| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-24页 |
| 1.1 喜树 | 第11-16页 |
| 1.1.1 喜树简介 | 第11页 |
| 1.1.2 喜树的应用价值 | 第11-12页 |
| 1.1.3 研究进展 | 第12-13页 |
| 1.1.4 喜树碱及其应用价值 | 第13-14页 |
| 1.1.5 喜树碱代谢途径 | 第14-16页 |
| 1.2 组织培养及其影响因素 | 第16-18页 |
| 1.2.1 组织培养定义 | 第16页 |
| 1.2.2 实现植物再生的途径 | 第16页 |
| 1.2.3 影响因素 | 第16-18页 |
| 1.3 水杨酸与水杨酸转运蛋白 | 第18-19页 |
| 1.3.1 水杨酸及其生理意义 | 第18页 |
| 1.3.2 水杨酸与植物的次生代谢 | 第18页 |
| 1.3.3 转运蛋白 | 第18-19页 |
| 1.3.4 水杨酸转运基因的发现和功能 | 第19页 |
| 1.4 喜树的悬浮培养 | 第19-20页 |
| 1.5 愈伤组织的诱导与分化 | 第20-21页 |
| 1.6 木本植物遗传转化 | 第21-23页 |
| 1.6.1 木本植物遗传转化特点 | 第21页 |
| 1.6.2 影响木本植物遗传转化的因素 | 第21-22页 |
| 1.6.3 木本植物转化系统及方法 | 第22页 |
| 1.6.4 增加喜树中喜树碱含量的代谢工程 | 第22页 |
| 1.6.5 SAT基因的遗传转化 | 第22-23页 |
| 1.7 本实验的目的与意义 | 第23-24页 |
| 第二章 喜树再生体系的构建 | 第24-33页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第24-26页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第24页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第25-26页 |
| 2.2 试验方法 | 第26-28页 |
| 2.2.1 激素的配制 | 第26页 |
| 2.2.2 培养基的配制 | 第26页 |
| 2.2.3 喜树的组织培养方法 | 第26-27页 |
| 2.2.4 培养基的改良 | 第27页 |
| 2.2.5 无菌苗的炼苗移栽 | 第27-28页 |
| 2.3 结果与分析 | 第28-32页 |
| 2.3.1 外植体消毒 | 第28-29页 |
| 2.3.2 组培苗的生根诱导 | 第29页 |
| 2.3.3 组培苗的芽苗增殖诱导 | 第29-30页 |
| 2.3.4 培养基的改良 | 第30-31页 |
| 2.3.5 无菌苗的炼苗移栽 | 第31-32页 |
| 2.4 小结 | 第32-33页 |
| 第三章 水杨酸在喜树悬浮细胞培养中的作用 | 第33-51页 |
| 3.1 实验材料与仪器 | 第33-35页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第33页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第33-34页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第34-35页 |
| 3.2 试验方法 | 第35-43页 |
| 3.2.1 培养基 | 第35-36页 |
| 3.2.2 喜树愈伤组织的诱导 | 第36页 |
| 3.2.3 喜树悬浮细胞体系的构建 | 第36页 |
| 3.2.4 细胞再生能力的鉴定 | 第36-37页 |
| 3.2.5 培养基的改良 | 第37页 |
| 3.2.6 HPLC法检测喜树碱含量 | 第37-38页 |
| 3.2.7 q-RTPCR检测SA对喜树悬浮细胞关键酶基因表达量的影响 | 第38-40页 |
| 3.2.8 喜树悬浮细胞RNA的提取及反转录 | 第40-43页 |
| 3.2.9 实时荧光定量PCR检测 | 第43页 |
| 3.3 结果与分析 | 第43-50页 |
| 3.3.1 两种不同培养基上喜树愈伤的诱导对比 | 第43-44页 |
| 3.3.2 喜树愈伤悬浮细胞体系的构建 | 第44-45页 |
| 3.3.3 液相检测喜树不同部位CPT含量 | 第45-46页 |
| 3.3.4 喜树悬浮细胞RNA的提取 | 第46-47页 |
| 3.3.5 q-RT-PCR检测SA对喜树悬浮细胞基因表达量的影响 | 第47-50页 |
| 3.4 小结 | 第50-51页 |
| 第四章 转CASAT喜树的初步构建 | 第51-61页 |
| 4.1 材料与仪器 | 第51-52页 |
| 4.1.1 材料 | 第51页 |
| 4.1.2 菌种 | 第51页 |
| 4.1.3 试剂 | 第51-52页 |
| 4.1.4 仪器 | 第52页 |
| 4.2 实验方法 | 第52-55页 |
| 4.2.1 试剂的处理 | 第52页 |
| 4.2.2 培养基 | 第52-53页 |
| 4.2.3 细菌培养条件 | 第53页 |
| 4.2.4 农杆菌的培养 | 第53页 |
| 4.2.5 预培养 | 第53页 |
| 4.2.6 侵染 | 第53-54页 |
| 4.2.7 脱菌(外植体清洗办法) | 第54页 |
| 4.2.8 诱导抗性愈伤组织 | 第54页 |
| 4.2.9 抗性愈伤组织的筛选 | 第54页 |
| 4.2.10 生根培养 | 第54-55页 |
| 4.2.11 芽苗增殖与壮苗培养 | 第55页 |
| 4.3 结果与分析 | 第55-59页 |
| 4.3.1 外植体的预培养 | 第55页 |
| 4.3.2 外植体的侵染 | 第55-56页 |
| 4.3.3 侵染后外植体的脱菌 | 第56-57页 |
| 4.3.4 抗性愈伤组织的诱导及筛选 | 第57-58页 |
| 4.3.5 抗性愈伤组织的生根分化 | 第58-59页 |
| 4.3.6 抗性愈伤的芽苗增殖分化 | 第59页 |
| 4.4 小结 | 第59-61页 |
| 第五章 结论与展望 | 第61-63页 |
| 5.1 结论 | 第61-62页 |
| 5.2 展望 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-68页 |
| 致谢 | 第68页 |