| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRCAT | 第9-10页 |
| 上篇 文献综述 | 第11-28页 |
| 第一章 小分子RNA在水稻对稻瘟病抗性和AR156介导植物抗病性的研究进展 | 第12-28页 |
| 1 水稻稻瘟病的研究现状 | 第12-13页 |
| 1.1 水稻稻瘟病概述 | 第12页 |
| 1.2 水稻稻瘟病病原和致病机理 | 第12-13页 |
| 1.3 水稻与稻瘟病菌互作及“基因对基因”假说 | 第13页 |
| 2 植物miRNAs研究进展 | 第13-16页 |
| 2.1 植物miRNAs的发生及作用机制 | 第13-14页 |
| 2.2 miRNAs在生物胁迫中的作用 | 第14-15页 |
| 2.3 基于高通量测序和生物信息学的miRNAs研究 | 第15页 |
| 2.4 miR169a和NF-YA的研究进展 | 第15-16页 |
| 3 抗病信号途径 | 第16-17页 |
| 3.1 茉莉酸信号途径 | 第17页 |
| 3.2 水杨酸信号途径 | 第17页 |
| 4 植物的诱导抗病性 | 第17-22页 |
| 4.1 系统获得抗性(SAR) | 第18-19页 |
| 4.2 根围促生菌(PGPR)作用研究 | 第19-20页 |
| 4.3 诱导植物系统抗性的诱导因子 | 第20-21页 |
| 4.4 PGPR在水稻中的作用研究 | 第21-22页 |
| 参考文献 | 第22-28页 |
| 下篇 研究内容 | 第28-70页 |
| 第二章 稻瘟病菌胁迫下miR169a及其靶标基因OsNFYA的鉴定和功能分析 | 第30-56页 |
| 1 材料与方法 | 第32-41页 |
| 1.1 水稻品种和稻瘟病菌株 | 第32页 |
| 1.2 稻瘟病菌株培养条件 | 第32页 |
| 1.3 稻瘟病菌株产孢 | 第32页 |
| 1.4 孢子悬浮液侵染水稻 | 第32页 |
| 1.5 水稻幼苗培养 | 第32-33页 |
| 1.6 总RNA的提取 | 第33页 |
| 1.7 植物sRNA的提取 | 第33页 |
| 1.8 Northern Blot | 第33-34页 |
| 1.8.1 尿素变性聚丙烯酰氨凝胶电泳 | 第33-34页 |
| 1.8.2 半干转印仪转膜 | 第34页 |
| 1.8.3 RNA杂交 | 第34页 |
| 1.9 水稻cDNA合成 | 第34页 |
| 1.10 qRT-PCR引物设计及反应体系 | 第34-35页 |
| 1.11 人工合成miR169a的构建 | 第35-36页 |
| 1.12 水稻OsNFYA基因的克隆 | 第36-37页 |
| 1.13 水稻原生质体瞬时表达载体构建 | 第37-39页 |
| 1.13.1 过表达载体的构建 | 第37-38页 |
| 1.13.2 沉默载体的构建 | 第38-39页 |
| 1.14 水稻原生质体体系 | 第39-40页 |
| 1.14.1 水稻黄化苗的培养 | 第39页 |
| 1.14.2 水稻原生质体的分离 | 第39-40页 |
| 1.14.3 PEG法介导水稻原生质体转化 | 第40页 |
| 1.15 稻瘟病菌激发子的提取 | 第40页 |
| 1.16 水稻原生质体胼胝质积累检测 | 第40-41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-51页 |
| 2.1 miRNAs文库建立与生物信息学分析 | 第41-42页 |
| 2.2 小分子RNA数据库的生物信息学分析 | 第42-43页 |
| 2.2.1 已知miRNAs分析 | 第42页 |
| 2.2.2 miRNAs的差异表达分析 | 第42-43页 |
| 2.3 miR169a的Northern杂交验证 | 第43-44页 |
| 2.4 miR169a靶标基因的分析 | 第44页 |
| 2.5 qRT-PCR验证NF-YA的积累 | 第44-45页 |
| 2.6 利用烟草瞬时表达体系验证miR169a和OsNFYA互作关系 | 第45-46页 |
| 2.7 水稻原生质体瞬时表达体系 | 第46-51页 |
| 2.7.1 过表达和沉默载体的构建 | 第46-47页 |
| 2.7.2 OsNFYA在水稻原生质体中的定位 | 第47-48页 |
| 2.7.3 OsNFYA调节水稻原生质体中胼胝质的积累 | 第48-49页 |
| 2.7.4 OsNFYA过表达和沉默条件下相关抗病基因表达情况 | 第49-51页 |
| 3 讨论 | 第51-54页 |
| 参考文献 | 第54-56页 |
| 第三章 小分子RNA在AR156介导的诱导系统抗病性中的作用研究 | 第56-70页 |
| 1 材料与方法 | 第59-62页 |
| 1.1 AR156材料与菌株 | 第59页 |
| 1.2 AR156预处理植物 | 第59-60页 |
| 1.3 qRT-PCR引物设计及反应体系 | 第60页 |
| 1.4 拟南芥蛋白的提取及Western blot: | 第60-61页 |
| 1.5 ROS积累的检测 | 第61-62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-68页 |
| 2.1 AR156可以促进PR1和ROS在系统叶片的积累 | 第62-63页 |
| 2.2 AR156激活PTI参与植物免疫反应 | 第63-64页 |
| 2.3 AR156在水稻-稻瘟病菌体系中的作用 | 第64-66页 |
| 2.4 预处理AR156调控水稻体内miRNAs的表达 | 第66-68页 |
| 3 讨论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-70页 |
| 全文总结 | 第70-72页 |
| 附录 | 第72-74页 |
| 攻读硕士学位期间发表的研究论文 | 第74-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
