摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
前言 | 第11-14页 |
第一章 初步探索PTEN与MOB1表达相关性 | 第14-27页 |
1.1 材料和试剂 | 第15-16页 |
1.1.1 实验动物和细胞 | 第15页 |
1.1.2 主要材料 | 第15页 |
1.1.3 主要仪器 | 第15-16页 |
1.1.4 主要试剂 | 第16页 |
1.2 方法 | 第16-23页 |
1.2.1 细胞复苏、培养及传代 | 第16-17页 |
1.2.2 定量PCR | 第17-19页 |
1.2.3 Western blot | 第19-21页 |
1.2.4 免疫荧光 | 第21-22页 |
1.2.5 细胞转染 | 第22页 |
1.2.6 筛选稳转细胞 | 第22页 |
1.2.7 统计学分析 | 第22-23页 |
1.3 结果 | 第23-25页 |
1.3.1 PTEN、MOB1在小鼠脊髓和大脑发育过程中以及鼠源细胞系中的表达模式 | 第23页 |
1.3.2 PTEN抑制后增加PC12和Neuro2A细胞中MOB1蛋白表达 | 第23-24页 |
1.3.3 MOB1促进PC12细胞轴突伸长 | 第24-25页 |
1.4 讨论 | 第25-27页 |
第二章 PTEN通过GSK3β调控神经元内MOB1蛋白稳定性 | 第27-33页 |
2.1 材料和试剂 | 第27-28页 |
2.1.1 主要材料 | 第27-28页 |
2.1.2 主要仪器 | 第28页 |
2.1.3 主要试剂 | 第28页 |
2.2 方法 | 第28页 |
2.2.1 细胞复苏、培养及传代 | 第28页 |
2.2.2 Western blot | 第28页 |
2.2.3 细胞转染 | 第28页 |
2.2.4 统计学分析 | 第28页 |
2.3 结果 | 第28-31页 |
2.3.1 PTEN通过PI3K/PDK1/Akt信号通路调控MOB1蛋白水平 | 第28-29页 |
2.3.2 GSK3β调控MOB1蛋白稳定性 | 第29-30页 |
2.3.3 PTEN通过GSK3β调控MOB1蛋白稳定性 | 第30-31页 |
2.4 讨论 | 第31-33页 |
第三章 GSK3Β 调控MOB1磷酸化和泛素化降解 | 第33-40页 |
3.1 材料和试剂 | 第33-34页 |
3.1.1 主要材料 | 第33-34页 |
3.1.2 主要仪器 | 第34页 |
3.1.3 主要试剂 | 第34页 |
3.2 方法 | 第34-35页 |
3.2.1 细胞复苏、培养及传代 | 第34页 |
3.2.2 Western blot | 第34页 |
3.2.3 免疫共沉淀反应(Co-IP) | 第34-35页 |
3.2.4 细胞转染 | 第35页 |
3.2.5 免疫荧光 | 第35页 |
3.2.6 统计学分析 | 第35页 |
3.3 结果 | 第35-38页 |
3.3.1 GSK3β 与MOB1结合并调控其泛素化降解过程 | 第35-36页 |
3.3.2 GSK3β 介导MOB1磷酸化位点及其泛素化降解影响 | 第36-37页 |
3.3.3 GSK3β 介导的MOB1磷酸化位点对PC12细胞轴突伸长的影响 | 第37-38页 |
3.4 讨论 | 第38-40页 |
第四章 PTEN-MOB1调控小鼠脊髓损伤后轴突伸长和功能恢复 | 第40-46页 |
4.1 材料和试剂 | 第40-41页 |
4.1.1 主要材料 | 第40页 |
4.1.2 主要仪器 | 第40页 |
4.1.3 主要试剂 | 第40-41页 |
4.2 方法 | 第41-42页 |
4.2.1 小鼠脊髓撞击损伤模型构建 | 第41页 |
4.2.2 小鼠脊髓慢病毒原位注射 | 第41页 |
4.2.3 足迹分析(Footprint analysis) | 第41页 |
4.2.4 小鼠后肢运动功能评分(BMS score) | 第41页 |
4.2.5 冰冻切片免疫荧光染色 | 第41-42页 |
4.2.6 统计学分析 | 第42页 |
4.3 结果 | 第42-44页 |
4.3.1 PTEN-MOB1轴对小鼠SCI后运动功能恢复的影响 | 第42-43页 |
4.3.2 PTEN-MOB1轴对小鼠SCI后轴突伸长的影响 | 第43-44页 |
4.4 讨论 | 第44-46页 |
结论与展望 | 第46-47页 |
一、结论 | 第46页 |
二、展望 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-53页 |
英文缩略语表 | 第53-54页 |
综述 | 第54-63页 |
参考文献 | 第58-63页 |
攻读硕士期间发表论文 | 第63-64页 |
致谢 | 第64-65页 |