摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
缩略表 | 第9-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-23页 |
1.1 PM_(2.5)的由来 | 第14-15页 |
1.1.1 PM2.5定义及形成 | 第14页 |
1.1.2 PM2.5的成分组成及来源 | 第14-15页 |
1.2 PM2.5对健康的影响 | 第15-18页 |
1.2.1 气管损伤 | 第15-16页 |
1.2.2 心血管疾病 | 第16-17页 |
1.2.3 糖尿病的诱导及恶化 | 第17页 |
1.2.4 PM2.5对婴儿的不良反应 | 第17-18页 |
1.3 PM2.5对细胞产生毒性影响的潜在机制 | 第18-21页 |
1.3.1 代谢激活 | 第18页 |
1.3.2 氧化压力和损伤 | 第18-19页 |
1.3.3 基因毒性 | 第19页 |
1.3.4 炎症和免疫损伤 | 第19-21页 |
1.4 PM2.5对巨噬细胞的毒性作用 | 第21-23页 |
第二章 PM2.5成分的研究 | 第23-31页 |
2.1 引言 | 第23页 |
2.2 材料与方法 | 第23-24页 |
2.2.1 PM2.5 | 第23页 |
2.2.2 实验试剂 | 第23-24页 |
2.2.3 主要仪器 | 第24页 |
2.3 实验方法 | 第24-25页 |
2.3.1 PM2.5的收集 | 第24-25页 |
2.3.2 滤膜的处理 | 第25页 |
2.3.3 PM2.5有机污染物含量的测定 | 第25页 |
2.3.4 PM2.5中元素的测定 | 第25页 |
2.4 结果 | 第25-29页 |
2.4.1 PM2.5 | 第25-26页 |
2.4.2 PM2.5有机污染物含量测定结果 | 第26-29页 |
2.4.3 PM2.5中金属元素测定结果 | 第29页 |
2.5 分析与讨论 | 第29-30页 |
2.6 结论 | 第30-31页 |
第三章 PM2.5对细胞的毒性影响 | 第31-55页 |
3.1 引言 | 第31页 |
3.2 材料与方法 | 第31-34页 |
3.2.1 实验材料 | 第31-32页 |
3.2.2 实验试剂 | 第32-33页 |
3.2.3 主要仪器 | 第33-34页 |
3.3 实验方法 | 第34-41页 |
3.3.1 细胞的培养 | 第34-35页 |
3.3.2 细胞形态学观察 | 第35页 |
3.3.3 电镜观察细胞形态 | 第35页 |
3.3.4 细胞存活率的测定 | 第35-36页 |
3.3.5 ROS的检测 | 第36页 |
3.3.6 NO漏出量的测定 | 第36页 |
3.3.7 流式细胞术分选凋亡细胞 | 第36-37页 |
3.3.8 流式细胞仪检测细胞周期 | 第37页 |
3.3.9 流式细胞仪检测线粒体膜电位 | 第37页 |
3.3.10 炎症、凋亡或氧化应激相关基因表达检测 | 第37-40页 |
3.3.11 炎症相关蛋白ELISA检测 | 第40-41页 |
3.3.12 数据分析 | 第41页 |
3.4 实验结果 | 第41-52页 |
3.4.1 细胞形态的观察 | 第41页 |
3.4.2 电镜图观察结果 | 第41-42页 |
3.4.3 MTT结果 | 第42-43页 |
3.4.4 PM2.5致细胞氧化损伤情况 | 第43-45页 |
3.4.5 NO生成情况 | 第45-47页 |
3.4.6 PM2.5致细胞凋亡结果 | 第47-50页 |
3.4.7 PM2.5对细胞的免疫毒性 | 第50-51页 |
3.4.8 PM2.5对细胞周期的影响结果 | 第51-52页 |
3.4.9 PM2.5对线粒体膜电位的影响 | 第52页 |
3.5 分析与讨论 | 第52-54页 |
3.6 结论 | 第54-55页 |
第四章 转录组探究PM2.5对细胞的毒性影响 | 第55-78页 |
4.1 引言 | 第55页 |
4.2 材料和方法 | 第55-56页 |
4.2.1 实验试剂 | 第55页 |
4.2.2 实验仪器 | 第55-56页 |
4.3 实验方法 | 第56-62页 |
4.3.1 Seq-RNA 测序流程 | 第56-57页 |
4.3.2 总RNA提取及其质量检测 | 第57页 |
4.3.3 RNA 文库的建立与 Illumina 测序 | 第57-61页 |
4.3.4 表达量丰度分布图 | 第61页 |
4.3.5 差异分析 | 第61页 |
4.3.6 GO功能分析 | 第61-62页 |
4.3.7 KEGG Pathway 分析 | 第62页 |
4.3.8 筛选差异基因并对差异基因进行荧光定量PCR进行验证 | 第62页 |
4.4 结果分析 | 第62-76页 |
4.4.1 RNA质量结果 | 第62-64页 |
4.4.2 测序质量评估 | 第64-66页 |
4.4.3 表达量丰度分析 | 第66页 |
4.4.4 主成分分析 | 第66-67页 |
4.4.5 相关性热图 | 第67页 |
4.4.6 重复性检验 | 第67-68页 |
4.4.7 分组间差异结果 | 第68-69页 |
4.4.8 分组间聚类分析 | 第69页 |
4.4.9 KEGG分析结果 | 第69-70页 |
4.4.10 GO分析结果 | 第70-71页 |
4.4.11 相关基因验证结果 | 第71页 |
4.4.12 相关蛋白验证结果 | 第71-72页 |
4.4.13 显著表达基因汇总 | 第72-76页 |
4.5 分析与讨论 | 第76-78页 |
第五章 总结与展望 | 第78-80页 |
5.1 总结 | 第78页 |
5.2 展望 | 第78-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
攻读硕士期间发表论文 | 第81-82页 |
参考文献 | 第82-90页 |