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玉米矮花叶病抗病基因Rscmv2的鉴定和分离

致谢第4-9页
摘要第9-10页
第一章 文献综述第10-25页
    1 玉米生产概况第10-11页
    2 玉米主要病害危害情况第11-12页
    3 玉米矮花叶病研究进展第12-16页
        3.1 玉米矮花叶病的发生与危害第12-13页
        3.2 病毒研究第13-15页
            3.2.1 SCMV病毒的结构第13页
            3.2.2 病毒的传播和移动第13-14页
            3.2.3 植物抗病毒分子机制第14-15页
        3.3 玉米矮花叶病发病规律第15页
        3.4 玉米矮花叶病抗性遗传研究第15-16页
    4 玉米抗病基因的克隆第16-22页
        4.1 转座子标签技术第17-18页
        4.2 图位克隆第18-19页
        4.3 同源克隆第19-20页
        4.4 关联分析第20-22页
            4.4.1 研究概况第20-21页
            4.4.2 连锁不平衡 (Linkage disequilibrium,LD)第21-22页
            4.4.3 关联分析的策略及影响因素第22页
    5 目的意义及技术路线第22-25页
        5.1 目的与意义第22-24页
        5.2 技术路线第24-25页
第二章 玉米矮花叶病抗性位点的全基因组关联分析第25-31页
    1 材料与方法第25-26页
        1.1 材料与种植方法第25页
        1.2 表型性状鉴定第25页
            1.2.1 接种方法第25页
            1.2.2 表型鉴定方法第25页
        1.3 SNP基因型鉴定第25-26页
        1.4 表型数据分析第26页
        1.5 基因型数据分析第26页
        1.6 关联分析第26页
        1.7 候选基因分析第26页
    2 结果与分析第26-30页
        2.1 玉米矮花叶病抗性分析第26页
        2.2 玉米矮花叶病抗性位点分析第26-30页
        2.3 第三染色体抗性位点的候选基因分析第30页
    3 小结第30-31页
第三章 候选基因 ZmABP1和ZmGAP的表达分析第31-41页
    1 材料第31-32页
        1.1 实验材料第31-32页
        1.2 病原菌第32页
        1.3 试剂第32页
        1.4 用于荧光定量PCR的引物序列第32页
    2 方法第32-37页
        2.1 玉米植株培养方法第32-33页
            2.1.1 种植方法第32-33页
            2.1.2 接种方法第33页
            2.1.3 取样和调查方法第33页
        2.2 RNA的提取和纯化及反转录第33-35页
            2.2.1 玉米基因组RNA提取第33-34页
            2.2.2 RNA质量检测第34页
            2.2.3 玉米基因组RNA纯化第34页
            2.2.4 合成cDNA第一链第34-35页
            2.2.5 cDNA第一链的质量检测第35页
        2.3 实时荧光定量PCR第35-37页
            2.3.1 SYBR Green I法第35-36页
            2.3.2 RT-QPCR反应体系第36页
            2.3.3 RT-QPCR反应程序第36页
            2.3.4 RT-QPCR数据分析第36-37页
    3 结果与分析第37-40页
        3.1 近等基因系的抗性表现第37页
        3.2 候选基因的表达分析第37-40页
    4 小结第40-41页
第四章 候选基因 ZmABP1在抗感自交系中的序列差异分析第41-59页
    1 材料第41-42页
        1.1 实验材料第41页
        1.2 菌株和载体第41页
        1.3 试剂第41页
        1.4 培养基和试剂配制第41-42页
    2 实验方法第42-48页
        2.1 ZmABP1基因编码序列的克隆及载体构建第42-47页
            2.1.1 RNA提取并纯化及第一链合成检测第42页
            2.1.2 cDNA编码序列的扩增第42-43页
            2.1.3 切胶回收目的基因片段第43-44页
            2.1.4 连接T载体并转化大肠杆菌DH5α感受态细胞第44页
            2.1.5 菌落PCR检测第44页
            2.1.6 ZmABP1基因序列测序与分析第44-45页
            2.1.7 提取质粒第45页
            2.1.8 ZmABP1基因过表达载体的构建第45-47页
        2.2 ZmABP1基因及上游序列的克隆第47-48页
            2.2.1 基因组DNA提取第47页
            2.2.2 ZmABP1基因及其上游序列的扩增第47-48页
    3 结果与分析第48-58页
        3.1 总RNA的提取与c DNA第一链的合成第48页
        3.2 ZmABP1基因的克隆第48-49页
        3.3 ZmABP1基因的c DNA编码序列分析第49-50页
        3.4 ABP1序列结构域和同源性分析第50-51页
        3.5 ZmABP1基因过表达载体的构建第51-52页
        3.6 ZmABP1基因的DNA序列及其上游序列分析第52-58页
            3.6.1 测序结果分析第52-53页
            3.6.2 比对分析第53-58页
    4 小结第58-59页
第五章 结论与讨论第59-61页
    1 玉米矮花叶病抗病基因Scmv2的鉴定与分离第59-60页
    2 植物病毒的检测第60页
    3 下一步研究计划第60-61页
参考文献第61-69页
ABSTRACT第69-70页

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