | 第32-36页 |
2.3.3 目的蛋白PCV2_(ΔCap42—233)的透析复性 | 第36-39页 |
2.3.4 稳定均一的PCV2_(ΔCap42—233)蛋白纳米颗粒制备 | 第39-44页 |
2.4 本章小结 | 第44-46页 |
第三章 甘露糖化亚单位疫苗的制备以及体外释放实验 | 第46-68页 |
3.1 实验材料 | 第46-48页 |
3.1.1 主要试剂及厂家 | 第46-47页 |
3.1.2 主要溶液及缓冲液 | 第47页 |
3.1.3 主要仪器设备 | 第47-48页 |
3.2 试验方法 | 第48-52页 |
3.2.1 溶液中醛基含量测定方法建立以及标准曲线的绘制 | 第48页 |
3.2.2 高碘酸钠氧化多聚糖条件确定 | 第48-49页 |
3.2.3 制备甘露糖化PCV2_(ΔCap42—233)蛋白纳米颗粒 | 第49-50页 |
3.2.4 鉴定甘露糖化PCV2_(ΔCap42—233)(M-PCV2_(ΔCap42—233)蛋白纳米颗粒 | 第50-52页 |
3.2.5 溶酶体pH条件下甘露糖化蛋白的可逆释放 | 第52页 |
3.3 实验结果与分析 | 第52-67页 |
3.3.1 溶液状态下醛基的特征吸收峰波形及戊二醛标准曲线的测定 | 第53-54页 |
3.3.2 高碘酸钠氧化多聚糖条件确定 | 第54-56页 |
3.3.3 氧化甘露糖的制备及鉴定 | 第56-59页 |
3.3.4 鉴定甘露糖化PCV2_(ΔCap42—233)蛋白纳米颗粒 | 第59-62页 |
3.3.5 溶酶体pH条件下甘露糖化蛋白的可逆释放 | 第62-67页 |
3.4 本章小结 | 第67-68页 |
第四章 小鼠模型免疫实验以及生理生化效果分析 | 第68-85页 |
4.1 试验材料 | 第68-69页 |
4.1.1 主要材料及厂家 | 第68页 |
4.1.2 主要仪器设备 | 第68-69页 |
4.1.3 主要溶液及缓冲液 | 第69页 |
4.2 实验方法 | 第69-73页 |
4.2.1 氢氧化铝胶体佐剂制备 | 第70页 |
4.2.2 氢氧化铝胶体佐剂性质鉴定 | 第70页 |
4.2.3 白油佐剂简单性质鉴定 | 第70页 |
4.2.4 SPF级小鼠模型免疫试验 | 第70-72页 |
4.2.5 ELISA检测小鼠血清特异抗体 | 第72页 |
4.2.6 夹心法检测小鼠血清中细胞因子含量 | 第72-73页 |
4.2.7 数据分析 | 第73页 |
4.3 实验结果与讨论 | 第73-83页 |
4.3.1 氢氧化铝胶体鉴定 | 第73-74页 |
4.3.2 白油佐剂制备出的疫苗鉴定结果 | 第74页 |
4.3.3 小鼠血清抗体效价 | 第74-77页 |
4.3.4 小鼠血清细胞因子检测 | 第77-83页 |
4.4 本章小结 | 第83-85页 |
总结与展望 | 第85-87页 |
总结 | 第85-86页 |
展望 | 第86-87页 |
参考文献 | 第87-95页 |
致谢 | 第95-96页 |
个人简历 | 第96页 |