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番茄MADS-box基因SlMBP10的功能研究

中文摘要第3-5页
英文摘要第5-6页
缩略词表第10-12页
1 绪论第12-24页
    1.1 植物非生物胁迫第12-14页
        1.1.1 植物非生物胁迫应答相关基因的研究第12-13页
        1.1.2 植物非生物胁迫应答机制第13-14页
    1.2 MADS-box基因的简介第14-19页
        1.2.1 MADS-box基因的命名第14页
        1.2.2 MADS-box基因的分布第14页
        1.2.3 MADS-box基因的分类及结构第14-16页
        1.2.4 MADS-box基因的功能第16-19页
    1.3 响应非生物胁迫的植物MADS-box基因第19-20页
    1.4 课题的提出及研究意义第20页
    1.5 课题的研究目的及主要内容第20-24页
        1.5.1 课题的研究目的第20页
        1.5.2 课题的研究内容第20-21页
        1.5.3 课题研究的技术路线第21-22页
        1.5.4 课题的创新点第22-24页
2 番茄SlMBP10基因的生物信息学分析第24-28页
    2.1 材料及方法第24页
    2.2 结果与分析第24-28页
        2.2.1 蛋白与序列分析第24-25页
        2.2.2 SlMBP10的氨基酸序列比对第25-26页
        2.2.3 系统发育分析树第26页
        2.2.4 基因结构分析第26-27页
        2.2.5 SlMBP10启动子分析第27-28页
3 SlMBP10基因的组织表达模式研究第28-38页
    3.1 材料仪器与设备第28-30页
        3.1.1 植物材料第28页
        3.1.2 仪器与设备第28页
        3.1.3 试剂与培养基第28-30页
    3.2 实验方法第30-31页
        3.2.1 番茄材料的收集第30页
        3.2.2 番茄基因组DNA的提取第30页
        3.2.3 番茄总RNA的提取第30页
        3.2.4 反转录第30-31页
    3.3 SlMBP10表达模式分析第31-34页
        3.3.1 SlMBP10基因定量引物设计及扩增条件探索第31-33页
        3.3.2 SlMBP10组织表达模式分析第33页
        3.3.3 SlMBP10高盐、干旱和激素胁迫下的表达模式分析第33-34页
    3.4 结果与分析第34-36页
        3.4.1 SlMBP10在番茄不同组织中的表达模式第34-35页
        3.4.2 高盐、干旱胁迫和激素胁迫处理分析第35-36页
    3.5 小结第36-38页
4 SlMBP10转基因载体构建及转基因番茄的培育第38-54页
    4.1 材料和仪器第38-40页
        4.1.1 实验材料第38-40页
        4.1.2 仪器与设备第40页
    4.2 实验方法第40-47页
        4.2.1 SlMBP10沉默片段的扩增第40-41页
        4.2.2 T载体的连接第41页
        4.2.3 质粒转化大肠杆菌感受态DH5α第41页
        4.2.4 挑取单菌落并进行菌落PCR第41-42页
        4.2.5 菌落扩大培养第42页
        4.2.6 质粒的提取第42页
        4.2.7 测序正确的质粒再次验证第42-43页
        4.2.8 SlMBP10沉默载体的构建第43-45页
        4.2.9 pBIN19-SlMBP10质粒的农杆菌结合转移第45页
        4.2.10 野生型番茄种子消毒第45-46页
        4.2.11 农杆菌感染番茄子叶外植体并诱导出苗第46-47页
        4.2.12 SlMBP10-RNAi转基因植株的筛选第47页
        4.2.13 转基因效率鉴定第47页
    4.3 结果与分析第47-53页
        4.3.1 SlMBP10基因的克隆第48页
        4.3.2 SlMBP10沉默片段与中间载体的连接第48-49页
        4.3.3 SlMBP10沉默片段与终载体的连接第49-51页
        4.3.4 SlMBP10-RNAi转基因植株的获得第51-52页
        4.3.5 SlMBP10-RNAi植株阳性鉴定结果第52页
        4.3.6 SlMBP10在阳性转基因番茄中的表达分析第52-53页
    4.4 小结第53-54页
5 SlMBP10基因功能分析第54-72页
    5.1 实验材料第54页
    5.2 实验方法第54-58页
        5.2.1 组织切片第54页
        5.2.2 花粉的萌发第54-55页
        5.2.3 果实成熟第55页
        5.2.4 SlMBP10-RNAi番茄T1代幼苗盐抗性实验第55-56页
        5.2.5 SlMBP10-RNAi番茄T1代幼苗干旱抗性实验第56页
        5.2.6 SlMBP10-RNAi株系胁迫情况下各生理指标的测定第56-57页
        5.2.7 SlMBP10-RNAiT1代幼苗NaCl敏感性实验第57页
        5.2.8 SlMBP10-RNAiT1代幼苗激素ABA、IAA、GA3处理实验第57-58页
    5.3 结果与分析第58-72页
        5.3.1 SlMBP10沉默株系茎的表型第58-59页
        5.3.2 花粉萌发第59页
        5.3.3 番茄果实第59-60页
        5.3.4 SlMBP10-RNAi番茄T1代幼苗盐抗性分析第60-63页
        5.3.5 SlMBP10-RNAi番茄T1代幼苗干旱抗性分析第63-65页
        5.3.6 SlMBP10-RNAiT1代幼苗NaCl敏感性分析第65-66页
        5.3.7 SlMBP10转基因T1代幼苗激素ABA、IAA、GA3敏感性分析第66-72页
6 讨论第72-76页
7 结论与展望第76-78页
    7.1 主要结论第76页
    7.2 后续工作展望第76-78页
致谢第78-80页
参考文献第80-92页
附录第92页
    A.作者在攻读硕士学位期间发表的论文目录第92页

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