摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-7页 |
第1章 引言 | 第11-15页 |
第2章 实验材料与方法 | 第15-32页 |
2.1 实验材料 | 第15-20页 |
2.1.1 细胞系 | 第15页 |
2.1.2 肝脏组织标本 | 第15页 |
2.1.3 主要耗材 | 第15-16页 |
2.1.4 主要试剂 | 第16-17页 |
2.1.5 主要仪器和设备 | 第17-18页 |
2.1.6 基因信息及引物 | 第18-19页 |
2.1.7 溶液配制 | 第19-20页 |
2.1.8 生物信息学及数据分析软件 | 第20页 |
2.2 实验方法 | 第20-32页 |
2.2.1 细胞培养 | 第20-22页 |
2.2.2 肝癌组织和细胞总RNA提取及荧光定量PCR | 第22-25页 |
2.2.3 功能实验 | 第25-26页 |
2.2.4 载体构建 | 第26-27页 |
2.2.5 荧光素酶报告基因实验 | 第27-28页 |
2.2.6 总蛋白提取及蛋白免疫印迹 | 第28-31页 |
2.2.7 统计学方法 | 第31-32页 |
第3章 结果 | 第32-47页 |
3.1 PCAT-1在肝癌表达情况 | 第32-34页 |
3.1.1 PCAT-1在肝癌细胞中的表达 | 第32页 |
3.1.2 PCAT-1在肝癌细胞中的表达 | 第32-34页 |
3.2 PCAT-1对肝癌细胞侵袭转移的影响 | 第34-39页 |
3.2.1 转染效率检测 | 第34-35页 |
3.2.2 siRNA转染对肝癌细胞中PCAT-1相对表达量的影响 | 第35-36页 |
3.2.3 PCAT-1对肝癌细胞迁移的影响 | 第36-38页 |
3.2.4 PCAT-1对肝癌细胞侵袭的影响 | 第38-39页 |
3.3 PCAT-1竞争性结合MIR-129-5P | 第39-42页 |
3.3.1 预测与PCAT-1竞争性结合的miR-129-5p | 第39页 |
3.3.2 miR-129-5p对肝癌细胞中PCAT-1表达量的影响 | 第39-40页 |
3.3.3 PCAT-1与miR-129-5p直接结合 | 第40-42页 |
3.4 PCAT-1经MIR-129-5P/HMGB1参与肝癌的侵袭转移 | 第42-47页 |
3.4.1 预测miR-129-5p的作用靶点 | 第42-43页 |
3.4.2 miR-129-5p对肝癌细胞中HMGB1表达量的影响 | 第43-44页 |
3.4.3 HMGB1与miR-129-5p直接结合 | 第44-45页 |
3.4.4 PCAT-1与HMGB1的关系 | 第45-47页 |
第4章 讨论 | 第47-51页 |
4.1 PCAT-1在肝癌中高表达 | 第47-48页 |
4.2 PCAT-1经MIR-129-5P促进肝癌的侵袭转移 | 第48-49页 |
4.3 PCAT-1经MIR-129-5P/HMGB1促进肝癌的侵袭转移 | 第49-51页 |
第5章 结论 | 第51-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-56页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第56-57页 |
综述 | 第57-64页 |
参考文献 | 第62-64页 |