致谢 | 第4-9页 |
摘要 | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-25页 |
1 玉米生产概况 | 第10-11页 |
2 玉米主要病害危害情况 | 第11-12页 |
3 玉米矮花叶病研究进展 | 第12-16页 |
3.1 玉米矮花叶病的发生与危害 | 第12-13页 |
3.2 病毒研究 | 第13-15页 |
3.2.1 SCMV病毒的结构 | 第13页 |
3.2.2 病毒的传播和移动 | 第13-14页 |
3.2.3 植物抗病毒分子机制 | 第14-15页 |
3.3 玉米矮花叶病发病规律 | 第15页 |
3.4 玉米矮花叶病抗性遗传研究 | 第15-16页 |
4 玉米抗病基因的克隆 | 第16-22页 |
4.1 转座子标签技术 | 第17-18页 |
4.2 图位克隆 | 第18-19页 |
4.3 同源克隆 | 第19-20页 |
4.4 关联分析 | 第20-22页 |
4.4.1 研究概况 | 第20-21页 |
4.4.2 连锁不平衡 (Linkage disequilibrium,LD) | 第21-22页 |
4.4.3 关联分析的策略及影响因素 | 第22页 |
5 目的意义及技术路线 | 第22-25页 |
5.1 目的与意义 | 第22-24页 |
5.2 技术路线 | 第24-25页 |
第二章 玉米矮花叶病抗性位点的全基因组关联分析 | 第25-31页 |
1 材料与方法 | 第25-26页 |
1.1 材料与种植方法 | 第25页 |
1.2 表型性状鉴定 | 第25页 |
1.2.1 接种方法 | 第25页 |
1.2.2 表型鉴定方法 | 第25页 |
1.3 SNP基因型鉴定 | 第25-26页 |
1.4 表型数据分析 | 第26页 |
1.5 基因型数据分析 | 第26页 |
1.6 关联分析 | 第26页 |
1.7 候选基因分析 | 第26页 |
2 结果与分析 | 第26-30页 |
2.1 玉米矮花叶病抗性分析 | 第26页 |
2.2 玉米矮花叶病抗性位点分析 | 第26-30页 |
2.3 第三染色体抗性位点的候选基因分析 | 第30页 |
3 小结 | 第30-31页 |
第三章 候选基因 ZmABP1和ZmGAP的表达分析 | 第31-41页 |
1 材料 | 第31-32页 |
1.1 实验材料 | 第31-32页 |
1.2 病原菌 | 第32页 |
1.3 试剂 | 第32页 |
1.4 用于荧光定量PCR的引物序列 | 第32页 |
2 方法 | 第32-37页 |
2.1 玉米植株培养方法 | 第32-33页 |
2.1.1 种植方法 | 第32-33页 |
2.1.2 接种方法 | 第33页 |
2.1.3 取样和调查方法 | 第33页 |
2.2 RNA的提取和纯化及反转录 | 第33-35页 |
2.2.1 玉米基因组RNA提取 | 第33-34页 |
2.2.2 RNA质量检测 | 第34页 |
2.2.3 玉米基因组RNA纯化 | 第34页 |
2.2.4 合成cDNA第一链 | 第34-35页 |
2.2.5 cDNA第一链的质量检测 | 第35页 |
2.3 实时荧光定量PCR | 第35-37页 |
2.3.1 SYBR Green I法 | 第35-36页 |
2.3.2 RT-QPCR反应体系 | 第36页 |
2.3.3 RT-QPCR反应程序 | 第36页 |
2.3.4 RT-QPCR数据分析 | 第36-37页 |
3 结果与分析 | 第37-40页 |
3.1 近等基因系的抗性表现 | 第37页 |
3.2 候选基因的表达分析 | 第37-40页 |
4 小结 | 第40-41页 |
第四章 候选基因 ZmABP1在抗感自交系中的序列差异分析 | 第41-59页 |
1 材料 | 第41-42页 |
1.1 实验材料 | 第41页 |
1.2 菌株和载体 | 第41页 |
1.3 试剂 | 第41页 |
1.4 培养基和试剂配制 | 第41-42页 |
2 实验方法 | 第42-48页 |
2.1 ZmABP1基因编码序列的克隆及载体构建 | 第42-47页 |
2.1.1 RNA提取并纯化及第一链合成检测 | 第42页 |
2.1.2 cDNA编码序列的扩增 | 第42-43页 |
2.1.3 切胶回收目的基因片段 | 第43-44页 |
2.1.4 连接T载体并转化大肠杆菌DH5α感受态细胞 | 第44页 |
2.1.5 菌落PCR检测 | 第44页 |
2.1.6 ZmABP1基因序列测序与分析 | 第44-45页 |
2.1.7 提取质粒 | 第45页 |
2.1.8 ZmABP1基因过表达载体的构建 | 第45-47页 |
2.2 ZmABP1基因及上游序列的克隆 | 第47-48页 |
2.2.1 基因组DNA提取 | 第47页 |
2.2.2 ZmABP1基因及其上游序列的扩增 | 第47-48页 |
3 结果与分析 | 第48-58页 |
3.1 总RNA的提取与c DNA第一链的合成 | 第48页 |
3.2 ZmABP1基因的克隆 | 第48-49页 |
3.3 ZmABP1基因的c DNA编码序列分析 | 第49-50页 |
3.4 ABP1序列结构域和同源性分析 | 第50-51页 |
3.5 ZmABP1基因过表达载体的构建 | 第51-52页 |
3.6 ZmABP1基因的DNA序列及其上游序列分析 | 第52-58页 |
3.6.1 测序结果分析 | 第52-53页 |
3.6.2 比对分析 | 第53-58页 |
4 小结 | 第58-59页 |
第五章 结论与讨论 | 第59-61页 |
1 玉米矮花叶病抗病基因Scmv2的鉴定与分离 | 第59-60页 |
2 植物病毒的检测 | 第60页 |
3 下一步研究计划 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-69页 |
ABSTRACT | 第69-70页 |