中文摘要 | 第3-5页 |
英文摘要 | 第5-6页 |
缩略词表 | 第10-12页 |
1 绪论 | 第12-24页 |
1.1 植物非生物胁迫 | 第12-14页 |
1.1.1 植物非生物胁迫应答相关基因的研究 | 第12-13页 |
1.1.2 植物非生物胁迫应答机制 | 第13-14页 |
1.2 MADS-box基因的简介 | 第14-19页 |
1.2.1 MADS-box基因的命名 | 第14页 |
1.2.2 MADS-box基因的分布 | 第14页 |
1.2.3 MADS-box基因的分类及结构 | 第14-16页 |
1.2.4 MADS-box基因的功能 | 第16-19页 |
1.3 响应非生物胁迫的植物MADS-box基因 | 第19-20页 |
1.4 课题的提出及研究意义 | 第20页 |
1.5 课题的研究目的及主要内容 | 第20-24页 |
1.5.1 课题的研究目的 | 第20页 |
1.5.2 课题的研究内容 | 第20-21页 |
1.5.3 课题研究的技术路线 | 第21-22页 |
1.5.4 课题的创新点 | 第22-24页 |
2 番茄SlMBP10基因的生物信息学分析 | 第24-28页 |
2.1 材料及方法 | 第24页 |
2.2 结果与分析 | 第24-28页 |
2.2.1 蛋白与序列分析 | 第24-25页 |
2.2.2 SlMBP10的氨基酸序列比对 | 第25-26页 |
2.2.3 系统发育分析树 | 第26页 |
2.2.4 基因结构分析 | 第26-27页 |
2.2.5 SlMBP10启动子分析 | 第27-28页 |
3 SlMBP10基因的组织表达模式研究 | 第28-38页 |
3.1 材料仪器与设备 | 第28-30页 |
3.1.1 植物材料 | 第28页 |
3.1.2 仪器与设备 | 第28页 |
3.1.3 试剂与培养基 | 第28-30页 |
3.2 实验方法 | 第30-31页 |
3.2.1 番茄材料的收集 | 第30页 |
3.2.2 番茄基因组DNA的提取 | 第30页 |
3.2.3 番茄总RNA的提取 | 第30页 |
3.2.4 反转录 | 第30-31页 |
3.3 SlMBP10表达模式分析 | 第31-34页 |
3.3.1 SlMBP10基因定量引物设计及扩增条件探索 | 第31-33页 |
3.3.2 SlMBP10组织表达模式分析 | 第33页 |
3.3.3 SlMBP10高盐、干旱和激素胁迫下的表达模式分析 | 第33-34页 |
3.4 结果与分析 | 第34-36页 |
3.4.1 SlMBP10在番茄不同组织中的表达模式 | 第34-35页 |
3.4.2 高盐、干旱胁迫和激素胁迫处理分析 | 第35-36页 |
3.5 小结 | 第36-38页 |
4 SlMBP10转基因载体构建及转基因番茄的培育 | 第38-54页 |
4.1 材料和仪器 | 第38-40页 |
4.1.1 实验材料 | 第38-40页 |
4.1.2 仪器与设备 | 第40页 |
4.2 实验方法 | 第40-47页 |
4.2.1 SlMBP10沉默片段的扩增 | 第40-41页 |
4.2.2 T载体的连接 | 第41页 |
4.2.3 质粒转化大肠杆菌感受态DH5α | 第41页 |
4.2.4 挑取单菌落并进行菌落PCR | 第41-42页 |
4.2.5 菌落扩大培养 | 第42页 |
4.2.6 质粒的提取 | 第42页 |
4.2.7 测序正确的质粒再次验证 | 第42-43页 |
4.2.8 SlMBP10沉默载体的构建 | 第43-45页 |
4.2.9 pBIN19-SlMBP10质粒的农杆菌结合转移 | 第45页 |
4.2.10 野生型番茄种子消毒 | 第45-46页 |
4.2.11 农杆菌感染番茄子叶外植体并诱导出苗 | 第46-47页 |
4.2.12 SlMBP10-RNAi转基因植株的筛选 | 第47页 |
4.2.13 转基因效率鉴定 | 第47页 |
4.3 结果与分析 | 第47-53页 |
4.3.1 SlMBP10基因的克隆 | 第48页 |
4.3.2 SlMBP10沉默片段与中间载体的连接 | 第48-49页 |
4.3.3 SlMBP10沉默片段与终载体的连接 | 第49-51页 |
4.3.4 SlMBP10-RNAi转基因植株的获得 | 第51-52页 |
4.3.5 SlMBP10-RNAi植株阳性鉴定结果 | 第52页 |
4.3.6 SlMBP10在阳性转基因番茄中的表达分析 | 第52-53页 |
4.4 小结 | 第53-54页 |
5 SlMBP10基因功能分析 | 第54-72页 |
5.1 实验材料 | 第54页 |
5.2 实验方法 | 第54-58页 |
5.2.1 组织切片 | 第54页 |
5.2.2 花粉的萌发 | 第54-55页 |
5.2.3 果实成熟 | 第55页 |
5.2.4 SlMBP10-RNAi番茄T1代幼苗盐抗性实验 | 第55-56页 |
5.2.5 SlMBP10-RNAi番茄T1代幼苗干旱抗性实验 | 第56页 |
5.2.6 SlMBP10-RNAi株系胁迫情况下各生理指标的测定 | 第56-57页 |
5.2.7 SlMBP10-RNAiT1代幼苗NaCl敏感性实验 | 第57页 |
5.2.8 SlMBP10-RNAiT1代幼苗激素ABA、IAA、GA3处理实验 | 第57-58页 |
5.3 结果与分析 | 第58-72页 |
5.3.1 SlMBP10沉默株系茎的表型 | 第58-59页 |
5.3.2 花粉萌发 | 第59页 |
5.3.3 番茄果实 | 第59-60页 |
5.3.4 SlMBP10-RNAi番茄T1代幼苗盐抗性分析 | 第60-63页 |
5.3.5 SlMBP10-RNAi番茄T1代幼苗干旱抗性分析 | 第63-65页 |
5.3.6 SlMBP10-RNAiT1代幼苗NaCl敏感性分析 | 第65-66页 |
5.3.7 SlMBP10转基因T1代幼苗激素ABA、IAA、GA3敏感性分析 | 第66-72页 |
6 讨论 | 第72-76页 |
7 结论与展望 | 第76-78页 |
7.1 主要结论 | 第76页 |
7.2 后续工作展望 | 第76-78页 |
致谢 | 第78-80页 |
参考文献 | 第80-92页 |
附录 | 第92页 |
A.作者在攻读硕士学位期间发表的论文目录 | 第92页 |