| 摘要 | 第11-14页 |
| Abstract | 第14-16页 |
| 前言 | 第17-23页 |
| 第一部分: 正电子成像探针[~(18)F] AlF-NOTA-WH701用于乳腺癌的显像 | 第23-48页 |
| 第一章、[~(18)F]AlF-NOTA-WH701的制备,纯化及鉴定 | 第23-28页 |
| 1. 实验材料 | 第23-24页 |
| 1.1 主要试剂及耗材 | 第23页 |
| 1.2 主要设备及仪器 | 第23-24页 |
| 2. 实验方法 | 第24-25页 |
| 2.1 NOTA-WH701的合成 | 第24页 |
| 2.2 AlF-NOTA-WH701的合成 | 第24页 |
| 2.3 [~(18)F]AlF-NOTA-WH701的标记 | 第24-25页 |
| 2.4 [~(18)F]AlF-NOTA-WH701脂水分配系数的测定 | 第25页 |
| 2.5 [~(18)F]AlF-NOTA-WH701血清稳定性的测定 | 第25页 |
| 3. 实验结果 | 第25-28页 |
| 3.1 化学与放化结果 | 第26-28页 |
| 第二章、[~(18)F]AlF-NOTA-WH701体外实验 | 第28-36页 |
| 1. 实验材料 | 第28-30页 |
| 1.1 实验用细胞株 | 第28页 |
| 1.2 主要试剂及耗材 | 第28页 |
| 1.3 主要实验仪器 | 第28-29页 |
| 1.4 主要试剂配制 | 第29-30页 |
| 1.4.1 DMEM细胞培养基 | 第29页 |
| 1.4.2 细胞冻存液 | 第29页 |
| 1.4.3 细胞裂解液 | 第29页 |
| 1.4.4 蛋白凝胶配制 | 第29-30页 |
| 1.4.5 转膜液的配制 | 第30页 |
| 2. 实验方法 | 第30-33页 |
| 2.1 细胞培养 | 第30-31页 |
| 2.1.1 细胞复苏 | 第30页 |
| 2.1.2 细胞传代 | 第30页 |
| 2.1.3细胞的冻存 | 第30-31页 |
| 2.2 细胞蛋白的提取 | 第31页 |
| 2.3 细胞蛋白含量的测定 | 第31页 |
| 2.4 Western Blot | 第31-32页 |
| 2.5 细胞摄取实验与细胞阻断实验 | 第32-33页 |
| 2.6 细胞IC_(50)值的测量 | 第33页 |
| 3. 实验结果 | 第33-36页 |
| 3.1 细胞TNFR1受体的表达 | 第33-34页 |
| 3.2 MCF-7对[~(18)F]AlF-NOTA-WH701的摄取 | 第34-35页 |
| 3.3 WH701对TNFR1的IC_(50)值 | 第35-36页 |
| 第三章、[~(18)F]AlF-NOTA-WH701在荷瘤鼠体内实验 | 第36-44页 |
| 1. 实验材料 | 第36-37页 |
| 1.1 实验用细胞株 | 第36页 |
| 1.2 实验主要试剂 | 第36页 |
| 1.3 主要实验仪器 | 第36-37页 |
| 2. 实验方法 | 第37-39页 |
| 2.1 荷瘤裸鼠模型的建立 | 第37页 |
| 2.2 荷瘤鼠PET/CT显像 | 第37-38页 |
| 2.3 [~(18)F]AlF-NOTA-WH701在荷瘤鼠体内的生物分布 | 第38-39页 |
| 3. 统计学分析 | 第39-40页 |
| 4. 实验结果 | 第40-44页 |
| 4.1 [~(18)F]AlF-NOTA-WH701在荷瘤鼠内代谢及生物分布 | 第41-42页 |
| 4.2 [~(18)F]AlF-NOTA-WH701在荷MCF-7鼠体内的PET/CT显像 | 第42-44页 |
| 第四章、TNFR1受体在MCF-7乳腺癌肿瘤组织中的表达 | 第44-48页 |
| 1. 实验材料 | 第44-45页 |
| 1.1 实验用细胞株 | 第44页 |
| 1.2 实验主要试剂 | 第44页 |
