致谢 | 第5-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
缩略词表 | 第12-15页 |
1 绪论 | 第15-18页 |
1.1 骨肉瘤远处转移的研究现状 | 第15页 |
1.2 骨肉瘤干细胞与肿瘤耐药性 | 第15-16页 |
1.3 骨肉瘤的上皮-间质转化过程的现状 | 第16-17页 |
1.4 褪黑激素 | 第17-18页 |
2 实验材料及方法 | 第18-37页 |
2.1 细胞培养、传代和冻存 | 第18-19页 |
2.2 化学试剂和设备 | 第19-23页 |
2.3 MTT实验 | 第23-24页 |
2.4 划痕实验 | 第24页 |
2.5 Transwell试验 | 第24-25页 |
2.6 RNA提取、反转录及实时荧光定量PCR (real-time PCR) | 第25-28页 |
2.7 质粒构建和细胞转染 | 第28页 |
2.8 蛋白质印迹分析(Western blot) | 第28-31页 |
2.9 siRNA干扰步骤 | 第31-32页 |
2.10 干细胞成球实验 | 第32页 |
2.11 流式细胞分析 | 第32-33页 |
2.12 用于肿瘤形成和单细胞克隆转移的体内模型 | 第33-35页 |
2.13 组织切片及免疫组织化学染色 | 第35-36页 |
2.14 数据处理及统计分析 | 第36-37页 |
3 实验结果 | 第37-68页 |
3.1 褪黑激素抑制骨肉瘤细胞迁移和侵袭的能力 | 第37-42页 |
3.2 褪黑激素减少了骨肉瘤干细胞的数量 | 第42-46页 |
3.3 褪黑激素显著体内抑制骨肉瘤的发生和转移 | 第46-49页 |
3.4 褪黑激素调节骨肉瘤细胞的EMT标志物 | 第49-54页 |
3.5 SOX9是参与褪黑激素作用的关键因素 | 第54-68页 |
4 讨论 | 第68-71页 |
5 结论 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-82页 |
综述 | 第82-108页 |
参考文献 | 第95-108页 |
作者简历及在学期间所取得的科研成果 | 第108页 |