| 中文摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 符号说明 | 第10-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-21页 |
| 第一章 自噬的研究进展 | 第12-18页 |
| 1 自噬的分类及发生过程 | 第12-13页 |
| 2 自噬过程的分子机制及信号调控 | 第13-15页 |
| 2.1 自噬过程的分子机制 | 第13-14页 |
| 2.2 自噬过程的信号调控 | 第14-15页 |
| 3 常用的自噬检测法 | 第15-16页 |
| 3.1 透射电子显微镜检测 | 第15页 |
| 3.2 酸性自噬泡、自噬溶酶体的检测 | 第15-16页 |
| 3.3 自噬体膜标志性蛋白质的检测 | 第16页 |
| 4 自噬与凋亡的关系 | 第16-18页 |
| 第二章 镉毒性机理研究进展 | 第18-20页 |
| 1 镉与细胞凋亡 | 第18页 |
| 2 镉与自噬 | 第18-20页 |
| 本研究的目的与意义 | 第20-21页 |
| 第二部分 试验研究 | 第21-42页 |
| 第一章 镉诱导大鼠成骨细胞凋亡 | 第21-30页 |
| 1 材料 | 第21页 |
| 1.1 实验动物 | 第21页 |
| 1.2 主要试剂 | 第21页 |
| 1.3 主要仪器 | 第21页 |
| 2 方法 | 第21-26页 |
| 2.1 溶液的配制 | 第21-23页 |
| 2.2 SD大鼠成骨细胞原代培养 | 第23页 |
| 2.3 Hochest 33258染色观察镉对成骨细胞核形态的影响 | 第23-24页 |
| 2.4 免疫印迹检测成骨细胞中Bax、Bcl-2和Cleaved-PARP蛋白表达 | 第24-26页 |
| 2.5 统计学分析 | 第26页 |
| 3 结果 | 第26-28页 |
| 3.1 镉对成骨细胞Bax、Bcl-2和Cleaved-PARP蛋白表达的影响 | 第26-27页 |
| 3.2 镉对成骨细胞核形态的影响 | 第27-28页 |
| 4 讨论 | 第28-30页 |
| 第二章 镉诱导大鼠成骨细胞自噬水平的改变 | 第30-36页 |
| 1 材料 | 第30页 |
| 1.1 实验动物 | 第30页 |
| 1.2 主要试剂 | 第30页 |
| 1.3 主要仪器 | 第30页 |
| 2 方法 | 第30-31页 |
| 2.1 单丹磺酰尸胺(MDC)染色 | 第30-31页 |
| 2.2 AO染色后FCM定量分析 | 第31页 |
| 2.3 镉处理后对成骨细胞自噬相关蛋白表达的影响 | 第31页 |
| 2.4 免疫荧光 | 第31页 |
| 2.5 统计学分析 | 第31页 |
| 3 结果 | 第31-35页 |
| 3.1 MDC染色观察晚期自噬溶酶体 | 第31-32页 |
| 3.2 AO染色后FCM定量分析 | 第32-33页 |
| 3.3 镉处理大鼠成骨细胞后自噬相关蛋白的表达 | 第33-34页 |
| 3.4 镉处理大鼠成骨细胞后自噬标志性蛋白LC3转移与定位 | 第34-35页 |
| 4 讨论 | 第35-36页 |
| 第三章 自噬在镉致大鼠成骨细胞凋亡中的作用 | 第36-42页 |
| 1 材料 | 第36页 |
| 1.1 实验动物 | 第36页 |
| 1.2 主要试剂 | 第36页 |
| 1.3 主要仪器 | 第36页 |
| 2 方法 | 第36-37页 |
| 2.1 免疫印迹检测CQ和RAP对镉处理的成骨细胞LC3蛋白表达的影响 | 第36-37页 |
| 2.2 电转染法转染siRNA | 第37页 |
| 2.3 免疫印迹检测Beclin1 RNA干扰对镉处理的成骨细胞Beclin1、LC3蛋白表达的影响 | 第37页 |
| 2.4 流式细胞术检测细胞凋亡率 | 第37页 |
| 2.5 统计学分析 | 第37页 |
| 3 结果 | 第37-40页 |
| 3.1 自噬促进剂和抑制剂对镉处理的成骨细胞LC3蛋白表达的影响 | 第37-38页 |
| 3.2 Beclin1 RNA干扰对镉处理的成骨细胞Beclin1、LC3蛋白表达的影响 | 第38页 |
| 3.3 自噬促进剂和抑制剂对镉处理的成骨细胞凋亡率的影响 | 第38-39页 |
| 3.4 Beclin1 RNA干扰对镉处理成骨细胞凋亡率的影响 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-42页 |
| 全文结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第54-55页 |