| 1.3 实验主要仪器 | 第44-45页 |
| 2. 实验方法 | 第45-47页 |
| 2.1 荷瘤裸鼠模型的建立 | 第45页 |
| 2.2 MCF-7肿瘤组织中TNFR1受体的表达 | 第45-47页 |
| 3. 实验结果 | 第47-48页 |
| 3.1 MCF-7肿瘤组织HE染色及免疫组化结果 | 第47-48页 |
| 第二部分: 高亲和力靶向TNFR1和α_vβ_3双受体正电子成像探针用于乳腺癌的PET显像 | 第48-66页 |
| 第五章、融合肽~(18)F-NOTA-Gly_3-E (2PEG_4-RGD-WH701)的制备、纯化以及鉴定 | 第48-52页 |
| 1. 实验材料 | 第48-49页 |
| 1.1 主要实验试剂 | 第48页 |
| 1.2 主要设备及仪器 | 第48-49页 |
| 2. 实验方法 | 第49-50页 |
| 2.1 Gly_3-E(2PEG4-RGD-WH701)的合成 | 第49页 |
| 2.2 NOTA-Gly_3-E (2PEG4-RGD-WH701) | 第49页 |
| 2.3 [~(18)F]AlF-NOTA-G3-E(2P4-RGD-WH701)的标记 | 第49-50页 |
| 2.4 [~(18)F]AlF-NOTA-G3-E(2P4-RGD-WH701)脂水分配系数(logP)的测定 | 第50页 |
| 3. 实验结果 | 第50-52页 |
| 第六章、TNFR1及整合素α_vβ_3在人源性乳腺癌细胞株MCF-7上的表达 | 第52-56页 |
| 1. 实验材料 | 第52-53页 |
| 1.1 实验细胞 | 第52页 |
| 1.2 主要实验试剂 | 第52-53页 |
| 1.3 主要实验设备 | 第53页 |
| 2. 实验方法 | 第53-54页 |
| 2.1 细胞培养 | 第53页 |
| 2.2 细胞蛋白的提取、蛋白浓度测定以及Western Blot | 第53页 |
| 2.3 细胞荧光实验 | 第53-54页 |
| 3. 实验结果 | 第54-56页 |
| 3.1 Western Blot结果 | 第54-55页 |
| 3.2 细胞免疫荧光 | 第55-56页 |
| 第七章、融合肽~(18)F-NOTA-Gly3-E (2PEG4-RGD-WH701)在荷瘤鼠体内实验 | 第56-64页 |
| 1. 实验材料 | 第56-57页 |
| 1.1 实验细胞 | 第56页 |
| 1.2 主要实验试剂 | 第56页 |
| 1.3 主要实验仪器 | 第56-57页 |
| 2. 实验方法 | 第57-58页 |
| 2.1 荷瘤裸鼠模型的建立 | 第57页 |
| 2.2 荷瘤鼠PET/CT显像 | 第57-58页 |
| 3. 统计学分析 | 第58-59页 |
| 4. 实验结果 | 第59-64页 |
| 4.1 60分钟动态显像 | 第59-60页 |
| 4.2 [~(18)F]-NOTA-Gly3-E(2PEG4-RGD-WH701)、[~(18)F] -NOTA-WH701、[~(18)F] -NOTA-RGD在荷MCF-7瘤鼠体内PET/CT显像 | 第60-64页 |
| 第八章、MCF-7乳腺癌肿瘤TNFR1受体及整合素αvβ3受体表达 | 第64-66页 |
| 1. 实验材料 | 第64页 |
| 1.1 主要实验试剂 | 第64页 |
| 1.2 主要实验仪器 | 第64页 |
| 2. 实验方法 | 第64-65页 |
| 2.1 组织石蜡切片 | 第64-65页 |
| 2.2 肿瘤切片免疫组织化学染色 | 第65页 |
| 3. 实验结果 | 第65-66页 |
| 3.1 MCF-7肿瘤组织免疫化学染色 | 第65-66页 |
| 讨论 | 第66-70页 |
| 结论 | 第70-71页 |
| 本研究存在的问题 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
