| 缩略语表 | 第6-8页 |
| 中文摘要 | 第8-12页 |
| Abstract | 第12-15页 |
| 前言 | 第16-18页 |
| 文献回顾 | 第18-30页 |
| 第一部分mi R-19a/b在去甲基化试剂 5-aza-dc诱导胃癌细胞多药耐药中的作用 | 第30-45页 |
| 1 材料 | 第30-32页 |
| 1.1 细胞系 | 第30页 |
| 1.2 主要试剂 | 第30-31页 |
| 1.3 主要仪器 | 第31页 |
| 1.4 溶液配制 | 第31-32页 |
| 2 方法 | 第32-37页 |
| 2.1 细胞培养 | 第32-33页 |
| 2.2 细胞瞬时转染及鉴定 | 第33-35页 |
| 2.3 耐药功能实验 | 第35-36页 |
| 2.4 mi RNA芯片 | 第36页 |
| 2.5 去甲基化药物处理胃癌细胞 | 第36-37页 |
| 3 结果 | 第37-42页 |
| 3.1 去甲基化试剂 5-aza-dc诱导胃癌细胞耐药性增高 | 第37页 |
| 3.2 5-aza-dc调控胃癌细胞的mi RNA表达 | 第37-38页 |
| 3.3 q RT-PCR验证 5-aza-dc促进mi R-19a/b表达的作用 | 第38-39页 |
| 3.4 mi R-19a/b启动子区域的甲基化位点 | 第39页 |
| 3.5 mi R-19a/b在胃癌细胞多药耐药中的作用 | 第39-41页 |
| 3.6 mi R-19a/b介导 5-aza-dc促进胃癌细胞MDR的作用 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-45页 |
| 第二部分mi R-19a/b对Me CP2的靶向调节 | 第45-53页 |
| 1 材料 | 第45-46页 |
| 1.1 细胞系 | 第45页 |
| 1.2 主要试剂 | 第45-46页 |
| 1.3 主要仪器 | 第46页 |
| 1.4 主要溶液配制 | 第46页 |
| 2 方法 | 第46-48页 |
| 2.1 荧光素酶检测分析 | 第46-47页 |
| 2.2 Western blot | 第47-48页 |
| 2.3 细胞瞬时转染 | 第48页 |
| 3 结果 | 第48-51页 |
| 3.1 生物信息学预测mi R-19a/b的可能靶分子 | 第48-49页 |
| 3.2 荧光素酶报告基因实验结果 | 第49页 |
| 3.3 Western blot细胞水平验证mi R-19a/b靶分子 | 第49-50页 |
| 3.4 Me CP2在胃癌耐药细胞中的表达低于亲本细胞 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-53页 |
| 第三部分Me CP2在去甲基化试剂 5-aza-dc诱导胃癌细胞多药耐药中的作用 | 第53-61页 |
| 1 材料 | 第53-54页 |
| 1.1 细胞系 | 第53页 |
| 1.2 主要试剂 | 第53-54页 |
| 1.3 主要仪器 | 第54页 |
| 1.4 主要溶液配制 | 第54页 |
| 2 方法 | 第54-55页 |
| 2.1 Me CP2过表达载体的构建 | 第54页 |
| 2.2 Me CP2 si RNA构建 | 第54页 |
| 2.3 Me CP2 si RNA的瞬时转染 | 第54页 |
| 2.4 过表达载体的瞬时转染 | 第54-55页 |
| 2.5 Western blot | 第55页 |
| 2.6 q RT-PCR | 第55页 |
| 2.7 MTT实验 | 第55页 |
| 3 结果 | 第55-59页 |
| 3.1 去甲基化试剂对Me CP2的表达影响 | 第55-56页 |
| 3.2 Me CP2过表达载体测序结果 | 第56页 |
| 3.3 瞬时转染Me CP2过表达载体及转染效率验证 | 第56-57页 |
| 3.4 转染Me CP2si RNA及转染效率验证 | 第57页 |
| 3.5 MTT实验 | 第57-59页 |
| 3.6 Me CP2介导甲基化调控作用 | 第59页 |
| 4 讨论 | 第59-61页 |
| 第四部分mi R-19a/b与Me CP2在胃癌组织中的表达及临床意义 | 第61-70页 |
| 1 材料 | 第61-62页 |
| 1.1 胃癌及癌旁组织 | 第61页 |
| 1.2 主要试剂 | 第61-62页 |
| 1.3 主要仪器 | 第62页 |
| 2 方法 | 第62-63页 |
| 2.1 原位杂交 | 第62页 |
| 2.2 免疫组化 | 第62-63页 |
| 2.3 结果评分 | 第63页 |
| 3 结果 | 第63-69页 |
| 3.1 mi R-19a/b在胃癌组织中的表达高于癌旁组织 | 第63-64页 |
| 3.2 mi R-19a/b与临床病理参数的关系 | 第64-65页 |
| 3.3 Me CP2在胃癌组织的表达低于癌旁组织 | 第65-66页 |
| 3.4 Me CP2表达与临床病理参数的关系 | 第66-67页 |
| 3.5 Me CP2与mi R-19a/b存在负相关关系 | 第67-69页 |
| 4 讨论 | 第69-70页 |
| 小结 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-81页 |
| 个人简历和研究成果 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
