| 致谢 | 第4-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-17页 |
| 1.1 SCAP/SREBP脂类合成信号通路 | 第8-12页 |
| 1.1.1 SREBP结构与功能 | 第8-9页 |
| 1.1.2 SCAP结构与功能 | 第9-10页 |
| 1.1.3 SCAP介导的SREBPs活化过程 | 第10-12页 |
| 1.2 脂类合成关键基因(FASN)的研究进展 | 第12-15页 |
| 1.2.1 脂肪酸合成机理及调控 | 第12-13页 |
| 1.2.2 脂肪酸合成酶(FASN)的结构与功能 | 第13-14页 |
| 1.2.3 FASN在SREBP信号通路中的研究与意义 | 第14-15页 |
| 1.3 脂类代谢疾病研究进展 | 第15-17页 |
| 2 引言 | 第17-18页 |
| 3 材料与方法 | 第18-29页 |
| 3.1 材料 | 第18-19页 |
| 3.1.1 细胞 | 第18页 |
| 3.1.2 细胞培养试剂 | 第18页 |
| 3.1.3 试剂 | 第18页 |
| 3.1.4 仪器 | 第18-19页 |
| 3.2 方法 | 第19-29页 |
| 3.2.1 pcDNA3.1-SCAP真核表达载体的构建 | 第19-21页 |
| 3.2.2 实时荧光定量PCR | 第21-23页 |
| 3.2.3 免疫荧光 | 第23页 |
| 3.2.4 FASN基因启动子荧光素酶报告基因载体构建 | 第23-25页 |
| 3.2.5 荧光素酶报告基因系统FASN启动子活性的检测 | 第25-26页 |
| 3.2.6 蛋白免疫印迹 | 第26-28页 |
| 3.2.7 尼罗红染色 | 第28页 |
| 3.2.8 数据分析 | 第28-29页 |
| 4 结果与分析 | 第29-37页 |
| 4.1 SCAP基因克隆,载体构建及基因表达 | 第29-30页 |
| 4.1.1 SCAP基因的克隆 | 第29页 |
| 4.1.2 pcDNA3.1-SCAP真核表达载体的构建及鉴定 | 第29页 |
| 4.1.3 SCAP基因在肝脏细胞中mRNA表达情况 | 第29-30页 |
| 4.2 SCAP及SREBP1蛋白表达及在肝脏细胞中的定位 | 第30-31页 |
| 4.2.1 SCAP及核SREBP1蛋白表达情况 | 第30页 |
| 4.2.2 SREBP1及SCAP在肝脏细胞中的共定位 | 第30-31页 |
| 4.3 FASN基因启动子的克隆及转录调控分析 | 第31-34页 |
| 4.3.1 FASN基因启动子的克隆 | 第31页 |
| 4.3.2 PGL3-FASN报告基因载体的构建及鉴定 | 第31-32页 |
| 4.3.3 FASN基因启动子生物信息学分析 | 第32-33页 |
| 4.3.4 不同的处理因素对FASN启动子的转录调控作用 | 第33页 |
| 4.3.5 SCAP依赖SREBP1对FASN启动子的剂量转录调控作用 | 第33-34页 |
| 4.4 SCAP/SREBP1对SREBP1基因、FASN基因表达及脂滴合成的影响 | 第34-37页 |
| 4.4.1 SREBP1依赖SCAP促进SREBP1基因的表达 | 第34页 |
| 4.4.2 SREBP1依赖SCAP促进FASN基因的表达 | 第34-35页 |
| 4.4.3 SCAP/SREBP1对脂质合成的影响 | 第35-37页 |
| 5 讨论与结论 | 第37-40页 |
| 5.1 讨论 | 第37-39页 |
| 5.2 结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-48页 |
| 英文摘要 | 第48-49页 |
