| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1 引言 | 第11-20页 |
| 1.1 番木瓜环斑病毒研究进展 | 第11-12页 |
| 1.2 抗番木瓜环斑病毒分子育种研究进展 | 第12-17页 |
| 1.2.1 PRSV外壳蛋白基因的转化 | 第13-14页 |
| 1.2.2 PRSV复制酶基因的转化 | 第14-15页 |
| 1.2.3 PRSV辅助成分-蛋白酶基因的转化 | 第15-16页 |
| 1.2.4 PRSV核酶基因的转化 | 第16页 |
| 1.2.5 RNA介导的抗PRSV基因工程的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.2.6 PRSV交叉保护措施的运用 | 第17页 |
| 1.3 抗病毒转基因番木瓜商业化应用的成就与挑战 | 第17-18页 |
| 1.4 基于RNAi技术分子育种研究进展 | 第18-19页 |
| 1.5 研究目的及意义 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-27页 |
| 2.1 海南PRSV多样性调查与分析 | 第20-21页 |
| 2.1.1 材料 | 第20页 |
| 2.1.2 病毒样品分子检测,序列及相关性分析方法 | 第20-21页 |
| 2.2 番木瓜环斑病毒海南株系植物RNAi表达载体的构建方法 | 第21-23页 |
| 2.2.1 实验材料和载体 | 第21页 |
| 2.2.2 RNAi表达载体载体构建方法 | 第21-23页 |
| 2.3 RNAi表达载体转化番木瓜 | 第23-26页 |
| 2.3.1 番木瓜转化受体材料及再生方法 | 第23-24页 |
| 2.3.2 番木瓜基因枪转化方法 | 第24-25页 |
| 2.3.3 番木瓜转基因株系的检测方法 | 第25-26页 |
| 2.4 转基因番木瓜抗病性检测方法 | 第26-27页 |
| 2.4.1 番木瓜转基因株系病毒接种观察法 | 第26页 |
| 2.4.2 ELISA分析 | 第26-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-46页 |
| 3.1 海南PRSV多样性分析 | 第27-33页 |
| 3.1.1 海南地区番木瓜PRSV感染情况检测 | 第27-29页 |
| 3.1.2 海南PRSV株系基因变异情况分析 | 第29-31页 |
| 3.1.3 海南PRSV株系的级联多基因树系统发育分析 | 第31-32页 |
| 3.1.4 海南PRSV株系的地理分布特点 | 第32-33页 |
| 3.2 番木瓜环斑病毒海南株系植物RNAi表达载体的构建 | 第33-36页 |
| 3.2.1 海南PRSV基因保守区域分析情况 | 第33-34页 |
| 3.2.2 具有粘性末端保守区域干扰片断的获得 | 第34-35页 |
| 3.2.3 干扰片断RNAi发夹结构的获得 | 第35-36页 |
| 3.2.4 番木瓜抗病毒RNAi植物表达载体的获得 | 第36页 |
| 3.3 RNAi转基因番木瓜株系的获得 | 第36-42页 |
| 3.3.1 番木瓜RNAi转化抗性苗的获得 | 第36-38页 |
| 3.3.2 RNAi转基因番木瓜株系的PCR检测 | 第38-42页 |
| 3.4 转基因番木瓜抗病性检测 | 第42-46页 |
| 3.4.1 转基因番木瓜株系温室接种抗病表现 | 第42-44页 |
| 3.4.2 ELISA反应对转基因株系群定性和定量分析 | 第44-45页 |
| 3.4.3 大田种植转基因株系自然发病情况 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46-48页 |
| 4.1 海南PRSV株系的生物多样性分析的成因及其对制定番木瓜转基因育种策略的影响 | 第46页 |
| 4.2 RNAi技术是番木瓜高效广谱的转基因抗病育种可行的策略 | 第46-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 附件 | 第54-57页 |
| 攻读学位期间发表学术论文、申请专利和学术交流情况 | 第57-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
