| 中文摘要 | 第2-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 引言 | 第7-8页 |
| 1.实验动物 | 第8页 |
| 2.实验仪器及试剂 | 第8-9页 |
| 3.人骨髓间充质干细胞培养与传代 | 第9-10页 |
| 3.1 人骨髓间充质干细胞培养 | 第9页 |
| 3.2 细胞计数 | 第9页 |
| 3.3 细胞的冻存 | 第9-10页 |
| 3.4 冻存细胞的复苏 | 第10页 |
| 4. aggrecanase sh RNA转染骨髓间充干细胞 | 第10-14页 |
| 4.1 转染前准备 | 第10页 |
| 4.1.1 传代 | 第10页 |
| 4.1.2 铺板 | 第10页 |
| 4.2 制备Sonovue微泡 | 第10-11页 |
| 4.3 质粒为载体的序列 | 第11页 |
| 4.4 基因转染骨髓间充质干细胞 | 第11页 |
| 4.5 RT-PCR检测 | 第11-14页 |
| 4.5.1 细胞总RNA提取 | 第11-12页 |
| 4.5.2 RNA纯度的测定 | 第12页 |
| 4.5.3 引物设计以及合成 | 第12页 |
| 4.5.4 引物溶解和稀释 | 第12-13页 |
| 4.5.5 荧光定量PCR反应 | 第13-14页 |
| 4.6 绿色荧光表达检测 | 第14页 |
| 5.结果 | 第14-17页 |
| 1.人骨髓间充质干细胞形态学观察 | 第14-15页 |
| 2.细胞生长状况 | 第15页 |
| 3.荧光显微镜下比较各组转染效率 | 第15-16页 |
| 4.各组间aggrecanase-1 基因表达情况 | 第16-17页 |
| 6.动物体内转染实验 | 第17-24页 |
| 1.类风湿关节模型制备 | 第17-18页 |
| 2.配制微泡与Entranster-in vivo混合液 | 第18-19页 |
| 3.实验分组与体内转染 | 第19-20页 |
| 4.大体观察 | 第20页 |
| 5.制备滑膜冰冻切片及荧光显微镜下观察 | 第20页 |
| 6.滑膜HE染色病理切片制备及观察 | 第20-21页 |
| 7.RT-PCR检测COX-2、aggrecanse表达水平 | 第21-24页 |
| 7.讨论 | 第24-25页 |
| 参考文献 | 第25-27页 |
| 综述 | 第27-34页 |
| 参考文献 | 第31-34页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第34-35页 |
| 致谢 | 第35-36页 |
