缩略语表 | 第6-8页 |
中文摘要 | 第8-11页 |
ABSTRACT | 第11-14页 |
前言 | 第15-17页 |
文献回顾 | 第17-26页 |
第一部分 PA1在小鼠睾丸发育过程中的表达及定位 | 第26-39页 |
1 材料 | 第26-29页 |
1.1 动物 | 第26-27页 |
1.2 引物 | 第27页 |
1.3 试剂 | 第27-28页 |
1.4 仪器 | 第28-29页 |
2 方法 | 第29-34页 |
2.1 小鼠睾丸组织RNA的提取 | 第29页 |
2.2 RT-PCR | 第29-31页 |
2.3 qPCR | 第31-32页 |
2.4 睾丸取材和包埋 | 第32-33页 |
2.5 免疫组织化学染色 | 第33-34页 |
2.6 免疫荧光双标染色 | 第34页 |
3 结果 | 第34-37页 |
3.1 Pa1mRNA在不同发育阶段小鼠睾丸组织中的表达 | 第34-35页 |
3.2 PA1蛋白在不同发育阶段小鼠睾丸组织中的定位 | 第35-37页 |
4 讨论 | 第37-39页 |
第二部分 SC-PA1KO鼠生殖表型的改变 | 第39-52页 |
1 材料 | 第39-41页 |
1.1 动物 | 第39-40页 |
1.2 引物 | 第40页 |
1.3 试剂 | 第40页 |
1.4 仪器 | 第40-41页 |
2 方法 | 第41-44页 |
2.1 小鼠的饲养和繁殖 | 第41页 |
2.2 基因型鉴定 | 第41-43页 |
2.3 睾丸称重拍照 | 第43页 |
2.4 附睾尾部精子观察 | 第43页 |
2.5 不同年龄段小鼠睾丸组织HE染色 | 第43页 |
2.6 免疫组织化学染色 | 第43-44页 |
2.7 成年小鼠睾丸组织TUNEL染色 | 第44页 |
2.8 血清FSH、LH和T的测定 | 第44页 |
3 结果 | 第44-50页 |
3.1 小鼠基因型鉴定 | 第44-45页 |
3.2 雄性小鼠生殖力变化 | 第45页 |
3.3 睾丸的体积和重量 | 第45-46页 |
3.4 附睾尾部精子观察 | 第46页 |
3.5 不同年龄段小鼠睾丸组织HE染色 | 第46-48页 |
3.6 支持细胞和精原细胞数目 | 第48-49页 |
3.7 血清FSH、LH和T的含量 | 第49-50页 |
4 讨论 | 第50-52页 |
第三部分 SC-PA1KO鼠支持细胞功能的改变 | 第52-63页 |
1 材料 | 第52-55页 |
1.1 动物 | 第52页 |
1.2 引物 | 第52-53页 |
1.3 试剂 | 第53-54页 |
1.4 仪器 | 第54-55页 |
2 方法 | 第55-58页 |
2.1 尾静脉注射伊文思蓝 | 第55页 |
2.2 透射电镜 | 第55-56页 |
2.3 小鼠原代睾丸支持细胞提取 | 第56页 |
2.4 支持细胞总RNA的提取 | 第56-57页 |
2.5 qRT-PCR | 第57页 |
2.6 人重组BMP2蛋白腹腔注射 | 第57页 |
2.7 HE染色 | 第57-58页 |
3 结果 | 第58-60页 |
3.1 血睾屏障的功能变化 | 第58页 |
3.2 支持细胞超微结构的改变 | 第58-59页 |
3.4 连接蛋白、性激素和营养相关细胞因子mRNA的表达 | 第59-60页 |
3.5 BMP2显著改善SC-PA1KO鼠睾丸的发育 | 第60页 |
4 讨论 | 第60-63页 |
小结 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-73页 |
研究成果 | 第73-74页 |
致谢 | 第74页 |